8 metodos de cultivos protozoos

Breve pressentacion de los protozoarios

1. ¿ QUÉ SON LOS PROTOZOOS? Son organismos animales microscópicos formados por una sola célula (unicelulares), heterótrofos , que viven en medios líquidos, son capaces de moverse y se reproducen por bipartición (la célula se divide en dos). Algunos de ellos pueden formar colonias . Se incluyen en el reino Protistas, junto con otros organismos unicelulares cuyo núcleo celular está rodeado de una membrana. Los protozoos no tienen estructuras internas especializadas a modo de órganos o, si las tienen, están muy poco diferenciadas.

2. Respiración La respiración la realizan a través de la membrana celular y por las partículas de agua absorbidas con el alimento.   Reproducción Los protozoos pueden reproducirse por bipartición (división en dos), por gemación (crecimiento de una yema o célula hija) y por esporulación (fragmentación de la célula madre en esporas). Excreción En el citoplasma se forman vacuolas nutritivas y los residuos son expulsados por las vacuolas fecales. Dichos residuos pueden ser sales minerales que sirven para depurar las aguas servidas. Alimentación La alimentación de los protozoos suele realizarse mediante la captura del alimento que penetra en el citoplasma a través de una abertura de la membrana.

3. Clasificación de los protozoos según su modo de desplazarse

4. GENERALIDADES DE MEDIOS DE CULTIVO Por su consistencia, los medios de cultivo preparados pueden ser: •Líquidos, sin agar •Semisólidos, 0.5% agar •Sólidos 1.5% agar

5. Medios líquidos Se emplean fundamentalmente para: - Cultivar los microorganismos y obtener grandes cantidades de los mismos o bien la producción de metabolitos específicos. - Estimular y promover la selección de algún o algunos microorganismos e impedir que otros se multipliquen. - Identificar al microorganismo estudiado mediante pruebas bioquímicas. Medios semisólidos Se utilizan para identificaciones bioquímicas y averiguar si el germen estudiado es móvil. Los medios semisólidos tienen una consistencia blanda.   Medios sólidos Se utilizan para obtener colonias aisladas de microorganismos. Los medios sólidos constituyen la mayor parte de los medios de cultivo que se emplean en Microbiología.

6. Cultivo en medio líquido • Habitualmente se realiza en tubos o en matraces. El crecimiento se puede manifestar por enturbiamiento, por formación de velo o película, o por sedimento. Cultivo en medio sólido. Medios selectivos Son medios que contienen sustancias que impiden el desarrollo de algunos microorganismos, pero en una flora mixta permiten el aislamiento y recuperación del germen o grupo de gérmenes de interés. Medios selectivos de enriquecimiento Son medios líquidos que estimulan la multiplicación de algún germen determinado e impiden o inhiben la reproducción de otros.

7. MEDIO SELECTIVO Y DIFERENCIAL Medios diferenciales Son aquellos que contienen indicadores de ácido base, redox o sustancias que detectan cambios en el medio o en la característica típica de las colonias. Medios para cultivar gérmenes anaeróbicos Son medios de cultivo para aquellos gérmenes que requieran condiciones de anaerobiosis o de microaerofilia. Medios de transporte Sirven para transportar los especímenes que contienen a los microorganismos, del sitio de la toma del producto hasta el laboratorio donde va a efectuarse el estudio. Estos medios impiden que se altere la proporción original de la flora microbiana en los especímenes. Medios para filtración a través de membrana Pueden ser líquidos o sólidos. En el primer caso, se preparan a la concentración usual y permiten el crecimiento de microorganismos presentes en la membrana. Los medios sólidos tienen un contenido mínimo de Agar para favorecer la difusión de nutrientes del medio de la membrana.

8. Aislamiento Aislar:  Es separar un tipo de microorganismo a partir de una población mixta. En hábitats naturales, raramente encontramos a los microorganismos en cultivo puro. Aislamiento directo:  Se logra directamente a partir de una muestra cuando el o los microorganismos están en una proporción adecuada., se realiza por estrías (agotamiento) con o sin dilución previa de la muestra (suelo, alimentos), en medio sólido. Aislamiento por enriquecimiento: Cuando el microorganismo que se desea aislar e identificar se encuentra en baja proporción en la muestra, se incluye una primera etapa que consiste en sembrar la muestra en medio líquido. Luego de varios pasajes se aísla por el método de estrías. Factores del ambiente •  Físicos:  temperatura, gases, pH, presión osmótica •  Químicos:  nutrientes, sustancias antimicrobianas • Biológicos:  otros microorganismos, micro y meso fauna, vegetación, afectan las actividades microbianas Los distintos factores actúan simultáneamente y resulta difícil el análisis integrado de los efectos.

9. CULTIVO Y OBSERVACION DE PROTOZOOS Materiales: Microscopio Portaobjetos Cubreobjetos Cuentagotas Papel de filtro Cristalizador Rojo neutro Hojarasca, heno u hojas externas de lechugas, acelgas, coliflor, etc. CULTIVO: Coloca dentro del cristalizador unos trozos de hojas exteriores de hortalizas, heno u hojarasca. Añade agua hasta un dedo por debajo del borde. Deja reposar el cultivo unos 15 días a temperatura ambiente. OBSERVACION: Toma una muestra de la infusión y deposita una gota de la misma sobre el portaobjetos. Tápala con el cubreobjetos y observa la preparación detenidamente. Coloca en uno de los bordes del cubreobjetos una gota de rojo neutro y absorbe por el otro extremo con papel de filtro. Podrás comprobar cómo los protozoos que observaste se van tiñendo de rojo y siguen moviéndose.