Aglutinacao

Aula sobre Aglutinacao da disciplina Imunologia I

1. UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA INSTITUTO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE – ICS DEPARTAMENTO DE BIOINTERAÇÃO DISCIPLINA: IMUNOLOGIA I – ICS 045 REAÇÕES DE AGLUTINAÇÃO Trabalho realizado pelo Acadêmico de Medicina Veterinária da UFBA José Tadeu Raynal , sob orientação dos Professores Robert Schaer , Roberto Meyer, Claudia Brodskin e Ricardo Portela. Atualizado em Fevereiro de 2010.

2. CARACTERÍSTICAS BÁSICAS

3. As reações de aglutinação decorrem da ligação entre o Ac e Ag particulado. É o agrupamento de partículas, usualmente por moléculas de Ac , que se ligam a Ag na superfície de partículas adjacentes. Agregação visível de partículas Eritrócitos Bactérias Fungos Látex CARACTERÍSTICAS BÁSICAS

4. Fatores que influenciam a formação dos agregados Classe do anticorpo envolvido. Concentração iônica e pH do meio. Presença de macromoléculas, íons, enzimas e conservantes. Tempo e temperatura. Padronização adequada da suspensão de micropartículas ou células. Concentração ótima de antígeno ou Ac a ser fixado nas micropartículas ou células. Estabilidade da ligação do Ag/Ac e acessibilidade dessa molécula nas micropartículas ou células. CARACTERÍSTICAS BÁSICAS

5. Vantagens: • Baixo custo. • Boa especificidade. • Leitura visual. • Facilidade de execução. Desvantagens: • Baixa sensibilidade. • Reprodutibilidade dos lotes de reagentes. • Acessibilidade molecular para interação Ag-Ac . • Estabilidade da ligação do Ag / Ac no suporte. CARACTERÍSTICAS BÁSICAS

6. TIPOS DE REAÇÃO

7. Neste teste, o antígeno faz parte naturalmente da célula, e haverá aglutinação dessas células promovida por anticorpo contra esses antígenos (antígeno é naturalmente insolúvel). Anticorpo Antígeno Complexo precipitado Ex: Identificação de antígenos eritrocitários na tipagem sanguínea, reação de Widal (febre tifóide). AGLUTINAÇÃO DIRETA

8. Na reação de aglutinação direta utilizam-se partículas antigênicas insolúveis em sua forma íntegra ou fragmentada. Hemácias, bactérias, fungos, protozoários podem ser aglutinados diretamente por anticorpo. Os testes para detectar anticorpos específicos são realizados empregando-se diluições em série do anticorpo, frente a uma quantidade constante de antígeno. Após um período de incubação, a aglutinação se completa e o resultado é geralmente expresso como o título do anti-soro, isto é, a máxima diluição em que ocorre a aglutinação. Tipagem ABO Testes confirmatórios para sífilis Aglutinação bacteriana Presença de infecção Diferenciação de espécies Salmonelose aviária Coriza infecciosa das galinhas Micoplasmose Brucelose AGLUTINAÇÃO DIRETA

9. Tipagem ABO AGLUTINAÇÃO DIRETA

10. Esse método emprega a adsorção de anticorpos ou antígenos protéicos solúveis na superfície de micropartículas inertes (suporte). Para o teste, as hemácias e as partículas inertes (látex, leveduras, etc.) podem ser sensibilizadas por adsorção passiva, devida ao contato direto com os antígenos solúveis, por adsorção via agentes químicos, como ácido tânico, cloreto de cromo e por conjugação do antígeno, por meio de ligações químicas covalentes, fornecendo reagentes estáveis. Devido à grande diversidade de antígenos que podem se ligar às células ou partículas, a aplicação dos testes de aglutinação passiva é muito variada. + AGLUTINAÇÃO INDIRETA (PASSIVA)

11. Teste de gravidez + Incubados e colocados em placa Particulas revestidas com hCG Ac Positivo não aglutina, pois os Ac se ligaram ao hCG da urina na incubação Urina Soro anti hCG + POSITIVO hCG + Soro anti hCG NEGATIVO Urina + Incubados e colocados em placa Ac Negativo aglutina INIBIÇÃO DA AGLUTINAÇÃO

12. Ac antiimunoglobulinas (Robert Coombs ). Doença Hemolítica do Recém Nato – mãe produz IgG anti-Rh (DHRN) Não aglutinam os eritrócitos. Direto: Ac ligados aos eritrócitos fetais. Indireto: Ac anti-Rh não aglutinantes no soro materno. Permite detectar incompatibilidades Rh, prevenindo contra DHRN. TESTE DE COOMBS

13. O efeito PRÓ-ZONA ocorre devido ao excesso de anticorpos na amostra, que ocorre nos soros fortemente reagentes. Pode ocasionar resultados FALSO-NEGATIVOS. Para evitar o efeito pró-zona, emprega-se soro diluído. Ocorre FALSO-POSITIVOS RELAÇÃO ANTÍGENO X ANTICORPO