Aislamiento del vibrio cholerae

Bacteria Vibrio cholerae, causante del cólera. ¿Cómo aislarla? He aquí una breve pero útil explicación.

1. Aislamiento A partir de vómitos o heces diarreicas. Se extrae una parte la cual se introduce en un medio de transporte. Después se puede observar en fresco, al microscopio de contraste de fase o mediante una tinción gram .

2. Se siembra un alícuota en un medio de enriquecimiento que sea selectivo, como el TCBS (que contiene tiosulfato, citrato, sales biliares y sacarosa). Una vez obtenido en cultivo puro, se procesa la muestra mediante diversos tests bioquímicos: oxidasa, LDC, ODC, entre otros.

3. Crecen con rapidez en agar peptona, agar sangre con pH cercano a 9,0; o sobre agar TCBS , y en 18 horas se pueden observar colonias típicas. Pueden incubarse unas pocas gotas de heces, para enriquecimiento, durante 6 a 8 horas en caldo taurocolato-peptona (pH 8 a 9). TCBS Medio: También conocido como Agar Tiosulfato Citrato Bilis Sacarosa, o Agar Selectivo para Vibrios . Medio selectivo para el aislamiento y cultivo de Vibrio cholerae , y otras especies de Vibrio a partir de heces, agua y alimentos contaminados. También conocido como Agar Tiosulfato Citrato Bilis Sacarosa, o como Agar Selectivo para Vibrios .

4. Figura 1 . Cultivo de V. cholerae en medio TCBS. Después de 18-24 horas de incubación a 35-37ºC crecen como colonias amarillas y brillantes de 2-4 mm de diámetro. Figura 2 . Detalle ampliado del aspecto macroscópico de V. cholerae en TCBS donde se observa el color amarillo de las colonias producido por la fermentación de la sacarosa.

5. Figura 3 . Tinción de gram. Microscopía óptica. 1000 aumentos. V . cholerae se presenta como típicos bacilos pequeños, curvados o no, gram negativos.