clase-Formulas Farmacéuticas estandarizadas,.pptx

formulaciones estandarizadas de cannabis

1. Dra. Farmacéutica Cristina Ramirez. Dpto Química y Bioquímica, FCEyN. Universidad Nacional de Mar del Plata

2. DESCARBOXILACIÓN

3. DESCARBOXILACIÓN

4. Pérdida significativa de concentración de cannabinoides neutros para los tres compuestos a temperaturas y tiempos de reacción elevados Esta pérdida se reduce en ausencia de oxígeno. La cantidad de material vegetal que se descarboxila es otra variable a considerar, ya que influirá en el mecanismo de transferencia de calor y la exposición al oxígeno en el horno y ralentizará el proceso, dando lugar a velocidades de reacción aparentemente más bajas

5. DESCARBOXILACIÓN ?

6. Métodos extractivos Extracción mecánica Destilación Extracción con solvente Líquido Gas licuado Fluido supercrítico Extracción

7. Capacidad de extraer el soluto con un buen coeficiente de reparto Selectivo frente a impurezas Estable frente a las condiciones del proceso Baja o nula toxicidad (Aceptado por ICH) Ser económico Ser seguro y amigable con el medio ambiente ¿Qué características debe tener el solvente?

8. Consejo Internacional para la Armonización de Requisitos Técnicos para Productos Farmacéuticos de Uso Humano (ICH) International Council for Harmonization of Technical Requirements for Pharmaceuticals for Human Use  La misión de ICH es lograr una mayor armonización en todo el mundo para garantizar que se desarrollen, registren y mantengan medicamentos seguros, efectivos y de alta calidad de la manera más eficiente en cuanto a recursos, cumpliendo al mismo tiempo altos estándares.  

9. Propiedades del solvente Densidad Viscosidad Polaridad Parámetro de solubilidad

10. Eficiencia o rendimiento de la extracción. Calidad del extracto: esto incluye pureza y "perfil" de otros compuestos. Capacidad de rendimiento y escalabilidad. Control ambiental. Costos/dificultades técnicas Aspectos relevantes de los procesos de extracción

11. Variables a tener en cuenta en la extracción Elegir el solvente a emplear, el solvente óptimo será el que logre extraer un mayor rendimiento del compuesto de interés. Relación sólido-líquido: la proporción más conveniente de trabajo será aquella con la que se alcancen los mayores rendimientos de extracción Condiciones de temperatura y presión Velocidad de agitación y tiempo de extracción Viscosidad del medio

12. Solvente : Etanol Temperatura : variable. Tiempo de extracción : variable importante. Relación masa vegetal/masa solvente Pocas variables de control. Muy económico Maceración con o sin agitación

13. EXTRACTOR SOXHLET Lo que hace el extractor Soxhlet es realizar numerosas extracciones de manera automática, con el mismo solvente que se evapora y condensa llegando siempre de manera pura al material El extracto se concentra eliminando el solvente con un rotavapor.

14. 41° 25° POTENCIA CANNÁBICA

15. EXTRACCIÓN VEHÍCULOS LIPÍDICOS Ácido laúrico Ácido linoleico omega 6 Ácido oleico omega 9 Ácido linolénico omega 3 Aminoácidos, linoleico, oleico, palmítico y esteárico, así como vitaminas A, D, C, E y B

16. Los vehículos lipídicos utilizados en esta investigación fueron Polioxilglicéridos (mono-, di- y triglicéridos y PEG-6 mono- y diésteres de ácido oleico (C18:1), HLB:9 (Labrafil ®); omega C18:2; C18 :3. HLB:7 (Sésamo); Glicéridos, C16-18 y C18-insaturados mono- y di-(o (9Z,12Z)-octadeca-9,12-ácido dienoico, monoéster con glicerol) HLB:1 ( Maisine®); glicéridos, mezcla de decanoilo y octanoilo (o glicéridos, C8-10) (o triglicéridos, cadena media) HLB:1 (Labrafac®) proporcionado por Gattefosse SAS.

17. Proceso de descarboxilación El material vegetal se procesó mediante molienda fina y se sometió a una temperatura de 120 °C durante 30 minutos en un frasco sellado. Posteriormente, se dejó enfriar a temperatura ambiente antes de proceder a la extracción. Proceso de extracción Una cantidad de 0,5 gramos de flores procesadas se colocaron en frascos sellados con 5 mL del vehículo, con agitación, al baño maría durante dos horas. Posteriormente, los extractos se filtraron en caliente y se dejaron enfriar a temperatura ambiente para su posterior análisis.

18. VEHICLE HLB CANNABINOID μ g ml -1 Sesame 7 CDB 3631.8 ± 180.0   THC 2981.0 ± 295.1 Maisine 1 CBD 7358.1 ± 956.5   THC 4768.0 ± 453.0 Labrafil 9 CBD 5052.4 ± 201.1   THC 4761.1 ± 543.6 Labrafac 1 CBD 4696.7 ± 448.1   THC 4794.3 ± 305.3 Comparación del contenido de CBD y THC expresado en mg mL-1 (ppm) en los diferentes extractos evaluados.

19. VEHICLE Flavonoid QE µg ml -1 Polyphenols GAE µg ml -1 TEAC Sesame 45.7 ± 2.3 325.4 ± 16.3 960.1 ± 48.0 Maisine 56.0 ± 2.8 439.3 ± 22.0 1029.7 ± 51.5 Labrafil 42.5 ± 2.1 359.4 ± 18.0 1019.3 ± 51.0 Labrafac 34.2 ± 1.7 396.2 ± 19.8 990.2 ± 49.5 a) Capacidad antioxidante expresada en μg de equivalentes de TROLOX (TEAC) por ml de extracto, b) Contenido total de polifenoles expresado en μg de equivalentes de GA (GAE) por mL de extracto, c) Contenido total de flavonoides expresado en μg de equivalentes de Q (QE ) por ml de extracto. d-f son las correlaciones para sésamo (círculo), Labrafil® (triángulo) y Maisine® (cuadrado)

20. Broad Spectrum se aplica a las extracciones que tienen como objetivo retener un gran complemento de fitoquímicos sin el THC, lo que permite cierta acción del efecto Entourage. El cáñamo, definido como plantas de cannabis que contienen menos del 0,3% de THC, constituye la base de la mayoría de los extractos de Broad Spec. También se puede crear eliminando el THC del extracto de Full Spectrum mediante destilación.

21. Producto terminado Sativex® es una solución, que consiste en un vehículo de etanol, propilenglicol y menta piperita, que contiene extractos de Tetranabinex® y Nabidiolex®, equivalentes a 27 mg / ml de ∆ 9 -THC y 25 mg / ml de CBD por dosis.

22. Los extractos de cannabis medicinal (CME) son sinónimos de sustancias farmacéuticas botánicas del cannabis Los CME se derivan de la materia prima botánica del Cannabis y contienen el ingrediente farmacéutico activo (cannabinoides) en varios niveles de purificación y refinamiento La purificación de la sustancia farmacéutica botánica puede implicar extracción repetida, separación cromatográfica, destilación, winterización Cuantificación de cannabinoides dentro de la materia prima botánica del cannabis y de las sustancias farmacéuticas botánicas del cannabis. o CME

23. DESARROLLO DE PROCEDIMIENTOS ANALÍTICOS ESTANDARIZADOS SÓLIDOS PARA LA CUANTIFICACIÓN DE CANNABINOIDES: SENTAR LAS BASES PARA UNA INDUSTRIA FARMACÉUTICA BASADA EN CANNABIS Cosecha de flores Contaminación microbiana, por metales pesados, pesticidas y aflatoxinas Secado a temperatura y humedad controladas Materia prima: pruebas de autenticación, especificación

24. Determinación de Impurezas Guía de Buenas Prácticas de Fabricación de Medicamentos de Uso Humano ANEXO 15: FABRICACIÓN DE MEDICAMENTOS HERBARIOS Adulterantes vegetales Inorgánicas Pesticidas, agentes fumigantes , fertilizantes Metales pesados Humedad Sustancias extrañas Orgánicas Cenizas Cont. microbiana, aflatoxinas Farmacopeas

25. Resolución 781/2022 RESOL-2022-781-APN-MS ARTÍCULO 1°.- Créase la categoría de “Productos vegetales a base de cannabis y sus derivados destinados al uso y aplicación en la medicina humana”, los cuales conforman una categoría diferente a los productos ya regulados como medicamento, especialidad medicinal, según el Decreto N° 150/1992 (T.O. 1993) y medicamento herbario según la Resolución del Ministerio de Salud N° 1817/2013 y disposiciones ANMAT Nº 5418/2015 y N° 5482/2015. ARTÍCULO 2°.- Se define como “Productos vegetales a base de cannabis y sus derivados destinados al uso y aplicación en la medicina humana” conforme a la categoría establecida en el artículo 1° de la presente Resolución, a todo producto de composición cuali-cuantitativa claramente definida y comprobable que contenga como Ingrediente/s Farmacéutico/s Activo/s (IFA) uno o más cannabinoides derivados de origen vegetal obtenidos con los requerimientos de buenas prácticas de elaboración establecidas. Cuando los IFA de cannabinoides mencionados previamente, posean porcentajes de Tetrahidrocannabinol (THC) superiores a 0,3% P/P en base seca considerando el ácido tetrahidrocannabinol (ATHC) que pudiera estar presente se les aplicará el régimen correspondiente a las sustancias psicotrópicas. A los IFA de cannabinoides con porcentajes de THC menores o igual 0,3% P/P en base seca - considerando el ATHC que pudiera estar presente no se considerarán sustancias psicotrópicas. Asimismo, otros componentes no cannabinoides podrán formar parte de la categoría previamente definida.

26. ADMINISTRACIÓN NACIONAL DE MEDICAMENTOS, ALIMENTOS Y TECNOLOGÍA MÉDICA Disposición 6431/2022. DI-2022-6431-APN-ANMAT#MS REQUISITOS DE CONTROL DE CALIDAD PARA PRODUCTOS VEGETALES A BASE DE CANNABIS Y SUS DERIVADOS DESTINADOS AL USO Y APLICACIÓN EN LA MEDICINA HUMANA Se aplicarán a cualquier producto vegetal a base de Cannabis y sus derivados destinados al uso y aplicación en la medicina humana para ser suministrado por vía oral y tópica. Se excluyen las vías de administración parenteral. Información general referente al IFA Para el IFA de partida deberá consignar la siguiente información de acuerdo al tipo de materia prima utilizada en la fabricación del producto, como por ejemplo droga vegetal, preparado de droga vegetal como extractos, aceites, resinas, cannabinoides purificados y toda otra materia prima que la autoridad sanitaria considere aceptable. 1.1. Nombre científico (género, especie y categoría taxonómica infraespecífica (subespecie, variedad, linea, clon, raza, quimiotipo u otros) 1.2. Parte de la planta usada 1.3. Nombre común 1.4. Cantidad de la droga vegetal o preparado de droga vegetal 1.5. Datos de provisión: zona geográfica (provincia/región/país) de procedencia de la materia prima, especie, variedad, quimiotipo, origen de las semillas y material de propagación, si corresponde, cultivo (técnica y fecha de recolección), sustancias químicas de uso agrícola aplicadas, tratamiento post cosecha y secado, control de la humedad post cosecha forma de envasado, condiciones de almacenamiento y transporte 1.6. Información sobre los marcadores utilizados en el control de calidad 1.7. Declaración de contenido de Cannabinoides

27. Control de calidad del IFA Se deberán realizar los siguientes controles de acuerdo al tipo de materia prima utilizada en la fabricación del producto (droga vegetal, preparado de droga vegetal como extractos, aceites, resinas, cannabinoides purificados). Los ensayos incluidos o excluidos y sus especificaciones deberán estar debidamente justificados de acuerdo a criterios técnico-científicos adecuados. Deberán realizarse utilizando métodos validados o verificados en caso de estar codificados en farmacopeas vigentes internacional o nacionalmente reconocidas. Declarar y aportar Bibliografía de referencia. Las características químicas del producto deben compararse contra sustancias de referencia oficiales o debidamente caracterizadas. Se deberán utilizar aquellos establecidos en la metodología de control seleccionada. 2.1. Aspecto, Características organolépticas 2.2. Análisis macroscópico y microscópico de la droga vegetal 2.3. Materia extraña en droga vegetal 2.4. Pérdida por secado/contenido de agua 2.5. Cenizas totales en droga vegetal 2.6. Punto de fusión de cannabinoides purificados 2.7. Rotación óptica de cannabinoides purificados 2.8. Identificación espectroscópica/cromatográfica de cannabinoides 2.9. Valoración de Cannabinoides

28. Algunos cannabinoides como el THC y el CBD normalmente existen en la planta de cannabis en forma de su ácido correspondiente, a saber, THC-ácido y CBD-ácido respectivamente. Estos ácidos forman THC y CBD como resultado de la descarboxilación durante el almacenamiento o el calentamiento. El ensayo debe realizarse con referencia a las sumas totales del contenido de cannabinoides en la planta de cannabis como el total de cannabinoides y su ácido correspondiente. 2.10. Contenido de THC 2.11. Micotoxinas 2.12. Pesticidas 2.13. Productos de degradación (ej CBN) 2.14. Impurezas orgánicas 2.15. Impurezas elementales / Determinación de metales pesados 2.16. Control microbiológico 2.17. Control de excipientes 2.18. La autoridad sanitaria podrá solicitar información adicional que considere necesaria para garantizar la calidad del producto a autorizar.

29. Información general referente al producto terminado Cada lote debe fabricarse a partir de materias primas que cumplan con los requisitos de los puntos 1 y 2 del capítulo 5 del presente documento. Deberá declarar la siguiente información, según corresponda a la forma farmacéutica propuesta y su fórmula: 3.1. Nombre científico (género, especie y categoría taxonómica infraespecífica (subespecie, variedad, linea, clon, raza, quimiotipo u otros) 3.2. Parte de la planta usada 3.3. Nombre común 3.4. Nombre comercial 3.5. Concentración de activos 3.6. Excipientes 3.7. Protocolo del proveedor de la materia prima donde consten los ensayos realizados en origen 3.8. Información sobre los marcadores utilizados en el control de calidad. 3.9. Nombre y composición de los solventes de extracción empleados en el método de fabricación 3.10. Período de vida útil propuesto y condiciones de conservación. 3.11. Período de vida útil propuesto y condiciones de conservación del producto en uso (una vez abierto).

30. Ensayos en control de calidad del producto terminado: 4.1. Aspecto, Características organolépticas 4.2. Densidad (en caso de corresponder según la forma farmacéutica) 4.3. pH (en caso de corresponder según la forma farmacéutica) 4.3. Contenido de agua (en caso de corresponder según la forma farmacéutica) 4.4. Color límite (en caso de corresponder según la forma farmacéutica) 4.5. Volumen extraíble (en caso de formas farmacéuticas orales líquidas) 4.6. Contenido de alcohol etílico 4.7. Control de calidad de excipientes 4.8. Identificación de cannabinoides 4.9. Valoración de Cannabinoides (ver aclaraciones del punto 2. 9) 4.10. Contenido de THC 4.11. Solventes residuales, demostrar cumplimiento del capítulo de Solventes Residuales según Farmacopea Nacional Argentina. (*) 4.12. Micotoxinas (*) 4.13. Pesticidas (*) 4.14. Productos de degradación (ej. CBN) (*) 4.15. Impurezas orgánicas (*) 4.16. Impurezas elementales / Determinación de metales pesados (*) 4.17. Control microbiológico (*) En caso de tener el control de calidad local de Materia Prima con estos ítems analizados, no será necesaria su presentación. Podrán presentar el protocolo de liberación de Materia prima.

31. AFLATOXICOSIS Las aflatoxinas son toxinas producidas por los hongos Aspergillus flavus y Aspergillus parasiticum. Se encuentran fácilmente como contaminantes de una amplia variedad de alimentos Químicamente, son estables en los alimentos y resistentes a la degradación bajo procedimientos de cocción normales. La contaminación con aflatoxinas precosecha está favorecida por altas temperaturas, prolongadas condiciones de sequía y alta actividad de insectos, mientras que la producción de aflatoxinas postcosecha es favorecida por temperaturas cálidas y alta humedad. Las aflatoxinas más importantes son: B1, B2, G1, G2. Todas las aflatoxinas son tóxicas para el hígado, pudiendo producir cáncer de hígado tanto en animales como en el hombre

32. Las variedades de cáñamo y cannabis son conocidas por acumular metales pesados ​​como plomo, cadmio, arsénico, mercurio, cromo, níquel, manganeso y cobalto en sus raíces, brotes, yemas y semillas. Debido a esta habilidad, se ha usado cáñamo para la remediación de suelo contaminado (fitorremediación y fitoextracción). Por otro lado, esto puede dificultar uso del cáñamo en la comida o industria médica. Qué en consecuencia, todo el material de cáñamo utilizado en alimentos o productos farmacéuticos deben ser probados con respecto a su contenido de metales pesados. La espectrometría masas por plasma acoplado inductivamente ICPMS es altamente sensible y capaz de determinar de forma cuantitativa casi todos los elementos presentes en la tabla periódica que tengan un potencial de ionización menor que el potencial de ionización del argón a concentraciones muy bajas (nanogramo/litro o parte por trillón, ppt). Se basa en el acoplamiento de un método para generar iones (plasma acoplado inductivamente) y un método para separar y detectar los iones (espectrómetro de masas). La muestra, en forma líquida, es transportada por medio de una bomba peristáltica hasta el sistema nebulizador donde es transformada en aerosol gracias a la acción de gas argón. https://www.youtube.com/watch?v=Nw3jpceQkzY Metales pesados

33. ESTABILIDAD Y CALIDAD MICROBIOLOGICA DE ACEITES DE Cannabis sativa Se realizaron ensayos de valoración y caracterización química en las formulaciones finales. Normas aplicables a los medicamentos herbarios según Disposición ANMAT N° 3602/2018 “Guía de Buenas Prácticas de Fabricación para Elaboradores, Importadores/Exportadores de Medicamentos de Uso Humano”

34. CODEX MEDICAMENTARIUS ARGENTINO Recuento de microorganismos aerobios totales Recuento combinado de hongos filamentosos y levaduras Escherichia coli

35. CALIDAD MICROBIOLÓGICA DE TRES ACEITES CON DISTINTOS CONTENIDO DE CANNABINOIDES Los tres aceites presentaron una calidad microbiológica aceptable durante 6 meses a 25°C y 4 meses a 42°C. Mayor contenido de CBD Mayor contenido de THC Contenido de CBD/THC Conservado a distintas temperaturas 25 °C 42 °C

36. Los efectos de los aceites fueron estudiados contra bacterias Gram-positivas y Gram-negativas. ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DE ACEITE DE CANNABIS SATIVA Concentración Inhibitoria Mínima (CIM) Concentración Bactericida Mínima (CBM)

37. Mayor contenido de CBD Mayor contenido de THC Contenido de CBD/THC ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DE TRES ACEITES CON DISTINTOS CONTENIDO DE CANNABINOIDES Las tres formulaciones de aceite presentaron actividad antimicrobiana frente a bacterias Gram-positivas y Gram-negativas.

38. Desarrollo galénico y evaluación de gomitas masticables a base de resina de Cannabis de espectro completo INTRODUCCIÓN El cannabis medicinal ha ganado reconocimiento como alternativa terapéutica para diversas patologías, incluidas enfermedades crónicas y trastornos neurológicos. Para garantizar su eficacia y seguridad, es necesario desarrollar formulaciones estandarizadas, estables y de dosificación precisa. Formulación y Elaboración de Gomitas Masticables con Resina de Cannabis Se desarrolló sobre la base de una matriz de glicerina y gelatina. El proceso se inicia incorporando la resina al volumen de glicerina hasta obtener una suspensión uniforme. A continuación, se agrega la gelatina bajo agitación y con temperatura controlada, mantenida entre 80 y 85 °C. Finalmente, se adiciona el regulador de pH junto con los excipientes que otorgan color y sabor a la preparación. Se utilizaron resinas con alto contenido de CBD y CBDA, procurando mantener la dosis de THC por debajo de 6 mg por unidad, con el fin de minimizar los efectos psicoactivos y optimizar el perfil terapéutico de la formulación. OBJETIVO Lograr la formulación de gomitas masticables medio para la administración de cannabis medicinal, optimizando dosificación, aceptación del paciente y reducción de riesgos asociados a formas farmacéuticas tradicionales. Las gomitas masticables se disolvieron en agua a 65 °C y se sonicaron hasta su completa disolución. Luego, se extrajo con acetato de etilo y el extracto fue analizado mediante TLC y GC-MS para identificar y cuantificar cannabinoides Identificación UV: Se observa presencia de cannabinoides en extracto de acetato de etilo. Chiodini , Anabella 1 ; Fuentes, Giselle ,2 ; Brugnera Saravia, Valentín 1 ; Mastai , Ricardo 3 ; Orallo Dalila 1 ; Ramírez, Cristina 1 1 Dto. de Química y Bioquímica, FCEyN , UNMdP , Funes 3350, 7600 Mar del Plata, Argentina. [email protected] 2 Instituto de Investigaciones en Producción Sanidad y Ambiente, FCEyN , UNMdP , CONICET. Mar del Plata 3 Asociación Civil Cannabis Medicinal de Mar del Plata, Rawson 983, Mar del Plata, Argentina Las gomitas masticables obtenidas presentan un aspecto traslúcido, buena elasticidad y características organolépticas aceptables, lo que facilita su administración y aceptación en distintos grupos de pacientes. PROYECCIONES Y PERSPECTIVAS Se pretende realizar una caracterización exhaustiva de la formulación completa y la matriz, a través de pruebas de resistencia mecánica y evaluaciones detalladas de su estabilidad a lo largo del tiempo. CONCLUSIONES Se logró desarrollar una formulación estable, con características organolépticas, que presenta un gran potencial para su producción industrial y alta aceptabilidad por parte de los pacientes. Referencias   AGUIRRE, M.; Orallo, D.; SUAREZ, P.A. ; RAMIREZ, C.L.. 2023. NATURAL PRODUCT RESEARCH (pp. 1-6) TAYLOR & FRANCIS LTD.

39. Formulación de un gel con resina de espectro completo de Cannabis sativa y puesta a punto de un protocolo sencillo para cuantificación de cannabinoides Lopez Berguño E 1 .; Aguirre M.E. 1,4 , Orallo D.E 1 .; Liggio M.E. 2 ; Nutter D. 3 ; Ramirez C.L. 1 1 -Departamento de Química y Bioquímica, FCEN, UNMDP. [email protected] , 2 - Colegio de farmacéuticos de Gral. Pueyrredón, 3 -Asociación Civil CBG2000. 4- IFIMAR Resinas alts en CBD y CBDA ( Quimiotipo III) provenientes de la asociación civil CBG2000 como parte de un convenio de I+D de Conicet. La formulación del hidrogel se inició con la disolución de la resina en propilenglicol, seguida de su homogeneización en mortero con carboximetilcelulosa (CMC). Esta dispersión se incorporó de manera controlada a una mezcla acuosa de polisorbato 20, mantenida a 60°C bajo agitación constante. Tras la adición completa, la mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. El producto final fue un gel homogéneo, ligeramente translúcido, con propiedades reológicas que permiten una distribución uniforme y fácil aplicación. Cuantificación en el hidrogel  extracción con etanol 96%  disgrega la estructura del gel e inestabiliza las micelas de polisorbato liberando los cannabinoides, mientras que la carboximetilcelulosa precipita. Diluciones  HPLC. Columna C18, FM acetonitrilo:agua (67:33) con 0,1% de ácido fórmico. Curvas de calibración HPLC Cromatograma del gel CONCLUSIONES: La resina a pesar de su lipofilicidad , pudo incorporarse eficientemente en la matriz , de forma de obtener propiedades organolépticas acordes , y fue posible realizar una cuantificación reproducible por medio de técnicas de HPLC con estandares externos

40. MUCHAS GRACIAS!!