La Histopatología Es el estudio de los tejidos enfermos a través del uso del microscopio. Métodos usados en Histopatología: Microscopía óptica de l uz Microscopía electrónica Histo e Inmunohistoquímica Biología Molecular
Aplicaciones del Estudio Histopatológico Es la técnica Gold-standard para el diagnóstico de tumores sin importar el origen tisular Permite caracterizar un gran número de lesiones tisulares: Inflamaciones, infecciones, alergias, trastornos hormonales, respuestas adaptativas, reparativas, degenerativas , Caracteriza o aproxima al diagnóstico de múltiples agentes infecciosos: ácaros, hongos, bacterias, parásitos Permite el diagnóstico de algunas infecciones víricas y en otros casos sugiere compatibilidad
Ventajas Diagnóstico sensible y específico Para el diagnóstico de diversas enfermedades Permite valorar la arquitectura y distribución de la lesión – Cáncer Establece factores de pronóstico Programas de manejo, prevención y control Realizar seguimiento a enfermedades Apoyo a la investigación
PAPILOMAS
Carcinoma de células escamosas
Carcinoma mamario
Osteosarcoma
Condrosarcoma
Tumor venéreo Transmisible
Enfermedades Autoinmunes
Microscopía óptica de luz Tinción de rutina: Hematoxilina-eosina
Coloraciones especiales Histoquímica - Coloraciones especiales Identificación de microorganismos **** Diferenciar células Diferenciar tejidos Identificar minerales Afinidad por diferentes componentes de la estructura celular
Ácido peryodico de schiff ( PAS)
Ácido peryodico de schiff ( PAS)
Von kossa
Warthin starry Leptospira Sp
Warthin starry Lawsonia Intracelularis
Warthin starry Helicobacter sp
Sandiford
Azul de toluidina
Tricrómico
Muestras para Histopatología Tumor Cambios evidentes macroscópicamente en el tejido Cambios funcionales en el órgano
SELECCIÓN DE LA MUESTRA: NECROPSIA : Tomar muestra de los tejidos u órganos que presenten lesiones . Si no se encuentran lesiones tomar muestra de los tejidos u órganos blanco de los síntomas . Si no se encuentran lesiones ni síntomas tomar muestra de órganos representativos de cada uno de los sistemas orgánicos .
Biopsia EXCISIONAL INCISIONAL Ubicación Órgano Extensión de la Lesión
Biopsia Excisional Biopsia Incisional
TOMA DE LA MUESTRA Utilizar instrumental bien afilado. Muestra de no más de 5 mm de espesor. Excepto muestras de Encéfalo, Medula espinal y ojo . Neoplasia Señalar bordes
Selección de la Muestra
Descripción de las lesiones Observación y experiencia Terminología: Localización Número y extensión de la lesión Tamaño y peso Color Forma Consistencia
TOMA DE MUESTRA Fijar la muestra rápidamente en formol bufferado No frotar ni limpiar la piel antes de muestrearla. Las muestras de hueso deben incluir desde corteza hasta la cavidad medular. La muestra no debe congelarse, ni refrigerarse por tiempo prolongado, ni fijarla en alcohol.
Tumor – Marcar bordes
ENVÍO DE LA MUESTRA Debe enviarse en frasco plástico de boca ancha. Por cada volumen de tejido se deben adicionar 10 volúmenes de fijador. Se debe identificar adecuadamente la muestra Si se envían varias muestras de un mismo tejido se debe identificar cada una de ellas. La muestra debe venir acompañada de una buena historia y descripción de la lesión
Cuando llega al laboratorio….
Preparación Valoración y selección de la muestra Descripción macroscópica Corte Deshidratación y aclaramiento: Inclusión: parafina Corte Coloración Montaje
Valoración Macroscópica
Montaje y lectura
Artefactos
Problemas en la Interpretación del corte
RESULTADO Consta de tres partes: Descripción microscópica Diagnóstico . Observaciones
Descripción Microscópica Se describe el tejido Tipo de alteración: Neoplasia Inflamación Reparación Enf . Degenerativa No es concluyente
Diagnóstico DENOMINACIONES ESPECÍFICAS CORRELACIÓN CON IMPLICACIONES CLÍNICAS???
TERMINOS INAPROPIADOS CONSAGRADOS POR EL USO MELANOMAS SEMINOMAS LINFOMAS
Qué se evalúa en una neoplasia? CRITERIOS DE DIFERENCIACIÓN: Diferenciación y anaplasia. Tasa de crecimiento. Invasión local. Metástasis.
DIFERENCIACIÓN Y ANAPLASIA Diferenciación : Evalúa la semejanza a las células normales del tejido, comparables tanto morfológica como funcionalmente . Anaplasia : falta de diferenciación.
c Tiroides Carcinoma Tiroideo Carcinoma Anaplásico de tiroides
CRITERIOS DE MALIGNIDAD: Diferenciación y anaplasia Pleomorfismo celular. Hipercromacia nuclear. Cromatina nuclear en grumos gruesos. Alteración relación núcleo/citoplasma. Nucléolos prominentes. Abundantes mitosis atípicas. Células gigantes tumorales. Polaridad de crecimiento alterada.
TASA DE CRECIMIENTO Mayor en los tumores Malignos. Algunos tumores benignos pueden progresar a tumores malignos En general guarda relación con el nivel de diferenciación.
INVASION LOCAL Tumores Benignos : masas cohesivas, borde expansivo, localizadas, no invaden. Habitualmente con cápsula fibrosa. Son móviles, fácilmente enucleables . Tumores Malignos : crecimiento infiltrativo con invasión y destrucción tisular.
METASTASIS SON IMPLANTES TUMORALES SEPARADOS DEL TUMOR PRIMARIO .
Resultado
INMUNOHISTOQUÍMICA Técnicas de inmunotinción que permiten demostrar una variedad de antígenos presentes en las células o tejidos utilizando anticuerpos marcados - sustancia que absorbe o emite luz o produce coloración. Estas técnicas se basan en la capacidad de los anticuerpos de unirse específicamente a los correspondientes antígenos. Esta reacción es visible sólo si el anticuerpo está marcado.
INMUNOHISTOQUÍMICA Las técnicas inmunohistoquímicas permiten: Precisar tipos histológicos de tumores Detectar secreción de sustancias.. Hormonas Detectar antígenos de superficie en linfocitos Se requiere material fresco o congelado
MARCADORES INMUNOHISTOQUIMICOS Anticuerpo Células/antígenos detectados CD1a célula de Langerhans CD4 linfocito T de auxilio CD8 linfocito T citotóxico CD30 célula de Reed-Sternberg CD45 leucocitos CD68 macrófagos S100 células de Schwann HMB-45 melanocitos AE1 citoqueratinas de bajo peso molecular AE3 citoqueratinas de alto peso molecular DESMINA células musculares GFAP glía CEA antígeno carcino-embrionario AFP alfa-fetoproteína REN receptores nucleares de estrógenos VIM sarcomas