Imunodiagnostico

1. UNIVERSIDADE ESTADUAL DA PARAÍBA CENTRO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS E DA SAUDE DEPARTAMENTO DE ENFERMAGEM DOCENTE: KARLETE VIEIRA Imunodiagnóstico EQUIPE: ADRIANO, ANA KARINE, DANIELE FIDELIS, DHÉBORA CHRISTINNE, KAREN SANTOS, TAILLANY CAROLINE, VANESSA KARLA

2. Imunodiagnóstico Diagnóstico de uma doença ao longo da história; Elementos essenciais dos testes diagnósticos: Sensibilidade; Especificidade.

3. Testes diagnósticos com base imunólogica Alta especificidade do sistema imune; Robert Koch: -Vacina contra a tuberculose; -Suspensão de Mycobaterium tuberculosis ; - Teste de tuberculina . Fonte: http ://www.daviddarling.info/encyclopedia/K/Koch_Robert.html Fonte : http ://oddish3.rssing.com/chan-3342108/all_p12.html

4. Anticorpos monoclonais

5. Anticorpos monoclonais Hibridoma é a combinação de uma célula B “normal” com uma célula B cancerosa. Quando uma hibridoma cresce em cultura, suas células geneticamente idênticas continuam a produzir o tipo de anticorpo característico da célula B ancestral; Os clones das células secretoras de anticorpo podem ser mantidos indefinidamente em cultivo celular, podendo produzir grandes quantidades de moléculas idênticas de anticorpo;

6. Anticorpos monoclonais ou Mabs são anticorpos cujo todas suas moléculas são produzidas por um clone hibridoma único. São altamente específicos, uniformes e podem ser prontamente produzidos em grandes quantidades;

7. Usados como ferramentas diagnósticas e terapêuticas e para superar efeitos indesejáveis do sistema imune. Exemplos: Testes de gravidez usam Mabs para indicar a presença de um hormônio excretado somente na urina de uma mulher; Muromonab -CD3 usado para diminuir a rejeição de transplante de rim; Infliximab ( Remicade ) ou Entanercept ( Embrel ) direcionados para bloquear a ação causadora da inflamação na artrite reumatoide e distúrbio inflamatório intestinal da doença de Crohn ; Ibritumonab ( Zevalin ) e o Rituximab ( Rituxan ) usado para o câncer de Hodgkin; Trastuzumab ( Herceptin ) usado para o câncer de mama;

8. O uso terapêutico de Mabs era limitado pois seus anticorpos eram produzidos apenas po r células de camundongos ( murina ) . O sistema imune dos pacientes reagia contra as proteínas estranhas do camundongo. Novas gerações de Mabs : Anticorpos monoclonais quiméricos usam camundongos geneticamente modificados para produzir uma molécula híbrida humano/camundongo. A região variável do anticorpo é murina . A região constante é humana. São aproximadamente 66% humanos. Exemplo: Rituximab ;

9. Anticorpos humanizados são desenvolvidos para que a porção murina esteja limitada aos sítios de ligação ao antígeno. A região variável e a região constante são de fonte humana. São aproximadamente 90% humanos. Exemplos: Alemtuzumab e o Trastuzumab ; O objetivo final é desenvolver anticorpos humanos completos . Uma abordagem é modificar geneticamente camundongos para que contenham genes humanos.

10. Reações de precipitação As reações de precipitação envolvem a reação de antígenos solúveis com anticorpos IgG ou IgM para formar grandes agregados moleculares, as treliças ; Ocorrem em dois estágios distintos: Os antígenos e os anticorpos rapidamente formam pequenos complexos antígeno-anticorpo. Ocorre dentro de alguns segundos; Os complexos antígeno-anticorpo formam treliças que se precipitam na solução. Pode levar minutos ou horas;

11. Reações de aglutinação

12. Reações de aglutinação Aglutinação: é o agrupamento de partículas usualmente por moléculas de AC que se ligam a AG na superfície de partículas adjacentes.

13. Os testes de Aglutinação podem ser de dois tipos: Teste de Aglutinação Direta: Detectam anticorpos contra quantidades relativamente grandes de antígenos celulares como hemácias, bactérias e fungos.

14. Teste de Aglutinação indireta(Passiva) Os Anticorpos contra antígenos solúveis podem ser detectados por testes de aglutinação. Os antígenos são adsorvidos em partículas como bentonita ou mais frequentemente esferas de látex minúsculas.

15. Hemaglutinação Quando reações de aglutinação envolvem a agregação de hemácias.

16. Reações de Neutralização

17. Reações de Neutralização A neutralização é uma reação antígeno-anticorpo; Um antissoro contendo anticorpo que neutraliza uma toxina é chamado antitoxina; As reações também podem ocorrer quando vírus são ligados por anticorpos específicos ; Teste in vitro são utilizados para identificar um vírus e determinar o anticorpo viral.

18. Teste de Inibição da hemaglutinação viral.

19. Reações de fixação do complemento Usada para detectar quantidades pequenas de anticorpos; Baseia-se na interação entre antígeno anticorpo seguida pela fixação do componente do sistema complemento; Se houver anticorpos no soro ocorrerá a formação de imunocomplexos.

20. é adicionada em cada poço uma fonte de Complemento O passo seguinte é a adição em conjunto de hemácias anticorpos contra estas células (sistema indicador ou hemolítico). Se houver Complemento livre no meio, as hemácias serão lisadas mas se o Complemento estiver ligado aos imunocomplexos não ocorrerá hemólise e a reação será considerada como positiva

21. Técnicas de anticorpos florescentes

22. É uma técnica que permite : Identificar microrganismos Detectar anticorpos específicos Corantes fluorescentes

23. FA Direto- Utilizado para identificar um antígeno . FA Indireto- Utilizado para detectar a presença de um anticorpo especifico no soro.

24. O anticorpo especifico para contra o micróbio presente, ele reage com um antígeno para formar um complexo

25. ENSAIO IMUNOSSORVENTE LIGADO À ENZIMA (ELISA)

26. O ensaio imunossorvente ligado á enzima (ELISA, de enzyme-linked immnosorbet assay ) é mais amplamente utilizado em um conjunto de testes conhecidos como imunoensaio enzimatico (EIA, de enzyme immunossay ).

27. ELISA direto O ELISA direto é utilizado para detectar antígenos contra um anticorpo especifico ligado a placa de teste.

28. ELISA indireto O ELISA indireto é utilizado para detectar anticorpo contra um antígeno ligado a placa teste.

29. HIV ( Vírus da imunodeficiência humana) É o mais realizado para diagnosticar a doença. Nele, profissionais de laboratório buscam por anticorpos contra o HIV no sangue do paciente.

30. WESTERN BLOTTING OU IMMUNOBLOTING

31. INTRODUÇÃO: Western Blotting é uma técnica usada para detectar proteínas de uma determinada amostra e serve como teste confirmatório dos resultados obtidos em testes imunoenzimaticos .

32. MÉTODOS DE EXECUÇÃO DE WESTERN BLOTTING

33. O FUTURO DA TERAPÊUTICA E DO DIAGNÓSTICO IMUNOLÓGICOS A introdução dos anticorpos monoclonais revolucionou o diagnóstico imunológico ao tornar disponível grandes quantidades de anticorpos específicos.

34. REFERÊNCIAS TORTORA, Gerard J..  Microbiologia.  6. ed. Porto Alegre: Artmed, 2003. 827 p. il. ISBN 857307678X http://biomedicinapadrao.wordpress.com/2010/05/05/elisa/ http:// www.saudepratodos.com/conteudo.php?t=132