Rt Pcr

breve descripcion de la prueba, ppt hecho por alumnos para alumnos!!!

1. GERMAN A. MOLINA MARTINEZ SEBASTIAN A. VALENCIA SANABRIA PCR EN TIEMPO REAL

2. Introduccion : RT-PCR variante de la PCR Uso de sustancia marcada con fluoruro Termociclador equipado para captar fluorescencia No utiliza agarosa Medicion despues de cada ciclo de amplificacion

3. fundamento RT-PCR Realizada en un termociclador Calentar y enfriar muestras(ciclos 25-40) 3 etapas

4. materiales RT-PCR Molde de DNA Cebadores dNTPs Tampon de reaccion Polimerasa Fluoruro Termociclador

5. Etapas RT-PCR 1 separacion 95°C 2 alineamiento 50-60°C 3 polimerizacion68-72°C Reduccion de ruido “variedad de parametros ”

6. clasificacion RT-PCR PCR- cuantitativa Fluorocromos inespecificos Sondas moleculares Generacion exponencial de luz SYBR green ( λ max = 488 nm ) ( λ max = 522 nm ) Bajo en costos Usa oligonucleotido marcado fluorescentemente Detecta la aparicion del producto deseado . Sondas : taqman : molecular beacons : scorpion

7. Analisis Q-PCR SYBR- green Permite la identificacion de los productos de La amplificacion (ADN) Cuantificacion de la expresion genica absoluta relativa Curva de calibrado No Curva de calibrado Retrotranscripcion Gen control.

8. RT-PCR Y CANCER AVANCES TECNOLOGICOS MOLECULARES PERMTEN NUEVA TAXONOMIA

9. RT-PCR Y CANCER DIVISION CELULAR REPARACION CELULAR APOPTOSIS ANGIOGENESIS

10. RT-PCR Y CANCER INFECCION VIRAL METILACION DNA ALTERACION DE LA SECUENCIA.

11. RT-PCR Y CANCER GENETICA DEL TUMOR BIOLOGIA DEL TUMOR CAUSAS DEL TUMOR PRONOSTICO RESISTENCIA TOXICIDAD DE TERAPIA

12. RT-PCR Y CANCER PROGRAMACION GENETICA DE CADA TUMOR ES UNICA CA MAMA las celulas tumorales se diferencian de linfocitos y cel del estroma

13. RT-PCR Y CANCER MUTACION P53 Características histológicas agresivas Potencial invasión Resistencia a la terapia

14. CA MAMA 4 CLASES DE CA DUCTAL INVASIVO LINFOMAS 2 TIPOS DE CEL B CA PULMON 5 CLASES DE TUMORES DE CEL PEQUEÑAS SUBTIPOS MOLECULARES