Determinaciones Moleculares Rosa Isela Jiménez Castillo
Western Blot Western Blot basa su eficacia en la identificación de proteínas específicas mediante el uso de anticuerpos primarios o secundarios que reconocen y se unen a un epítopo único de la proteína. De esta forma, gracias a esta técnica analítica, se consigue detectar incluso una única proteína en una muestra biológica.
Southern Blot
Southern Blot
Northern blot La técnica de Northern blot es una técnica utilizada para estudiar la expresión de los genes. Se realiza mediante la detección de un ARN específico (o ARNm aislado). El ARNm suele estar representado en un 5% de la secuencia total de ARN. Este método revela la identidad, el número, la actividad y el tamaño del gen concreto. Northern blot, hibridación northern o ensayo northern es una técnica de detección de moléculas de ácido ribonucleico de una secuencia dada dentro de una mezcla compleja. Para ello, se toma la mezcla de ARN y se somete a una electroforesis en gel a fin de separar los fragmentos de acuerdo con su tamaño.
SDS PAGE Electroforesis del Gel de poli- acrilamida de sodio dodecil sulfato , o SDS-PAGE, es una técnica utilizada para separar mezclas de proteínas basadas en su tamaño y nada más . SDS, un detergente aniónico , se utiliza para producir una carga uniforme a lo largo de las proteínas que han sido linealizado . Primera carga en un gel hechos de poliacrilamida y aplicando un campo eléctrico sobre el gel, luego se separan proteínas SDS- revestida . El campo eléctrico actúa como la fuerza impulsora , dibujo las proteínas SDS cubierto hacia el ánodo con proteínas más grandes , más lentamente que las proteínas pequeñas . Para identificar las proteínas por tamaño , estándares de proteínas de tamaño conocido se cargan junto con las muestras y bajo las mismas condiciones .