Urocultivo - (2017 2)

Curso: Microbiologia
Año: 2017

1. UROCULTIVO Expositor: Miguel Machaca Flores Catedra: Microbiología Docente: Dr. Q.F. Héctor Vílchez Cáceda

2. UROCULTIVO – INTRODUCCIÓN Según las estadísticas, las infecciones del tracto urinario son mucho más frecuentes en las mujeres, así como es la infección mas común a nivel nosocomial. Por su parte, en los varones, una infección en el tracto urinario puede resultar en la mayoría de los casos complicada. Cuando una Infección del Tracto Urinario no es complicada, muchas veces es tratada de manera empírica, hecho que toma mucha importancia, debido a que se puede general una automedicación y por tanto una resistencia bacteriana, debido a que el tratamiento siempre va acompañado del uso de antibióticos. Viendo este ultimo aspecto podemos decir que, el Urocultivo es la piedra angular para dar con un diagnóstico certero y fiable para luego dar un tratamiento seguro y eficaz. Los estudios nos indican que el 98% de los resultados arrojan bacterias gram negativas, y un 2% arrojan gram positivos ( generos Streptoccus o Staphylococcus ) y hongos (como Candida albicans ). Del 100 % de gram negativos, un 99% son fermentadores (casi la mayoría consume carbohidratos), mientras que un 1% son no fermentadores ( Pseudomonas y Acinetobacter ) Del 100% de las bacterias fermentadoras, un 60%, en el Perú, esta representados por Escherichia coli , y el 40% es por Enterobacter .

3. UROCULTIVO – OBJETIVOS Determinar la presencia de microorganismos presentes en muestra de orina como diagnostico de infecciones del tracto urinario. Describir el procedimiento de obtención de muestra de orina, obtenida de choro medio, con el fin de realizar un urocultivo

4. UROCULTIVO – MARCO TEÓRICO El urocultivo es un test, prueba o examen, que nos ayuda a diagnosticar una posible Infección del Tracto Urinario, así como también poder identificar bacterias o levaduras que son los causantes de dicha infección. Junto con el antibiograma, se puede comprobar la susceptibilidad frente a antibióticos, los cuales inhibirán el crecimiento del microbio. Los resultados ayudaran al profesional de salud a determinar qué tipo de medicamentos son más efectivos para tratar la infección de una persona.

5. UROCULTIVO – PARTE EXPERIMENTAL MATERIALES Placas Petri Asas de siembra (de Kolle ) Tubos de ensayo Matraz o recipiente para preparar medio de cultivo Gradillas Mechero de alcohol Encendedor Jeringas de tuberculina Papel Craft Laminas porta y cubreojetos Algodón Recipiente para muestra Puente de tinción Pipetas Pasteur EQUIPOS Vortex Autoclave Incubadora Horno o estufa Microscopio óptico Centrífuga

6. UROCULTIVO – PARTE EXPERIMENTAL INDUMENTARIA Gorra Mandil o guardapolvo Mascarilla Guantes Calzado descartable

7. UROCULTIVO – PARTE EXPERIMENTAL MUESTRA, REACTIVOS Y MEDIOS DE CULTIVO Muestra de orina Cristal violeta Lugol Alcohol-acetona Safranina Aceite de inmersión Agua ultradestilada Agar TSA Agar MacConckey Agar manitol salado Agar Sabouraud Agar Plate Count

8. UROCULTIVO – PARTE EXPERIMENTAL RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA Indicar al paciente que realice un aseo previo de la zona genital externa. Luego del chorro inicial de la micción indicar al paciente que deposite cierta cantidad de orina en el frasco recolector. El paciente debe cerrar inmediatamente el frasco y limpiar la zona externa del mismo. Llevar el frasco de inmediato al laboratorio con previo rotulado de los datos del paciente.

9. UROCULTIVO – PARTE EXPERIMENTAL ANÁLISIS ORGANOLÉPTICO DE LA MUESTRA Paciente A Paciente B Aspecto: Presencia de sedimentos, turbia Color : M arron Olor : Fétido Aspecto: homogéneo Color : Amarrillo cetrino Olor : Característico (sui generis)

10. UROCULTIVO – PARTE EXPERIMENTAL Centrifugación de muestra: PACIENTE A

11. UROCULTIVO – PARTE EXPERIMENTAL Tinción Gram: PACIENTE A Fijar la muestra Cubrir con cristal violeta durante 60 segundos Enjuagar con abundante agua Cubrir con solución de lugol por 60 segundos Enjuagar con abundante agua Cubrir con safranina durante 30 segundos Enjuagar con abundante agua Cubrir con alcohol-acetona por 5 a 10 segundos Enjuagar con abundante agua Observar en microscopio a 100X

12. UROCULTIVO – PARTE EXPERIMENTAL Observación Microscópica de Tinción Gram: PACIENTE A Presencia de bacilos gram negativos

13. UROCULTIVO – PARTE EXPERIMENTAL Sembrado en Medio de Cultivo: PACIENTE A Siembre en AGAR SANGRE

14. UROCULTIVO – RESULTADOS RESULTADOS Medio de Cultivo: PACIENTE A Siembre en AGAR SANGRE (Positivo) Siembre en AGAR Mac Conckey (Positivo) Siembre en AGAR CHOCOLATE (Positivo)

15. UROCULTIVO – RESULTADOS RESULTADOS Medio de Cultivo: PACIENTE A Siembre en AGAR CHOCOLATE (Positivo)

16. UROCULTIVO – RESULTADOS RESULTADOS Medio de Cultivo: PACIENTE A Siembre en AGAR CHOCOLATE (Positivo)

17. UROCULTIVO – RESULTADOS RESULTADOS Medio de Cultivo: PACIENTE A Siembre en AGAR Mac Conckey (Positivo)

18. UROCULTIVO – RESULTADOS RESULTADOS Pruebas de Diferenciación Bioquímica: PACIENTE A Agar TSI sembrado con muestra Pico amarillo/viraje indica pH es ácido Fondo amarillo/viraje indica pH es ácido Formación de burbujas, indica que el microrganismo produce gas Agar TSI (Agar Hierro Triple Azucar ) COLOR ROJO

19. UROCULTIVO – RESULTADOS RESULTADOS Pruebas de Diferenciación Bioquímica: PACIENTE A Agar LIA sembrado con muestra Pico purpura Pico purpura Agar LIA (Agar Lisina Hierro) COLOR VIOLETA

20. UROCULTIVO – RESULTADOS RESULTADOS Pruebas de Diferenciación Bioquímica: PACIENTE A Agar CITRATO sembrado con muestra Agar CITRATO COLOR VERDE No hay viraje de color de Verde a Azul

21. UROCULTIVO – RESULTADOS RESULTADOS Pruebas de Diferenciación Bioquímica: PACIENTE A Agar INDOL /MOTILIDAD sembrado con muestra Agar INDOL /MOTILIDAD COLOR ÁMBAR Viraje de un color rosa o rojo en la superficie, indica indol positivo Formacion de turbidez que se extiende mas abajo en forma de hilo, nos indica que hubo movilida

22. UROCULTIVO – RESULTADOS RESULTADOS Pruebas de Diferenciación Bioquímica: PACIENTE A Agar ÚREA sembrado con muestra Agar UREA COLOR ÁMBAR Viraje de un color ámbar a amarillo/ se cambio a un pH ácido

23. UROCULTIVO – PARTE EXPERIMENTAL Sembrado en Medio de Cultivo: PACIENTE B Agar Sabouraud Agar TSA Agar manitol salado Agar Mc Conkey

24. UROCULTIVO – RESULTADOS RESULTADOS Medio de Cultivo: PACIENTE B Agar MANITOL SALADO (Negativo) Agar Mc Conkey (Negativo) Agar Sabouraud (Negativo) Agar TSA (Positivo)

25. UROCULTIVO – RESULTADOS RESULTADOS Medio de Cultivo: PACIENTE B

26. UROCULTIVO – CONCLUSIONES Para el caso de nuestro paciente A , en primera instancia por medio de una tinción de Gram, se determinó que el agente causante de la infección era GRAM NEGATIVA . Luego mediante pruebas de medios de cultivo, yendo desde un medio enriquecido hasta un medio selectivo, se logro determinar que se trata de una enterobacteria . Finalmente a partir de las pruebas bioquímicas se logro determinar que la posible causa de la infección se debió a una bacteria de la especie Escherichia coli . Para el caso de nuestro paciente B , quien se asumió que no presentaba ningún rastro de infección, a través del medio de cultivo de TSA , se logro determinar, de acuerdo a las características del crecimiento del agente infeccioso, que como posible microorganismos se trata de un hongo de la especie Candida albicans .

27. UROCULTIVO