10. PATOLOGIA VIRAL PPT.pdfFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFF

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1. PATOGENIA VIRAL Y
DIAGNÓSTICO DE PATOLOGÍAS
VIRALES
Dr. Raúl R. CARHUAPOMA NICOLÁS

2. Patogenia Viral y Respuesta Inmune
Procesoporelcualunvirusinfectaaunhuéspedycausaenfermedad.Eficaciadelasdefensasdel
huéspedparacontenerloyeliminarlo.
Dr. Raúl Ricardo CARHUAPOMA NICOLÁS

3. Patogenia Viral y Respuesta Inmune
1.PatogeniaViral:¿Cómocausandañolosvirus?Laenfermedadnoesunobjetivodelvirus;esuna
consecuenciaaccidentaldesureplicación.Eldañosurgededosmecanismosprincipales:
A.MecanismosdeDañoCelularDirecto(Citopático)Elvirusdañaodestruyelacélulaalreplicarse
dentrodeella
Cuerpos de Negri
en la rabia).
Virus del
Sarampión, VIH
ribosomas,
nucleótidos,
aminoácidos, ATP
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4. Patogenia Viral y Respuesta Inmune
B.MecanismosdeDañoTisulareInmunopatología-Muchossíntomasnosedebenaladestrucción
directadecélulas,sinoalarespuestadelsistemainmunológico.
Liberación de
Citoquinas y
Quimioquinas
COVID-19
Hepatitis B
Hepatitis viral
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5. 2. Respuesta Inmune frente a virus
Elsistemaimmunecombatelasinfeccionesviralesmediantedosbrazoscoordinados:lainmunidad
innata(rápidaeinespecífica)ylainmunidadadaptativa(lenta,específicayconmemoria).
A.RespuestaInmuneInnata:LaPrimeraLíneadeDefensa-Actúaenminutosuhoras.Suobjetivoes
contenerlainfeccióninicialhastaqueseactivelarespuestaadaptativa.
Células asesinas
naturales
Antígenos a las cel.
T citotóxicas
IFN-α e IFN-β (Tipo I)
• IFN-γ (Tipo II)
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6. B. Respuesta Inmune Adaptativa: El Ataque Específico y la Memoria
Tardadíasenactivarse,peroesextremadamenteespecíficaygeneramemoriainmunológica.Susdos
componentesprincipalesson:
1.RespuestaHumoral(Anticuerpos):
Mecanismos
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7. Es crucial para eliminar virus
intracelulares, que están ocultos
dentro de las células y son
inaccesibles para los anticuerpos
2. Respuesta Celular (Linfocitos T: células sistema inmunológico)
Presentación de Antígenos: Las
células infectadas "presentan"
fragmentos de proteínas virales
en su superficie unidos a
moléculas del MHC de clase I
Linfocitos T Helper(CD4+):
• Activación de linfocitos B para
producir anticuerpos.
• Activación de linfocitos T CD8+
• Reclutar y activar otras células
inmunes mediante la liberación
de citoquinas
Linfocitos T Citotóxicos (CD8+):
Reconocen el complejo péptido
viral-MHC I en la célula infectada y
la destruyen mediante la liberación
de perforinas y granzimas
(induciendo apoptosis)
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8. DIAGNÓSTICO DE
ENFERMEDADES
VIRALES

9. CONTENTS
TABLA DE CONTENIDOS
01
02
03
04
Importancia del diagnóstico viral y
sus métodos.
Detección directa: PCR (convencional
y en tiempo real).
03
Detección directa: Inmunofluorescencia
(IFD e IFI).
Detección indirecta: Serología y ELISA
(tipos y usos).
Combinación de métodos y perspectivas
futuras.
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10. Importancia del Diagnóstico Viral
Eldiagnósticoviralprecisoesfundamentalparalasaludpública,permitiendo
laidentificacióntempranadebrotescomoeldeCOVID-19.Facilitael
manejoclínicoóptimodelpaciente,guiandotratamientosantivirales
específicos.Además,escrucialparaimplementarmedidasdecontrol
epidemiológicoefectivasyprevenirlapropagación.
Diagnóstico viral: clave para salud pública
clínico
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11. Métodos: Directos vs. Indirectos
Losmétodosdirectosidentificanlapresenciadelvirusosuscomponentes,
comoelmaterialgenético(PCR)oantígenosvirales,enlamuestradel
paciente.Encontraste,losmétodosindirectosdetectanlarespuesta
inmunedelhuésped,principalmenteanticuerposespecíficosproducidos
contraelvirus.EjemplosincluyenlaserologíamedianteELISAo
inmunofluorescencia,querevelanexposiciónpreviaoactualalpatógeno.
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12. PCR Convencional
PCR en Tiempo
Real
Real
LaPCRconvencional
detectalapresenciao
ausenciacualitativade
ADNoARNviral.Esun
métododepuntofinal,
dondelosproductos
amplificados se
visualizantrasla
reacción,típicamente
medianteelectroforesis
engel.Suaplicación
principal es el
diagnósticoinicialpara
confirmarlapresencia
delpatógeno.
La qPCR permite la
cuantificaciónsimultáneade
ácidosnucleicosdurantela
amplificación, utilizando
fluorocromos.Estatécnica
generaunvalorCt(Cycle
threshold) que se
correlacionaconlacantidad
inicialdematerialgenético.
Es fundamental para
monitorearlacargaviralen
infeccionescomo VIHo
SARS-CoV-2, ajustando
tratamientosyevaluandola
progresióndelaenfermedad.
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13. 01
02
03
TIPO
Método Directo (Detección Molecular).
FUNDAMENTO
APLICACIÓN
1. PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa)
Amplifica(hacemillonesdecopias)deunfragmento
específicodelmaterialgenéticodelvirus(ADNoARN).
ParavirusdeARN,seusaprimerounatranscriptasa
inversa(RT-PCR)paraconvertirloenADN.
oDiagnósticotemprano:Detectaelvirusdesdelos
primerosdíasdesintomatología,inclusoduranteel
periododeincubación.
oEstándardeoroparamuchosvirus(SARS-CoV-2,
VIH,Hepatitis,Dengue,Zika).
oCuantificacióndecargaviral(PCRcuantitativao
qPCR),crucialparamonitorizarlaeficaciadel
tratamientoenVIHoHepatitis.
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14. PCR
MECANISMO
MOLECULAR
01
02
03
04
•Desnaturalización:ADNdoble
hebraseseparaa95°C.
•Anillamiento:Cebadores
específicosseunena50-65°C.
•Extensión:Taqpolimerasa
sintetizanuevashebrasa72°C.
•Replicaciónexponencial:Millones
decopiasdeADNviral.
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15. 1. PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa)
VENTAJAS
•Alta sensibilidad y especificidad.
•Detección temprana.
•Cuantificación viral.
•Permite detectar múltiples virus
simultáneamente (PCR multiplex).
DESVENTAJAS
•Requiere equipamiento costoso y personal
técnico especializado.
•Alto riesgo de contaminación y falsos positivos si
no se maneja con cuidado.
•Tiempo de resultado: de varias horas a un día..
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16. 01
02
03
TIPO
Método Directo (Detección de Antígenos).
FUNDAMENTO
APLICACIÓN
2. ELISA (Ensayo por InmunoabsorciónLigado a Enzimas)
Utilizaanticuerposespecíficosparacapturarydetectar
proteínasvirales(antígenos)presentesenlamuestra
delpaciente.
oDiagnósticorápidodeinfeccionesagudas(ej.:test
deantígenosparaSARS-CoV-2,Rotavirus,Virus
RespiratorioSincitial).
oDeteccióndeantígenodesuperficiedelVHB
(HBsAg)paradiagnosticarHepatitisB.
A. ELISA para Antígenos Virales
El ELISA se puede utilizar para detectar dos cosas diferentes:
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17. 2. ELISA (Ensayo por InmunoabsorciónLigado a Enzimas)
VENTAJAS
•Rápido (resultados en minutos u horas).
•Más barato y sencillo que la PCR.
•No requiere equipamiento complejo (para
formatos rápidos).
DESVENTAJAS
•MenorsensibilidadquelaPCR,especialmenteen
fasestardíasdelainfeccióncuandolacargaviral
esbaja.
•Posibilidaddefalsosnegativos
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18. 01
02
03
TIPO
Método Indirecto (Detección de Anticuerpos).
FUNDAMENTO
APLICACIÓN
2. ELISA (Ensayo por InmunoabsorciónLigado a Enzimas)
•Detectaanticuerpos(IgM,IgG,IgA)producidosporel
huéspedcontraelvirus.
•IgM:Aparecenprimero,indicaninfecciónagudaoreciente.
•IgG:Aparecendespués,persistentodalavida;indican
infecciónpasadaoinmunidad.
oConfirmarexposiciónpreviaaunvirus(ej.:serologíapara
Varicela,Sarampión,Rubéola).
oDiagnósticodeinfeccionesenfasetardía(cuandoelvirusya
noesdetectable).
oEstudiosdeseroprevalenciaenpoblaciones.
oDiagnósticodelVIH(screeninginicial)
B. ELISA para Anticuerpos (Serología)
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19. 2. ELISA (Ensayo por InmunoabsorciónLigado a Enzimas)
VENTAJAS
•Altaespecificidadparaidentificarelvirus
causante.
•Técnicaautomatizableyparaaltovolumende
muestras.
•Permitediferenciarentreinfecciónaguday
pasada
DESVENTAJAS
•Ventanainmunológica:Noesútilenlosprimeros
díasdelainfección,yaqueelcuerpotarda
tiempoenproduciranticuerpos.
•Puededarreaccionescruzadasconvirussimilares
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20. 01
02
03
TIPO
Puede ser Directa o Indirecta.
FUNDAMENTO
APLICACIÓN
3. Inmunofluorescencia (IF)
•Utilizaanticuerposmarcadosconfluorocromos(moléculas
fluorescentes)queseunenespecíficamenteaantígenos
viralesoanticuerposdelpaciente.Lavisualizaciónsehace
conunmicroscopiodefluorescencia.
•IFDirecta(DIF):Detectaantígenosviralesencélulasdela
muestradelpaciente(ej.:hisopadonasal).Esunmétodo
directo.
•IFIndirecta(IIF):Detectaanticuerposenelsuerodel
paciente.Esunmétodoindirecto.
oDIF:Diagnósticorápidodevirusrespiratorios(Gripe,VRS,
Adenovirus)apartirdemuestrasdelavados
nasofaríngeos.
oIIF:DiagnósticodeviruscomoeldeEpstein-Barr
(mononucleosis)ocitomegalovirus(CMV).
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21. • Diagnóstico rápido:
Identifica virus respiratorios
(Influenza, VSR).
• Aplicación: Muestras clínicas
como hisopados
nasofaríngeos, lavados
broncoalveolares.
• Inmunofluorescencia
Directa (IFD): Anticuerpo
primario marcado
detecta antígeno.
• Inmunofluorescencia
Indirecta (IFI): Anticuerpo
secundario marcado
detecta primario.
Inmunofluorescencia: Tipos y Usos
Usos
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22. 3. Inmunofluorescencia (IF)
VENTAJAS
•Rápida (especialmente la DIF).
•Visualización directa de la muestra
DESVENTAJAS
•Requiereunmicroscopiodefluorescenciay
personalmuyentrenadoparainterpretarlos
resultados.
•Subjetividadenlainterpretación.
•Sensibilidadmoderada.
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23. 01
02
03
TIPO
Método Indirecto.
FUNDAMENTO
Otrastécnicasserológicasimportantes
4. Serología (Concepto Amplio)
•Laserologíaesuntérminogeneralqueenglobatodas
lastécnicasquedetectananticuerposenelsuerodel
paciente.ELISAeInmunofluorescenciaIndirectason
técnicasserológicas.
oNeutralización:El"estándardeoro"paramedir
anticuerposprotectores(neutralizantes).Midela
capacidaddelsuerodelpacienteparaneutralizarla
infectividaddelvirusencultivocelular.Eslentay
compleja.
oWesternBlot:Seusacomopruebaconfirmatoriatrasun
ELISApositivo(ej.:eneldiagnósticodeVIH).Detecta
anticuerposcontraproteínasviralesespecíficas.
oInhibicióndelaHemaglutinación(HI):Paravirusque
aglutinanglóbulosrojos(ej.:Gripe,Rubéola).
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24. Resumen Comparativo y Estrategia de Uso
Método Qué Detecta
Principal
Aplicación
Ventaja
Principal
Desventaja
Principal
PCR
Material genético
(ARN/ADN)viral
Diagnóstico
temprano,
cuantificación viral
Máxima
sensibilidady
detección
temprana
Costoso, requiere
infraestructura
ELISA
(Antígenos)
Proteínas
(antígenos)virales
Diagnóstico
rápidode
infecciones agudas
Rápido, barato y
fácil de usar
Menor
sensibilidad que
la PCR
ELISA (Ac.) /
Serología
Anticuerpos (IgM,
IgG)del paciente
Infección pasada,
fase tardía,
estudios de
inmunidad
Diferenciar
infección
aguda/pasada
No sirve en fase
temprana
(ventana
inmunológica)
Inmunofluores-
cencia
Antígenos
(Directa) o Acción
(Indirecta)
Diagnóstico rápido
(DIF) o serología
específica (IIF)
Rápida (DIF),
visualización
directa
Subjetiva,
requiere personal
experto
Dr. Raúl Ricardo CARHUAPOMA NICOLÁS

25. GRACIAS