2.4 Aspectos generales de las tecnicas mas utilizadas en Histologia- Equipo 5.pptx

tecnicas histologicas

1. 2.4 Aspectos generales de las tecnicas mas utilizadas en Histologia: Tecnicas de fijacion, tecnica histologica, y citologica de rutina e inmunohistoquimica Equipo 5 Lizzeth Alejandra Acuna Cuadras Marya J. Bautista Aguilar Cecilia Villarreal Samano Angel Yessad Garcia Martinez Victor Hugo Rodrigues Mireles Rodríguez Durán José Antonio

2. GENERALIDADES DE TECNICAS UTILIZADAS EN HISTOLOGIA Se llama técnica histológica a la serie de pasos para obtener un preparado observable con el microscopio óptico. Es un proceso que abarca desde el momento en que se toma el material hasta que el preparado puede observarse. PASOS: 1.- Toma de material. 2.- Fijación 3.- Deshidratación 4.- Preparación para la inclusión 5.- Inclusión 6.- Modelado del bloque – catalogación 7.- sección con el micrótomo extendido de los cortes – pegado 8.- Coloraciones: de rutina o especiales

3. TECNICAS DE FIJACION: Existen diferentes formas de fijar los tejidos dependiendo del tipo del fijador, de la estructura a fijar y de lo que se quiere observar FISICOS: Se basan en una congelación muy rápida del tejido o en la aplicación de un calor elevado QUIMICOS: utilizan soluciones acuosas compuestas por moléculas fijadoras que establecen puentes entre las moléculas del tejido

4. La fijacion por calor: su efecto es la coagulacion de proteinas y disolucion de lipidos, se emplea para la observacion de microorganismos ya que preserva la forma de estos. Hay dos metodos basicos de fijacion con fijadores liquidos: INMERSION Y PERFUSION. El fijador debe llegar a todas las partes del tejido lo mas rapido posible INMERSION: las piezas del tejido se sumergen en la solucion fijadora. En algunos caso se necesita fijar extensiones de sangre o cortes por congelacion sin fijacion previa PERFUSION: La solucion fijadora se introduce a traves del sistema circulatorio por el cual accede a todas las celulas del tejido gracias a los capilares.

5. Tecnicas Histologicas y Citologicas de rutina ¿Que es? Técnica Citológica es el Método para obtener una muestra óptima de células preparadas en formas diversas para el diagnostico (Citodiagnóstico) reduciendo al máximo los cambios celulares artificiales. Técnica Citológica 1-Técnicas de Muestreo PARA LA OBTENCIÓN DE MUESTRAS por recolección de células de exfoliación espontánea de los tejidos (orina, esputo, lavado bronquial, líquidos de punción,exfoliadas de mucosas, etc.) 2- Tipos de Muestra Citologia exfoliativa Citologia de líquidos de cavidades Citologia de punción-aspiración (PAAF)

6. TÉCNICA HISTOLÓGICA La técnica histológica se basa en una serie secuencial de pasos a través de los cuales una muestra de tejido llega a transformarse en delgados cortes coloreados capaces de ser observados al microscopio.

7. Pasos de la técnica histológica y cómo funcionan- Obtención del material histológico para estudiar Proceso de fijación Lavados Deshidratación Aclaramiento Infiltración Inclusión Microtomía Tinción Observación

8. Metacromasia Cambio que ocurre en el color que exhiben ciertos colorantes utilizados en tinciones histológicas cuando se unen a determinadas sustancias presentes en estos tejidos, llamadas cromotropos.

9. Mecanismo El mecanismo subyacente asociado al cambio de color en la metacromasia requiere de la presencia de polianiones en el tejido.

10. Inmunohistoquímica (IHC) Se basa en la utilización de anticuerpos que se unen específicamente a una sustancia que se quiere identificar. Se utiliza para determinar la presencia y el nivel específico de proteínas celulares. Es comúnmente utilizada porque no es cara, no requiere equipos especiales y generalmente es precisa.

11. Que nos puede indicar esta prueba: Definir tumores benignos, malignos o cuyo potencial de malignizar es incierto. Diferenciar tumores primarios de un órgano o si son secundarios metastáticos, por ejemplo el órgano más frecuente es el pulmón. Si son metastáticos, colabora en la identificación del tumor primario o en la disminución de las diferentes posibilidades que dio origen a una metástasis. Tipificar a los tumores en su estirpe: epitelial (carcinomas), tejidos blandos (sarcomas), hemolinfoides (linfomas), entre otros. Ordenar a los tumores según las diferentes clasificaciones internacionales de cada órgano en particular.

12. Ejemplos de inmunohistoquímica Inmunohistoquímica para pruebas de HER2 (Human epidermal growth factor receptor 2) Se practica en tejido canceroso de mama Tejido removido durante cirugía de extirpación y biopsia Determina si un tumor tiene grandes cantidade de proteinas receptoras HER2 (significa que la célula recibe muchas señales de crecimiento) Beneficios: Ayuda a predecir el crecimiento y comportamiento del cáncer Limitación: a veces los resultados son ambiguos; diferentes partes de un tumor puede mostrar resultados positivos o negativos

13. Bibliografia (2014) IHQ para pruebas HER2. Breast Cancer.org. Obtenido de: https://www.breastcancer.org/es/sintomas/analisis/tipos/ihq