Aplicaciones Tecnológicas en el ADN

Principales aplicaciones tecnológicas en el ADN recombinante en medicina

1. Giovanni Salazar. Kelvin Rojas. Mayo del 2014 A plicaciones Tecnológicas en el ADN Universidad de Carabobo Facultad de Ciencias de la Salud Escuela de Medicina “Dr. Witremundo Torrealba” Campus La Morita

2. Diagnóstico de una enfermedad genética P ermiten el desarrollo de pruebas de diagnóstico precoz, nuevos tratamientos o intervenciones para evitar la manifestación de la enfermedad o para minimizar su gravedad. Las mutaciones pueden ser heredadas o respuesta a factores negativos del medio ambiente como virus o toxinas.

3. El diagnóstico de enfermedades genéticas implica: 1. Examen físico. 2. A ntecedentes familiares detallados. 3. P ruebas clínicas y de laboratorio.

4. Usos de las pruebas genéticas • La detección sistemática o tamizaje neonatal : Más realizada. Detección oportuna, realizar intervenciones para prevenir la aparición de los síntomas o minimizar la gravedad de la enfermedad. • Las pruebas de detección de portadores: ayudar a las parejas a saber si son portadores, el riesgo de transmisión a sus hijos. Tienen antecedentes familiares de trastornos genéticos.

5. • Las pruebas de diagnóstico prenatal: Detectar modificaciones en los genes o los cromosomas de un feto. • Las pruebas genéticas pueden usarse para confirmar un diagnóstico de un individuo que presenta ciertos síntomas o para monitorear el pronóstico de una enfermedad o la respuesta a un tratamiento médico. • Las pruebas predictivas o de predisposición: identificar a las personas con riesgo de una enfermedad antes de la aparición de los síntomas.

6. Tipos de pruebas genéticas Pruebas citogenéticas I mplica la evaluación de todos los cromosomas para detectar anomalías. Los glóbulos blancos (los linfocitos T) son las células más disponibles y más accesibles.

7. Pruebas bioquímicas Reacciones bioquímicas que ocurre a diario en las células requiere diferentes tipos de proteínas. Diferentes tipos de proteínas como enzimas, transportadores, proteínas estructurales, proteínas reguladoras y hormonas que cumplen diferentes funciones. Mutación (proteína) puede causar una enfermedad, no permite que la proteína funcione correctamente.

8. Las pruebas clínicas usan técnicas que analizan las proteínas pero no los genes. M edir directamente la actividad de una proteína (enzima), el nivel de metabolitos (medición indirecta de la actividad de una proteína) y el tamaño o la cantidad de proteínas (proteína estructural).

9. Pruebas Moleculares Método más eficaz, especialmente si la función de la proteína es desconocida y no se puede desarrollar una prueba bioquímica. Gran desafío, algunas enfermedades genéticas pueden estar relacionadas con un gran número de mutaciones diferentes. 1,000 mutaciones en el gen regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis quística (CFTR) pueden causar la fibrosis quística (CF). CF surgen como consecuencia de aproximadamente 30 mutaciones.

10. Metodologías de Pruebas Genéticas Análisis cromosómico C ariotipo del paciente es normal. Hibridación fluorescente in situ o FISH M arcaje de cromosomas mediante la cual estos son hibridados con sondas que emiten fluorescencia. Cromosomas analizados: 13, 18, 21, X e Y

11. Secuenciación del ADN M ejores métodos, lectura del gen o genes implicados en una enfermedad y la comprobación directa de que existe o no alguna mutación. Cara, laboriosa. Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) 1986 por Kary Mullis O btener un gran número de copias de un fragmento de ADN particular, partiendo de un mínimo. A mplificar un fragmento de ADN; más fácil identificar con una muy alta probabilidad

12. Aplicaciones en Medicina G enotipar la especie o especies que provocan un determinado cuadro infeccioso. Amplificando zona del genoma bacteriano. infecciones virales, implican la integración del genoma del patógeno en el ADN del hospedador. PCR posibilita la determinación de la carga viral existente y por tanto, del estadio de la enfermedad.

13. Los bebés nacidos de madres VIH-positivas, prueba especial de PCR. C ontiene anticuerpos del VIH de la madre. VIH-positivo en una prueba estándar de anticuerpos, pero una prueba de PCR determina si el bebé tiene el VIH. Bancos de Sangre son examinados para detectar el VIH mediante pruebas de PCR. Medir carga viral. P ruebas para hacer en casa de VIH

14. Detección del genoma en la hepatitis viral “crea” sucesivas copias de ácidos nucleicos mediante la ADN Polimerasa. N uevas copias de ADN es identificado mediante electroforesis. P revio se ha obtenido ADN complementario a partir de ARN viral mediante el uso de la transcriptasa inversa. El ARN que se detecta es el marcador más sensible.

15. PCR permite la amplificación de cualquier secuencia de ADN. Parcialmente degradado. E levada especificidad, secuencia de los “ primers ”, los cebadores se hibridarán exclusivamente con la secuencia de ácidos nucleicos buscada. La sensibilidad, una sola molécula de ácido nucleico diana es suficiente para obtener miles de copias.

16. TERAPIA GÉNICA Los Fármacos del Futuro

17. TERAPIA GÉNICA Es la introducción de un gen en el genoma de un individuo con el fin de reparar una mutación que causa una enfermedad genética.

18. COMO ACTÚA

19. ORIGENES DE LA TERAPIA GÉNICA 1.970: descubrimiento de las enzimas de restricción por Arber y Hamilton . 1.978: Primera hormona recombinante insertando el gen de la insulina en una bacteria E. coli . 1.989:Primera transferencia, se realizó en un paciente con una inmunodeficiencia. No hubo efectos clínicos .

20. ORIGENES DE LA TERAPIA GÉNICA 1989: Los Doctores Anderson, Blaese y Rosenberg utilizaron técnicas génicas similares en células de pacientes con cáncer. 1.990: Trataron con terapia génica un paciente con deficit de la enzima adenosina- deaminasa , Inmunodeficiencia Combinada Severa (SCID). Niños burbujas.

21. TERAPIA GÉNICA SOMÁTICA Es la transferencia de material genético (ADN, ARN O CÉLULAS CUYO MATERIAL GENÉTICO HA SIDO MODIFICADO) a células somáticas como forma alternativa de tratamiento para mejorar la salud de las personas. Actualmente en fase experimental.

22. TIPOS DE TERAPIA GÉNICA SOMÁTICA

23. TERAPIA GÉNICA IN SITU

24. TERAPIA GÉNICA GERMINAL Es la transferencia de material genético (ADN, ARN O CÉLULAS CUYO MATERIAL GENÉTICO HA SIDO MODIFICADO) a células sexuales (espermatozoides, óvulos) con el fin de reparar un daño genético. Es heredable.

25. MANIPULACIÓN PERFECTIVA Es la transferencia de material genético (ADN, ARN O CÉLULAS CUYO MATERIAL GENÉTICO HA SIDO MODIFICADO) con el fin de lograr una mejora o perfeccionamiento del individuo.

26. MANIPULACIÓN EXPERIMENTAL Es la transferencia de material genético (ADN, ARN O CÉLULAS CUYO MATERIAL GENÉTICO HA SIDO MODIFICADO) con el fin de desarrollar nuevos tipos de mutaciones, mejoramiento de la especie o “acelerar la evolución”

27. OLIGONUCLEÓTIDOS ANTISENTIDO

28. Gracias AL MENOS YA ACABARON LOS seminarios