CLASE 1 - HISTOLOGIA.pptx generalidadess

histologia

1. DRA. YULIANA MENDIETA

2. El objetivo de un curso de histología es conducir al estudiante a comprender la microanatomía de las células, tejidos y órganos y a correlacionar la estructura con la función . Histología [Gr., ੂ ıIJȩȢ , histos = tejidos; ȜȠȖtĮ , logía = ciencia], también llamada anatomía microscópica, es el estudio científico de las estructuras microscópicas de los tejidos y órganos del cuerpo.

3. HISTOLOGÍA - Ciencia que estudia los tejidos de los seres vivos Anatomía Macroscópica Microscópica Histo + Logía Tejidos Ciencia - Correlación Estructura - Función Proceso Patológico Clínica

4. TÉCNICA HISTOLÓGICA Tejido Corte Histológico Procedimientos Microscopio Pasos de la Técnica Histológica Obtención del material Biopsia Incisional Excisional Autopsia Citología

5. TÉCNICA HISTOLÓGICA Fijación Preserva morfología y estructura del tejido Detiene procesos celulares dinámicos Elimina posibles patógenos Aumenta la consistencia del tejido Autolísis - No produce Artefactos - No dificulta etapas ulteriores de la técnica - Buena penetración al tejido Idealmente :

6. TÉCNICA HISTOLÓGICA a) Formol : - Mas utilizado - Mal fijador de membranas - Bajo precio - Buena efectividad - Poca retracción tisular - Disuelve el glucógeno b) Alcohol - Fija por deshidratación - Útil para citologías. «Lacas o spray» c) Glutaraldehido d) Tetraoxido de Osmio - Excelentes fijadores - Suelen usarse para la Microscopía Electronica - No para coloraciones convencionales

7. TÉCNICA HISTOLÓGICA Tinción Necesitamos diferenciar las estructuras del corte. Los colorantes presentan diferente afinidad por ciertos elementos, dando CONTRASTE al preparado histológico - La mayoría de los colorantes son HIDROSOLUBLES Rehidratar el tejido Se elimina la parafina con xileno Se añade alcohol a concentraciones decrecientes Colorantes Ácido - Básico Especializados (MEC) Sales Metálicas (M. Electronica )

8. TÉCNICA HISTOLÓGICA Hematoxilina – Eosina (Coloración mas utilizada) - Se basan en las propiedades de BASOFÍLIA y ÁCIDOFILIA Hematoxilina : - Colorante Básico (al unirse con una Laca) - Carga Positiva - Es Hidrosoluble, colocar antes de deshidratar Tiene afinidad por estructuras con carga NEGATIVA (BASOFILICAS) ÁCIDOS NUCLEICOS (NÚCLEO CELULAR) COLOR PÚRPURA

9. TÉCNICA HISTOLÓGICA Eosina: Colorante Ácido Carga Negativa Tiene afinidad con estructuras de Carga Positiva (ÁCIDOFILAS) Unión con componentes CITOPLASMATICOS COLOR ROJO - ROSADO

10. MICROSCOPÍA Microscopio. Concepto - Permite ver imágenes ampliadas y detalladas de estructuras no visibles a simple vista Clasificación Óptico (Luz) Electrónico Efecto Túnel Fuerza Atómica M. Óptico Simple (1 lente) Compuesto (2 o más lentes) (fuente de luz) Campo Claro Campo Oscuro Contraste de Fase Luz Polarizada Fluorescencia Confocal

11. MICROSCOPÍA Parte Mecánica Pie Columna Revolver Tubo Platina T Macrometrico T Micrometrico

12. MICROSCOPÍA Parte Óptica Observación 1) Objetivo : Tubo metálico constituido por varias lentes Forman una imagen aumentada, dan resolución Límite de resolución Capacidad de una lente de distinguir dos objetos cercanos como independientes Poder de resolución Distancia mínima entre 2 objetos para que sean identificados como objetos separados A MAYOR PODER DE RESOLUCIÓN MENOR LÍMITE DE RESOLUCIÓN MAS NÍTIDEZ EN LA IMAGEN 0,2 – 0,5 mcm (M. óptica) 0,2 mm (Ojo humano)

13. MICROSCOPÍA Número de Aumento: Depende de las lentes, es el grado de magnificación de la imagen 10X, 40X, 100X Objetivo

14. MICROSCOPÍA 2) Ocular - Cilindro hueco con un lente convergente en cada extremo - Amplifica 10 X la imagen, no da resolución www.olympusmicro.com Aumento total = Aumento del Ocular x Aumento del objetivo

15. MICROSCOPÍA Parte Óptica Iluminación 3) Condensador y Diafragma Reciben la luz y la enfocan a la platina por medio de lentes Diafragma: Regula la cantidad de luz que pasa a la preparación 4) Fuente de luz - Bombillo de halógeno. Ilumina la muestra

16. MICROSCOPÍA Microscopio Electrónico Se calienta un filamento de tungsteno (cátodo) Se genera una Δ V entre cátodo y ánodo Haz de electrones (Baja λ ) Mayor Resolución LR = 0,2 nm - Se usan bobinas electromagnéticas como guía Lente condensadora Lente objetivo - Requiere una preparación especial Fijadores: Glutaraldehído + Tetraóxido de Osmio Dan Densidad Electrónica Infusión: Se usan Resinas epoxi plásticas Corte: Cuchillas de diamante. Cortes muy delgados (25-100 nm ) Tinción: Metales Pesados. Resaltan la estructura

17. MICROSCOPÍA M. Electrónico Transmisión (El haz atraviesa la muestra) Barrido (No atraviesa la muestra) Transmisión: Los elementos celulares y la tinción le restan energía a los e-, los cuales chocan con una pantalla fluorescente o placa fotográfica - Su energía cinética se interpreta en relación a las características del tejido Barrido - Se tiñe la superficie de la muestra con materiales pesados - Los e- chocan contra la superficie y se reflejan, siendo captados y procesados