Coloración ácido resistente

1. Coloración Ácido-Resistente
(De Ziehl-Neelsen)
Ginel Mesa 09-0470
Lab. Microbiología I
Sección 71

2. ¿Qué es la tinción de Ziehl-Neelsen?
•Es un tintado
bacteriológico especial
utilizado para identificar
organismos acido-
resistentes, en su mayoría
mycobacterias.
Mycobacterium
tuberculosis es el más
importante de este grupo, y
es responsable de la
enfermedad conocida como
tuberculosis (TB).

3. Fundamento
•Ciertos parásitos y bacterias contienen ácidos
grasos de cadena larga en sus paredes celulares
que les dan la propiedad de resistir la
decoloración con alcohol-ácido, después de la
tinción con colorantes básicos.

4. Cont.
•La coloración clásica de Ziehl-Neelsen requiere
calentamiento para que el colorante atraviese la
pared bacteriana que contiene ceras. Al
suspender el calentamiento y enfriar con agua,
provoca una nueva solidificación de los ácidos
grasos de modo que el colorante ya no puede
salir de las bacterias.

5. Procedimiento Caliente.
•Hacer un frotis de la muestra.
•Aplicar fucsina-fenicada. Calentar por 3-5
minutos. –ENJUAGAR CON AGUA.
•Decolorar con alcohol-ácido por 7 minutos. –
ENJUAGAR. Si elportaobjetos aún están rosa,
aplique una cantidad adicional de alcohol de 1 a 3
minutos.
•Aplicar azul de metileno (1 minuto).–ENJUAGAR.
•Ahora coloque una pequeñita gota de aceite de
inmersión y haga la observación al microscopio.

6. Procedimiento Frio.
1.Hacer un frotis.
2.Dejarlo en el puente
de tinción.
3.Aplicar fucsina-
fenicada (solución
con fenol y mayor
concentración de
fucsina).
4.Dejar en vasos Coplin
durante 20 minutos.
5.Decolorar con alcohol
ácido.

7. Resultados.
Algunos microorganismos
ácido-alcohol resistentes
•BAAR: rojo.
•Núcleos: azul semiamarillo.
•Mycobacterium: fuertemente
ácido-alcohol resistentes.
•Nocardia y Actinomices:
débilmente ácido-alcohol
resistentes.
•Parásitos coccídeos
(Cryptosporidium) de
muestras fecales.