Comprobación experimental ley de beer

Ley de Beer

1. Departamento de Biotecnología y Ciencias Alimentarias Comprobaci ón Experimental de la Ley De Beer Y Selección De Longitud De Onda De Análisis Por Espectrofotometría. M. En C. Roberto García Rodríguez Martes/ 10:00am – 1:00pm Equipo #4: Jesús Córdova 163563 Hildeliza Vega Vega 166037 David Fragozo 159144 Marisol Badilla 164898 Bernardo Flores 165174 Ana Laboratorio de Análisis Instrumental 19/09/2017 Ciudad Obregón, Son, Mex.

2. Objetivo Aprender el Manejo de un espectrofotómetro determinando la longitud de onda de análisis, para obtener una curva de calibración de un sistema coloreado para comprobar la ley de Beer, en diferentes analitos de interés.

3. Introducción La ley fundamental que rige la fotometría de la absorción se le llama ley de Beer. Cuando un haz de luz monocromática que se transmite en planos paralelos, penetra a un medio absorbente ángulos rectos con las superficies planas y paralelas al medio, la disminución de su poder de radiación con respecto al trayecto lumínico b, con la concentración del material absorbente c, sigue una proyección exponencial. T= Transmitancia A= Absorbancia P= Energía restante al pasar el material absorbente. P = Energía de un haz de energía(rayo incidente).

4. Ley de Lambert-Beer La Absorbancia de una especie en solución homogénea es directamente proporcional a su actividad óptica, longitud del paso óptico y su concentración. Es una relación empírica que relaciona la absorción de luz con las propiedades del material atravesado. Establece que la absorbancia es proporcional al número de moléculas absorbentes. A = 3CI A = Absorbancia C = Concentración I = Longitud de la Celda. 3= Coeficiente de extinción o absortividad molar.

5. Materiales y Reactivos Materiales Reactivos 1 gradilla 12 tubos de ensayo 18x150 mm 4 pipetas graduadas de 1 ml 1 pipeta graduada de 5 ml 2 pipetas graduadas de 10 ml 1 vaso de precipitado de 250 ml 1 vaso de precipitado de 150 ml 1 probeta de 50 ml 1 matraz Erlenmeyer de 250 ml matraces volumétricos de 100 ml 1 matraz volumétrico de 500 ml 1 matraz volumétrico de 1000 ml 1 embudo de vidrio 1 agitador de vidrio 1 espátula 1 tripié 1 tela de asbesto 1 mechero Bunsen 1 papel filtro Watman No. 1 5 tiras de papel indicador 1 Espectrofotómetro 2 celdas de vidrio   0.0702 g sulfato ferroso amoniacal 0.2 ml ácido sulfúrico 10 g clorhidrato de hidroxilamina ó de ácido ascórbico 16.5 g acetato de sodio 11.5 ml ácido acético glacial 0.5 g orto- fenantrolina . 1 ml Hidróxido de amonio (1:10)   5 g de fenol 50 ml de ácido sulfúrico   5 g de ácido dinitrosalicílico 100 ml de hidróxido de sodio 2N (8 g ) 150 g de sal de Rochelle

6. Procedimiento Pesar 0.1520g de cal Se calienta hasta sequedad en una campana Se solubiliza el residuo con 40 ml de agua destilada y se filtra en papel de poro mediano Realizar 3 lavados y agregarlos al filtrado Transferir a un vaso de precipitado de 150 ml y añadir unas gotas de HCL

7. Medir el PH que debe ser entre 5 y 7 aproximadamente Se afora a 100 ml, transferir una alícuota de 10 ml a un tubo de ensaye La solución obtenida anteriormente y la serie de soluciones tipo se tratan con 0.2 ml de solución amortiguadora , 0.2 ml de solución reductora y 0.2 ml de solución de fenantrolina 1-10 Se agitan los tubos después de añadir los reactivos y se deja reposar 10 minutos. Se procede a obtener las lecturas de las soluciones con el espectrofotómetro previamente calibrado con la solución de 0 mg de Fe. Con la solución de menor concentración medir la absorbancia contra la longitud de onda entre el rango de 400-600 nm en el espectrofotómetro

8. Cálculos y Resultados Concentración (Ppm): 0.01mg de Fe/ml = C 1 = Solución Patrón V 1 ·C 1 = V 2 ·C 2 C 2 = V 1 ·C 1 / V 2 Ppm = mg/L = (mg/ml)(1000) Ppm = (C 2 )(1000) Ppm = (V 1 ·C 1 / V 2 )(1000) V 1 V 2 Concentración 1ml 10ml 1ppm 2ml 10ml 2ppm 3ml 10ml 3ppm 4ml 10ml 4ppm 5ml 10ml 5ppm 6ml 10ml 6ppm 7ml 10ml 7ppm 8ml 10ml 8ppm 9ml 10ml 9ppm 10ml 10ml 10ppm

9. Estimación de longitud de onda de la s olución estándar

10. Comprobación de la Ley de Lambert- Beer con solución estandar

11. Concentración de cal λ = 510nm Con. = 0.152g/100ml Ppm = C·1000 Ppm = (0.00152g/ ml)(1000) Ppm = 1.52ppm A A prom . Conc . 0.170 0.1583 1.52 0.155 0.150

12. Conclusiones Se logró el objetivo de la práctica , construir una curva de calibración de la absorbancia contra la concentración para comprobar la ley de Beer . Así mismo, se aprendió a utilizar el espectrofotómetro que nos ayudo a obtener la longitud de onda máxima de un analito .

13. Bibliografía https://es.slideshare.net/jasd27/ley-de-beer