Anna Clara Rios Moço Pedro Henrique Guedes Cultura de tecidos vegetais
INTRODUÇÃO Cultura de tecidos é um processo, por meio do qual fragmentos vegetais ou suas partes ( explantes ) são isolados dos organismos a partir destes, sendo assepticamente cultivados em meio de cultura apropriado sob condições adequadas. Esse termo é genérico referindo-se a cultura de células, tecidos, órgãos embriões e plântulas. http://portuguese.alibaba.com/product-free/tissue-culture-plants-120013164.html
Cultura de tecidos vegetais Os brotos desenvolvidos em um meio são transferidos a outro para formação das raízes, obtendo-se, assim, plantas inteiras. Essas técnicas consistem em selecionar explantes , desinfectá-los e cultivá-los em meio nutritivo mantido sob condições assépticas, sendo a multiplicação dos propágulos feita através de sucessivos subcultivos em meio próprio. http://ruisoares65.pbworks.com/w/page/24325063/Cultura%20de%20Tecidos
Cultivo Essas plantas são cultivadas em laboratório em substrato de aclimatação e, consequentemente, levadas à casa de vegetação antes de serem transferidas para o campo definitivamente. http://www.seti.pr.gov.br/modules/galeria/detalhe. php ?foto=98&evento=5
Princípio da Cultura de Tecidos A cultura se baseia na teoria da totipotência onde os seres vivos tem a capacidade de regenerar organismos inteiros, idênticos à matriz doadora, a partir de células únicas. http://invitroplanta.blogspot.com.br/2012/07/micropropagacao.html
Fontes de explantes Cultura de meristema : Consiste no estabelecimento do domo meristemático apical sem os primórdios foliares. A brotação apical tipicamente cresce, originando um único broto. b) Cultura de ápices caulinares : É o estabelecimento in vitro a partir de brotações apicais maiores do que aquelas utilizadas para iniciar a cultura de meristema, tendo alguns primórdios foliares. Essas brotações apicais podem produzir múltiplas brotações.
Fontes de explantes c) Cultura de segmentos nodais : Os segmentos nodais são constituídos de gemas laterais isoladas, segmentos de caule com uma ou múltiplas gemas. Cada gema desenvolve para formar uma única brotação . d) Cultura de embriões : É iniciada a partir de embriões zigóticos extraídos de sementes. Os embriões germinam originando brotos .
Técnicas de cultura de tecidos Micropropagação A micropropagação é a propagação fiel de um genótipo selecionado por meio das técnicas da cultura in vitro . http://www.producaovegetal.com.br/index. php / estrutura_fisica /detalhe/7 http://agroevento.com/agenda/vi-curso-cultura-tecidos-plantas/
Técnicas de cultura de tecidos Microenxertia : Técnica que consiste em microenxertar, em condições assépticas, um ápice caulinar, retirado de uma planta matriz, sobre um porta enxerto estabelecido in vitro . http://agroevento.com/agenda/8-curso-micropropagacao-plantas/
Outras Técnicas... Existem várias outras técnicas de culturas de tecidos utilizadas na agricultura, são elas: Cultura de raízes; Conservação in vitro de recursos genéticos de plantas; Polinização e fertilização in vitro ; Cultura de embriões; Cultura de ovários; Protoplasto ; Indução de mutações in vitro .
Aplicações das técnicas de cultura de tecidos vegetais para o melhoramento Avaliação rápida de suscetibilidade : A cultura de células, tecidos e órgãos pode ser empregada para a avaliação de suscetibilidade/tolerância à várias moléstias ou estresses abióticos. Cultura de meristemas : Técnica mais antiga para a propagação clonal massal e para a obtenção de plantas livres de virus , principalmente quando combinada com a técnica de termoterapia. Esta técnica é relativamente simples e aplicável a um grande número de espécies As principais aplicações das técnicas de cultura de tecidos vegetais podem ser sumarizadas nas seguintes:
Aplicações das técnicas de cultura de tecidos vegetais para o melhoramento c) Indução de florescimento precoce : Esta técnica é empregada para reduzir o longo período de juvenilidade que ocorre principalmente nas plantas perenes, permitindo uma redução substancial de tempo nos programas de melhoramento genético. d) Variação somaclonal : O ambiente da cultura in vitro pode induzir variabilidade nas culturas este fenômeno foi denominado de variação somaclonal . A variabilidade gerada desta maneira pode ser importante para o melhoramento genético.
PROBLEMAS NA CULTURA IN VITRO O cultivo in vitro como qualquer outro processo é sensível a alguns problemas de ordem ambiental ou biológico DECLÍNIO DO VIGOR OXIDAÇÃO NECROSES HIPERHIDRICIDADE
PROBLEMAS NA CULTURA IN VITRO DECLÍNIO DE VIGOR As plantas desenvolvem o metabolismo de acordo com os estímulos recebidos = problemas são refletidos na fisiologia do explante . Baixa taxa de desenvolvimento = declínio de vigor Produção de substâncias fenólicas Habituação – citocina : doses normais não respondem ao estímulo Maturidade Erros no balanço nutricial do meio de cultura Culturas que não são repicadas -> diminuição na taxa de formação de brotos http://www.scielo.br/img/revistas/rceres/v59n3/a01fig1.jpg
PROBLEMAS NA CULTURA IN VITRO NECROSE Necrose : morte de uma parte do organismo vivo -> perda total ou parcial da cultura . Necrose apical em brotaçõe s: Deficiência de cálcio Substâncias de crescimento Intervalo de subculturas Gases tóxicos Diminuindo a necrose : Nitrato de cálcio e boro Redução de gases = chama de cor azul Aumento da disponibilidade de oxigênio http://www.bonde.com.br/img/bondenews/2012/02/img_1_32_1138.jpg
PROBLEMAS NA CULTURA IN VITRO OXIDAÇÃO A oxidação é a reação do oxigênio com íons metálicos (+) dos outros compostos do meio de cultivo: explantes podem liberar exsudatos que escurecem o meio ocasionados por liberação de fenóis dos ferimentos. C isteína , o carvão ativado, PVP, ácido ascórbico e ácido cítrico : controle no processo de oxidação. O á gar usado para geleificação pode conter compostos que apresentam alta capacidade de oxidação . http://culturadetecidos.com/wp-content/uploads/2011/12/n3a06f01.jpg
PROBLEMAS NO CULTIVO IN VITRO HIPERHIDRICIDADE OCORRÊNCIA Cultura de brotos e nós Massa de calos de plantas lenhosas FATORES QUE INFLUENCIAM Culturas que se desenvolvem rapidamente Altas temperaturas Baixa irradiância luminosa Culturas no escuro Condições contínuas de alta umidade relativa DIMINUIÇÃO DA HIPERHIDRICIDADE Utilização da técnica de duas fases (meio líquido e sólido) no meio de cultura. Aumento da concentração de ágar no meio semi-sólido . Controle da concentração de sacarose. A hiperhidricidade é definida como o estado fisiológico que a planta apresenta elevado teor de água no interior das células e tecidos com aspecto translúcido.
PROBLEMAS NO CULTIVO IN VITRO HIPERHIDRICIDADE http://www.scielo.br/img/revistas/rbpm/v11n2/a11fig04.gif
PROBLEMAS NO CULTIVO IN VITRO ACLIMATIZAÇÃO DE PLANTAS Aclima tização : processos para a passagem da planta que está in vitro; adaptação climática ; artificial . Aclima tação: processo no qual as plantas tomam ajustados a um novo clima ou situação, como resultado de um processo essencialmente natural . Maioria não sobrevive quando transferidas das condições in vitro para o ambiente externo . Baixa capacidade fotossintética Desidratação Absorção de nutrientes Doenças http://www.lfdgv.ufsc.br/apostilaculturadetecidos_arquivos/image033.jpg