MADURACION CELULAR MR CHRISTIAN A. QUIROZ NAVARRO PATOLOGIA CLINICA HNASS
LAMINA PERIFERICA Para una buena lectura de lamina periférica necesitamos cumplir con 3 puntos: Buena preparación de frotis Buena coloración Área y lectura apropiada
PREPARACION DEL FROTIS Técnica del extendido con portaobjetos Se utilizan portaobjetos de vidrio (75 x 25 mm) con bordes biselados. Se emplea una gota de sangre anticoagulada con EDTA o sangre de punción capilar. El portaobjetos extensor se desliza suavemente para distribuir la sangre en una sola pasada. El ángulo ideal entre portaobjetos es de 35 a 45°.
Criterios de un buen frotis Ocupa 2/3 a 3/4 del largo del portaobjetos. Tiene un borde romo, no puntiagudo ni en cola. No presenta líneas ni zonas con exceso de sangre. Las células están bien distribuidas y son visibles al microscopio. Errores comunes a evitar Ángulo muy bajo → frotis demasiado largo y delgado. Ángulo muy alto → frotis corto y grueso. Movimiento irregular → distribución incorrecta de leucocitos (monocitos y granulocitos se acumulan en los bordes).
TINCION DEL FROTIS Tiempo ideal de tinción: frotis reciente (máx. 2–3 h post extracción). Tinción de Wright o Wright-Giemsa: Contienen eosina (ácido) y azul de metileno (básico): se consideran tinciones policromáticas. Características de un frotis bien teñido Eritrocitos: color rosa a salmón Núcleos: color azul oscuro a violeta Gránulos neutrofílicos: rosado claro Gránulos basofílicos : azul oscuro o negro Gránulos eosinofílicos: naranja o rojo anaranjado Áreas libres de células: transparentes o ligeramente rosadas
LECTURA ADECUADA Examen del frotis con objetivo 10X Primer paso del análisis del frotis: barrido general con aumento bajo (10X). Evalúa la calidad del extendido y la distribución de los eritrocitos. Examen del frotis con objetivo 40X Se selecciona un área donde los eritrocitos estén uniformemente distribuidos (no más de 2-3 células superpuestas).
Examen del frotis con objetivo 100X Se realiza el recuento diferencial de leucocitos contando y clasificando 100 leucocitos consecutivos. En un frotis normal, se observan 200–250 eritrocitos/campo a 100X (con inmersión). Las plaquetas se estiman también con el objetivo 100X multiplicando el promedio por 20,000 para estimar el número total/mm³ Se usa un patrón en zigzag para el conteo.
TROMBOCITOPOYESIS
PLAQUETAS TAMANO: 2a 4um Nucleo : no posee Citoplasma : celeste a incoloro Granulos : rojo a violeta , abundante RELACIÓN N/C: no corresponde
ERITROPOYESIS
ERITROCITO POLICROMÁTICO (RETICULOCITO) ERITROCITO Tamaño: 8 – 8.5 um Núcleo: ausente Nucleolos: no posee Cromatina: no posee Citoplama : azul a salmon Relacion N/C: NO Corresponde NOTA: cuando se utilizan tinciones supravitales (p. ej., azul de metileno nuevo), los eritrocitos policromáticos se observan como reticulocitos . Tamaño: 7 – 8 um Nucleo : ausente Nucleolo: no posee Cromatina: no posee Citoplama : salmon Relacion n/c: no corrsesponde
GRANULOCITOPOYESIS
BASOFILOS
NEUTROFILO EN BANDA TAMAÑO: 10-15 µm NÚCLEO: con cromatina condensada en forma de C, S o U. Estrechado pero no en forma de filamento delgado. NOTA: la cromatina debe ser visible en la porción estrecha. Puede estar doblado sobre sí mismo. Nucléolos: no se observan Cromatina: en grumos gruesos CITOPLASMA: azul pálido a rosa Gránulos: Primarios: escasoS Secundarios: abundantes RELACIÓN NUCLEO/CITOPLASMA: predomina el citoplasma
NEUTROFILO PMN TAMAÑO: 10-15 um NÚCLEO: 2-5 lóbulos conectados por filamentos delgados sin cromatina visible Nucléolos: no se observan Cromatina: en grumos gruesos CITOPLASMA: azul pálido a rosa debido a la presencia de granulaciones secundarias especificas RELACIÓN NUCLEO/CITOPLASMA: predomina el citoplasma
EOSINOFILO TAMAÑO: 12-17 µm NÚCLEO: 2-3 lóbulos conectados por filamentos delgados sin cromatina visible. Nucléolos: no se observan Cromatina: en grumos gruesos CITOPLASMA: rosa; puede presentar bordes irregulares Gránulos: Primarios: escasos Secundarios: abundantes, de rojos a anaranjados; redondos RELACIÓN NUCLEO/CITPLASMA: Baja, predomina el citoplasma
MONOCITOPOYESIS
MONOCITOS TAMAÑO: 12-20 µm NÚCLEO: variable; puede ser redondo, con forma de herradura o de riñón. Con frecuencia presenta pliegues de aspecto similar a las circunvoluciones del cerebro. Nucléolos: no se observan Cromatina: símil al encaje CITOPLASMA: azul grisáceo; puede presentar seudópodos Gránulos: muchos gránulos finos que dan con frecuencia el aspecto de vidrio esmerilado Vacuolas: ausentes a numerosas
LINFOCITOPOYESIS
LINFOCITOS TAMAÑO: 7-18 µm NÚCLEO: redondo a ovalado; puede ser ligeramente indentado Nucléolos: ocasionales Cromatina: condensada a intensamente condensada CITOPLASMA: escaso a moderado; celeste cielo; puede presentar vacuolas NOTA: la diferencia de tamaño entre linfocitos pequeños y grandes se debe principalmente a la mayor cantidad de citoplasma Gránulos: escasos azurófilos (violetas)
Plasmocito. TAMAÑO: 8-20 µm NÚCLEO: redondo u ovalado; excéntrico Nucléolos: ninguno Cromatina: gruesa CITOPLASMA: intensamente basófilo, con frecuencia presenta una zona clara perinuclear (halo) Gránulos: ausentes Vacuolas: ninguna a numerosas