FACTORES QUE INFLUENCIAN LA AGLUTINACIÓN 2.0.pptx

sfdsfsf

1. FACTORES QUE INFLUENCIAN LA REACCION DE AGLUTINACION DE LOS GLOBULOS ROJOS. TECNICAS INMUNOHEMATOLOGICAS DE PRODUCCION DE LA AGLUTINACION. INTEGRANTES ROJAS RUIZ JOSE LUIS POCOMUCHA ACOSTA KAVELYNG RUTH ORTIZ PEREZ SHERLY SANDY QUISPE QUISPE PATRICIA ROSARIO VALENTE HUAHUACHAMPI MARCO ANTONIO

2. Reacción Ag–Ac: etapas

3. Afinidad y avidez Unión Ag–Ac reversible

4. Valencia y zona de equivalencia

5. Temperatura : fríos vs calientes

6. Temperatura : significado técnico

7. Temperatura : ejemplos clave

8. pH: rango óptimo

9. pH: efecto y técnicas

10. pH: práctica (anti-M) y base biofísica Enlaces débiles y estado de ionización

11. Tiempo de incubación

12. Tiempo de Incubación Efecto en la Aglutinación Consecuencias Insuficiente (< 5-10 min) - Unión Ag-Ac incompleta. - No se forman suficientes puentes. Falsos negativos (aglutinación no detectable). Óptimo (15-30 min a 37°C) - Máxima unión Ag-Ac. - Formación estable de redes de aglutinación. Resultados confiables  Excesivo (> 60 min) - Disociación de complejos Ag-Ac - Degradación de anticuerpos (especialmente IgM). Pérdida de sensibilidad o resultados inconsistentes.

13. Fuerza iónica del medio de reacción Es una de las condiciones fisicoquímicas que influye notablemente la unión del anticuerpo con el correspondiente antígeno eritrocitario. Esta fuerza mide la intensidad del campo magnético generado por la presencia de iones en el medio de reacción, los cuales determinan y modifican la magnitud de las fuerzas electrostáticas producidas Fuerza Iónica Mecanismo Impacto en la Aglutinación Alta  (0.9% NaCl) Aumenta la concentración de cationes del medio, reduciendo el potencial Z. Favorece la aglutinación Baja  (LISS) Disminuye la concentración de cationes del medio, aumentando el potencial Z. Los anticuerpos se acercan más fácilmente a los antígenos. Favorece la sensibilidad Favorece la unión Ag-Ac, especialmente para anticuerpos débiles ( ej : anti-D Rh).

14. Numero de sitios antigénicos de la membrana Se refiere a la densidad de antígenos específicos (como A, B, D Rh, Kell, Duffy, etc.) presentes en la membrana de los glóbulos rojos. Esta densidad varía según: El grupo sanguíneo  (ej.: Sistema ABO, Rh). El fenotipo individual  (ej.: RhD débil). Factores genéticos y raciales . El mayor numero de antígenos por células corresponde al grupo A y el menor para el Kell Efecto en la reacción: Mayor número de sitios antigénicos  (ej.: sistema ABO, RhD ) favorece la formación de redes de aglutinación más estables. Antígenos escasos  (ej.: algunos subtipos débiles de Rh, Kell) pueden requerir técnicas más sensibles (como enzimáticas o antiglobulina) para detectar aglutinación. La expresión antigénica varía entre individuos (ej.: fenotipo Bombay no expresa antígenos ABH).

15. Relación entre Sitios Antigénicos y Aglutinación La aglutinación depende de la formación de puentes entre anticuerpos y múltiples eritrocitos. Número de Sitios Antigénicos Efecto en la Aglutinación Ejemplos Clínicos Alta densidad (>10,000–1,000,000 sitios/célula) - Aglutinación fuerte y rápida (visible a simple vista). - Puentes estables entre eritrocitos. - Antígeno A/B (500,000–1,000,000 sitios /célula). - Antígeno RhD  (10,000–30,000 sitios /célula). Baja densidad (<5,000 sitios/célula) - Aglutinación débil o ausente sin técnicas especiales. - Requiere amplificación (enzimas, antiglobulina). - Variantes RhD débiles ( D^u ). - Antígenos del sistema Kell (4,000–6,000 sitios/célula).

16. CARACTERISTICAS MOLECULARES DEL ANTICUERPO

17. CLASES DE INMUNOGLOBULINA

18. PROPIEDADES FISICAS DE LA IG: G

19. PROPIEDADES FISICAS DE LA IG: M

20. numero de moléculas de anticuerpos por glóbulos rojos necesarios para causar aglutinaciones acuerdo a la clase de Ig : g ESPECIFICIDAD IG M IG G REFERENCIAS ANTI - A 25 20.000 GRENBURY 1963 50 7.000 ECONOMIDOU 1967 ANTI- D 120 HOLBURN 1971 ANTI- I 65 - 440 OLESEN 1966

21. POTENCIAL ZETA

22. CENTRIFUGACIÓN

23. Medios de Reacción

24. Solución Salina Fisiológica

25. Albúmina Bovina

26. ENZIMAS PROTEOLÍTICAS

27. Soluciones de Baja Fuerza Iónica (LISS)

28. OTROS Factores que Interfieren en la Reacción

29. El antígeno Función: Los glóbulos rojos deben estar bien conservados para mantener su reactividad y evitar falsas reacciones (positivas o negativas). Factores que influyen en la reactividad del antígeno: Efecto de dosis: El número de sitios antigénicos puede afectar la fuerza de la reacción antígeno-anticuerpo. Algunas células pueden tener una mayor cantidad de un antígeno que otras, lo que resulta en una aglutinación más fuerte. Edad de las células: Las células frescas reaccionan mejor que las que han sido conservadas por mucho tiempo. Los glóbulos rojos conservados en ACD o CDP mantienen mejor su reactividad que en forma de coágulo. Temperatura de conservación: La reactividad de los antígenos eritrocitarios se mantiene por varios años si se conservan bajo congelación a -30°C. A temperaturas de 1-6°C, la reactividad es satisfactoria hasta 21 días, pero se deteriora rápidamente a temperatura ambiente. Suspensiones celulares: La reacción requiere un equilibrio cuantitativo entre sus componentes. Las suspensiones celulares deben estar entre el 2% y el 5% para la mayoría de las pruebas.

30. El anticuerpo

31. Conservación de los sueros

32. Lectura e interpretación de la reacción antígeno- anticuerpo

33. TECNICAS INMUNOHEMATOLOGICAS DE PRODUCCIÓN DE LA AGLUTINACIÓN

34. PRUEBA DE COOMBS

35. 1, Los anticuerpos y el complemento humano son globulinas y son diferentes a otras especies, por lo tanto, se comportan como antígenos cuando se inyectan en otros organismos.

36. 2, Un animal produce anticuerpos, si es inyectado con globulinas humanas purificadas o con el suero total, produciendo anticuerpos específicos contra estas.

37. El suero antiglobulina humana obtenido reaccionará específicamente contra globulinas humanas.

38. Se ha establecido que deben de existir entre 100 a 500 moleculas de IgG sobre la superficie del eritrocito para que la prueba de Coombs sea positiva

39. PRUEBA CRUZADA MAYOR

40. PRUEBA CRUZADA MENOR

41. TECNICA DE MICROAGLUTINACIÓN EN GEL

42. AGLUTINACIÓN EN TUBO

43. En Conclusión