CITOMETRÍA HEMÁTICACITOMETRÍA HEMÁTICA
INTERPRETACIÓN DE INTERPRETACIÓN DE
HISTOGRAMASHISTOGRAMAS
L C P
M.C. Antonio Rascón Careaga
18/09/12 2
INTRODUCCIÓNINTRODUCCIÓN
Biometría Hemática:
bios = vida
metros = medida
Citología Hemática:
citos = célula
logos = tratado
Citometría Hemática:
citos = célula
metros= medida
haemat haematos = sangre
Grupos:Grupos:
1.Serie roja
2.Serie blanca
3.Serie trombocitica
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INTRODUCCIÓNINTRODUCCIÓN
Formula Roja (parámetros)
Hb: (g/dL), proteína por unidad de volumen
Anemia
Depende de sexo, edad, ASNM
Hematocrito: (%), proporción de GR por unidad de sangre
Depende de sexo, edad, ASNM
Número de GR: (M/uL)
Depende de sexo, edad, ASNM
VCM ó VGM: (fl ó micras)
Macrocitosis o microcitosis
Hto x 10/GR
HCM: (pg), cantidad promedio de Hb por eritrocito
(Hb/GR) x 10
Hipocromía o normocromia
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INTRODUCCIÓNINTRODUCCIÓN
Formula Roja (parámetros)
CMHB: (%), [Hb]
Dato inexacto
Coeficiente de variación de VGM (RDW): (%)
Solo se puede calcular con citómetros de flujo
Cuenta corregida de reticulocitos: (%)
Proporción de células inmaduras que salen a SP
Es un indice indirecto de la hematopoyesis
CCR = R x (Hto/45)
INTRODUCCIÓNINTRODUCCIÓN
Formula Plaquetaria
Plaquetas (cel/uL)
Morfología
Apreciación
INTRODUCCIÓNINTRODUCCIÓN
Método manual para contar célulasMétodo manual para contar células
INTRODUCCIÓNINTRODUCCIÓN
Método manual para diferencialMétodo manual para diferencial
PesoHombresMujeres
50-60 //// ////
61-70 // ////
71-80 //// //
Agrupar
INTRODUCCIÓNINTRODUCCIÓN
Método automatizadoMétodo automatizado
HISTOGRAMAS ¿qué son?
Es una gráfica de la distribución de un conjunto de medidas.
Toma datos variables (peso, estatura, tiempo, tamaño, etc.)
y despliega su distribución.
Los procesos inusuales o sospechosos pueden indicar que
un proceso necesita investigación.
Sociedad Latinoamericana para la Calidad, 2001
Población
Graficar
Histogramas en la citometría hemáticaHistogramas en la citometría hemática
Indican en general:
• La distribución de las células según su tamaño.
• Promedio del tamaño de las células dentro de una
población específica.
• La presencia de subpoblaciones clínicamente
significativas.
Factores que afectan a los HistogramasFactores que afectan a los Histogramas
• Anticoagulante: EDTA
• Tiempo de proceso: antes de 4 horas.
• Temperatura de la muestra (muestras frías producen
histogramas comprimidos).
• Relacionados al equipo (limpieza, calibración, etc.)
Principios de OperaciónPrincipios de Operación
National Electronics Conference, Chicago, IL, 1956; October 3
Wallace y Joseph Coulter Coulter Counter Model S
Principios de OperaciónPrincipios de Operación
ImpedanciaImpedancia
CONTEO CELULAR
Principios de OperaciónPrincipios de Operación
ImpedanciaImpedancia
50 100 15075
Principios de OperaciónPrincipios de Operación
Histograma de la serie roja
Linfocitos
MID
Granulocitos
50 100 150
300 350
Principios de OperaciónPrincipios de Operación
Histograma de la Serie blanca
Linfocitos: 35 – 98 fL
MID: monocitos, basófilos, blastos 98 – 135 fL
Granulocitos neutrófilos: 135 – 345 fL
REPORTEREPORTE
Principios de OperaciónPrincipios de Operación
Sistema ópticoSistema óptico
CONTEO Y DIFERENCIACIÓN CELULAR
Laser helio-neón
Principios de OperaciónPrincipios de Operación
Sistema ópticoSistema óptico
MAPSS separación mediante dispersión de
la luz polarizada en múltiples ángulos
REPORTEREPORTE
COMPLEJIDAD
TAMAÑO
Principios de OperaciónPrincipios de Operación
ClasificaciónClasificación
Alertas o InterferenciasAlertas o Interferencias
Histograma de plaquetas y/o serie roja:
• Región baja:Región baja: microplaquetas, células fragmentadas,
crioglobulinas, inclusiones en GR, hemólisis y apertura sucia.
• Región alta:Región alta: Macroplaquetas, microcitos, agregados
plaquetarios, GR fragmentados y satelitosis.
50 150 200100
• Agregados plq o MPQ
• GR nucleados
• Lísis incompleta de GR
• Crioglobulinas
• Linfocitosis
• Linfopenia
• Linfocitos atípicos
• Basofilia
• Blastos
• Células plasmáticas
Alertas o InterferenciasAlertas o Interferencias
Histograma de serie blanca
Zona de los linfocitos
50 100
Linfocit
os
MID
Granulocitos
5
0
1
0
0
1
5
0
3
0
0
3
5
0
• Basofilia
• Blastos
• Eosinofilia
• Bandemia
• Agregados plq
Alertas o InterferenciasAlertas o Interferencias
Histograma de serie blanca
Zona MID
Linfocit
os
MID
Granulocitos
5
0
1
0
0
1
5
0
3
0
0
3
5
0
100 150
• Eosinofilia
• Granulocitos inmaduros
• Bandemia
• Granulocitosis
• Neutropenia
Alertas o InterferenciasAlertas o Interferencias
Histograma de serie blanca
Zona de los neutrófilos
Linfocit
os
MID
Granulocitos
5
0
1
0
0
1
5
0
3
0
0
3
5
0
150 150150
RDW, ADE ó CV-VCMRDW, ADE ó CV-VCM
RDW=
SD x 100
VCM
11.5 – 15.5
> 15.5
Clasificación de Anemias por VCM y Clasificación de Anemias por VCM y RDWRDW
VCM BajoVCM Bajo
RDW Definición Etiología
NormalNormal
Microcítica Microcítica
HomogéneaHomogénea
Enfermedad crónicaEnfermedad crónica
Talasemia heterozigóticaTalasemia heterozigótica
AltoAlto
Microcítica Microcítica
HeterogéneaHeterogénea
•Deficiencia de FeDeficiencia de Fe
•Talasemia intermediaTalasemia intermedia
•Hemoglobina HHemoglobina H
•Fragmentación de GRFragmentación de GR
*Bessman JD,Gilmer PR, Gardner FH: Improved Classification of anemias by MCV and RDW. Am J
Clin Pathol 80:322-326, 1983.
Clasificación de Anemias por VCM y Clasificación de Anemias por VCM y RDWRDW
VCM NormalVCM Normal
RDW Definición Etiología
Normal
Normocítica
Homogénea
•Enfermedad crónica
•Hemólisis
•Quimioterapia
•LMC (M3) y LLC
Alto
Normocítica
Heterogénea
•Deficiencia temprana de Fe,
folato o B12
•Hemoglobinopatía
•Mielofibrosis y Sideroblástica
*Bessman JD,Gilmer PR, Gardner FH: Improved Classification of anemias by MCV and RDW. Am J
Clin Pathol 80:322-326, 1983.
Clasificación de Anemias por VCM y Clasificación de Anemias por VCM y RDWRDW
VCM AltoVCM Alto
RDW Definición Etiología
Normal
Macrocítica
Homogénea
•Anemia hipoplásica
•Preleucemia
Alto
Macrocítica
Heterogénea
•Deficiencia de Folato o B12
•Hemolítica inmune
•Aglutininas frías
•Enfermedad hepática
*Bessman JD,Gilmer PR, Gardner FH: Improved Classification of anemias by MCV and RDW. Am J
Clin Pathol 80:322-326, 1983.
RETICULOCITOSRETICULOCITOS
RPI < 2 RPI > 3
Enfermedad crónica (CA, infección,
inflamación, enfermedad renal
Destrucción anormal de eritrocitos
Eritropoyesis disminuida Anemia hemolítica autoinmune
Deficiencia de folato Sangrado
Anemia aplásica o hipoplásicaHiperesplenismo
Deficiencia de hierro Inmunización por Rh
Deficiencia de Vitamina B12Otros padecimientos hemolíticos
RETICULOCITOSRETICULOCITOS
Utilidad Del Volumen PlaquetarioUtilidad Del Volumen Plaquetario
En Pacientes Con MalignidadEn Pacientes Con Malignidad
Recuento PlaquetarioRecuento Plaquetario
BajoBajo NormalNormal AltoAlto
VPM BajoVPM Bajo
VPM VPM
NormalNormal
VPM BajoVPM Bajo
VPM VPM
NormalNormal
Hipoplasia Hipoplasia
severa por severa por
drogas o drogas o
sepsissepsis
Destrucción Destrucción
plaquetariaplaquetaria
Hipoplasia Hipoplasia
moderadamoderada
NormalNormal•Deficiencia FeDeficiencia Fe
reactiva a tumor reactiva a tumor
o infeccióno infección
•Proceso Proceso
mieloproliferativomieloproliferativo
•SangradoSangrado
Pseudotrombocitopenia
1
y Pseudoleucocitosis
2
EN CONTADORES ELECTRÓNICOS
En aproximadamente 1 de cada 1000 personas el
EDTA produce grumos plaquetarios, dando por
resultado plaquetas disminuidas y en ocasiones
leucocitosis hasta de 50,000 x mm
3
1.- Bizzaro N, Brandalise M. EDTA-dependent pseudothrombocytopenia. Am J
Clin Pathol. 1995; 103: 103-107.
2.- Shimasaki AK, Fujita K, Fujio S, Sakurabayashi I. Pseudoleukocytosis
without pseudothrombocytopenia induced by the interaction of EDTA and
IgG(2)-kappa M-protein. Clin Chim Acta. 2000 Sep;299(1-2):119-28
Normal Deficiencia de hierro
Casos clínicosCasos clínicos
Casos clínicosCasos clínicos
Ferropenia en tratamiento
Casos clínicosCasos clínicos
Anemia por deficiencia de
B12