Nefelometria e citometria de fluxo.pptx

Apresentação sobre nefelometria e citometria de fluxo usados em imunoensaios na área de análises clínicas e biomedicina.

1. TURBIDIMETRIA NEFELOMETRIA CITOMETRIA DE FLUXO Fabricio Gimenes Nicoly sousa Raissa Suelen

2. Turbidimetria O QUE É: é o método de dosagem de turbidez de uma solução, pela determinação da luz transmitida pelas partículas na suspensão COMO FUNCIONA: a luz é passada através de um filtro criando uma luz de comprimento de onda conhecido que é então passada através de uma cubeta contendo uma solução. Uma célula fotoelétrica coleta a luz que passa pela cubeta/placa. Uma medição é então dada para a quantidade de luz absorvida (densidade óptica) A amostra deve ser analisada em agitação constante. Muito utilizada em análise de água

3. VANTAGENS: Não necessita de separação de fases; Rápida e econômica; Automatizada. DESVANTAGENS: Não é muito eficaz em amostras muito turvas. APLICAÇÕES: Cinética de crescimento microbiano; Resistencia antimicrobiana; Atividade antimicrobiana de moléculas e/ou proteínas relacionadas ao sistema imune de insetos

4. Nefelometria O QUE É: É um método analitico de laboratório que se baseia na diminuição da intensidade pela difracção da luz. COMO FUNCIONA: As partículas suspensas são medidas empregando um feixe de luz. A luz dispersa pelas partículas é coletada por um detector ajustado para um lado a 90 ° da fonte de luz. A densidade de partículas é então calculada como uma função da luz espalhada no detector. Até certo ponto, a dispersão da luz para uma determinada densidade de partículas depende das propriedades específicas das partículas, como a sua cor e forma.

5. APLICAÇÃO: Os nefelômetros baseados em microplacas são usados em laboratórios de pesquisa acadêmica, bem como nas indústrias farmacêuticas. Eles são principalmente empregados para medições de turvação, exames de solubilidade de drogas, cinética de ligação de proteínas, crescimento microbiano e controle de processo de petróleo.

6. importante A intensidade de luz e captada varia de acordo com o numero, tamanho e forma das particulas da amostras. é utilizada uma solução padrao de formazina que zera o aparelho e gera uma curva de calibração.

7. Citometria de fluxo O QUE É: É uma técnica utilizada para contar, examinar e classificar partículas microscópicas suspensas em meio líquido em fluxo. Permite a análise de vários parâmetros simultaneamente, sendo conhecida também por citometria de fluxo multiparamétrica COMO FUNCIONA: As análises são feitas simultaneamente à medida que as células ou partículas suspensas na corrente de fluído passam individualmente por um feixe de luz de um aparelho medidor – o citômetro de fluxo. Alguns citômetros de fluxo podem separar fisicamente subconjuntos de células (classificação) com base em suas características citométricas (classificadores de células).

8. VANTAGENS: As duas maiores vantagens da citometria de fluxo são sua capacidade de medir um grande número de parâmetros (2 a 30 ou mais) em uma amostra e sua capacidade de coletar informações de milhões de células em questão de segundos. Esta técnica analítica é uma ferramenta poderosa para aplicações que incluem um número significativo de análises celulares, desde a fenotipagem até a saúde e viabilidade celular. APLICAÇÃO: Imunofenotipagem Estado de saúde celular Status do ciclo celular

9. para que serve A citometria de fluxo pode ser usada para contar grande número de células ou partículas baseadas em seu tamanho, complexidade interna, fenótipo, estado celular, função celular, conteúdo do DNA, expressão genética e para quantificar essas mesmas propriedades celulares em um nível de célula única. Isso permite avaliar: Se as células estão presentes em uma amostra; Quantas são Que tipos de células são; Quais podem ser suas características funcionais;o;

10. exemplo- Um exemplo a ser utilizado é a Imunofenotipagem Usando anticorpos conjugados com fluorescência direcionados a uma proteína de interesse, as células que expressam essa(s) proteína(s) na superfície ou intracelularmente podem ser detectadas por citometria de fluxo. Tipos de células específicos podem ser distinguidos dentro de uma população mista usando múltiplos anticorpos conjugados com fluorescência. A imunofenotipagem por citometria de fluxo é um exame de alta complexidade, tem sido o método preferencial para a determinação da linhagem celular e análise da maturação das células nas neoplasias hematológicas. Através dela é possível definir se um paciente é portador de uma leucemia e seu tipo específico.

11. Bibliografia https://bioemfoco.com.br/noticia/o-que-e-citometria-de-fluxo-e-qual-sua-aplicacao-para-a-saude/ https://www.bmglabtech.com/pt/nefelometro/ https://pt.wikipedia.org/wiki/Nefelometria https://pt.wikipedia.org/wiki/Turbidimetria https://www.wamadiagnostica.com.br/noticias/turbidimetria-latex-pcr/