Persentasi cara penggunaan alat elisa reader .pptx

Ya

1. Elisa Reader KURNIA DWI RAHAYU PO7134123042 FIA AZIZAH PO7134123048 NUR FITRIAH RAMADHANI PO7134123056 OCA SANJAYA PO7134123060 SRI SAHARANI PO7134123061 ATIKA SALSA RUKIYAH PO7134123062 RISKY SEPRIANDI PO7134123066 ANGGUN PRIMA DINI PO7134123067 Kelompok 3

2. Apa itu Elisa Reader? Elisa Reader atau sering dikenal dengan microplate reader adalah alat laboatorium yang digunakan untuk mendeteksi adanya kadar antibodi dan antigen dalam tubuh dan juga untuk mengukur nilai absorbansi sampel yang ditetakkan pada microplate .

3. Apa Itu Elisa? Elisa   ( enzyme-linked immunosorbent assay ) adalah suatu teknik biokimia terutama digunakan dalam bidang imunologi untuk mendeteksi dan mengukur konsentrasi antigen ( peptida , hormon , protein) dan antibodi dalam suatu sampel .

4. antigen atau antibodi yang hendak diuji ditempelkan pada plate. Setelah itu antibodi spesifik atau antigen spesifik dicucikan pada permukaan tersebut sehingga akan berikatan dengan antigennya . Selanjutnya antibodi atau antigen spesifik yang telah berlebel dengan suatu enzim ditambahkan ke atas permukaan , sehingga akan berikatan antara enzim yang bertaut dengan antibodi atau antigen spesifik dengan antibodi atau antigen . ( disesuaikan dengan sampel , bila sampel berupa antigen, maka digunakan antibodi spesifik , sedangkan bila sampel berupa antibodi , maka digunakan antigen spesifik ) Prinsip Elisa

5. Pada tahap terakhir di atas permukaan tersebut ditambahkan substrat . Pada saat substrat tersebut ditambahkan , sempel akan bereaksi dengan substrat dan menimbulkan suatu signal yang dapat dideteksi . Lanjutan

6. Direct Elisa Inderect Elisa Sandwitch Elisa Compotitive Elisa Jenis Jenis ELisa

7. Direct Elisa teknik ini biasanya untuk mengukur antige n pada sampel dengan menggunakan antibodi monoclonal yang spesifik. Antigen dari sampel yang dicari dimasukkan pada microtiter sehingga antigen tersebut dapat menempel pada dinding microtiter. Pada tahapan ini microtiter dibilas untuk menghilangkan antigen yang tidak menempel pada dinding microtiter tersebut. Jenis Jenis ELisa

8. Antibodi yang berlabel enzim ditambahkan . sehingga terjadi ikatan komplek antigen antibodi yang berlabel enzim dan pencucian dilakukan pada tahapan ini untuk menghilangkan antibodi yang tidak terikat dengan antigen yang diinginkan. Tahapan akhir adalah dengan menambahkan substrat yang bereaksi dengan enzim yang terdapat pada antibodi sehingga akan menghasilkan presipitat warna yang dapat diukur kadar atau keberadaan antigen yang dicari baik menggunakan kolorimetri , chemiluminescent, atau fluorescent end-point.

9. 2. Indeirect Elisa Teknik ini yang dicari adalah antibodi sehingga diperlukan antigen yang spesifik. Antigen spesifik (monoclonal), antibodi yang dicari pada sampel, antibodi sekunder yang berlabel enzim, substrat . Pada plate microtiter ditambahkan antigen berikutnya ditambahkan antibodi perimer yang akan dicari konsentrasi antibodinya dan diinkubasi sesuai prosedur yang berfungsi untuk menghasilkan komplek antigen antibodi secara optimal. D an juga d ilakukan pencucian untuk menghilangkan antibodi yang tidak terikat pada komplek tersebut.

10. Antibodi pendeteksi yaitu antibodi sekunder yang berlabel enzim ditambahkan sehingga terjadi komplek ikatan antigen antibodi dengan antibodi yang berlabel enzim. Diinkubasi sesuai prosedur, dan dicuci sesuai prosedur dalam kit. Substrat ditambahkan untuk diubah oleh enzim sehingga dihasilkan presipitat warna

11. 3. Sandwitch Elisa Elisa Sandwich memiliki tingkat sensitivitas yang tinggi sehingga aplikasi Elisa Sandwich kebanyakan untuk mendeteksi keberadaan antigen yang kadarnya rendah dengan tingkat kontaminasi pada sampel yang tinggi. .

12. 4 . Compotitive Elisa Teknik ini berguna untuk menguji keberadaan antigen atau antibodi. Prinsip kerja teknik ini adalah dengan menambahkan competitor untuk bereaksi dengan antigen atau antibodi yang terjadi di microtiter. antigen spesifik dilekatkan pada microtiter sehingga menempel pada dinding microtiter. Langkah berikutnya adalah antibodi yang diinginkan pada sampel ditambahkan bersamaan dengan antibodi yang berlabel enzim sehinga terjadi kompetisi antara antigen spesifik dengan antibodi yang diinginkan pada sampel dan antibodi yang berlabel enzim. Prosen pencucian pada setiap akhir dari langkah ini diperlukan untuk menghilangkan sisa antigen spesifik yang tidak bereaksi dengan antibodi yang dicari maupun antibodi yang berlabel enzim.

13. Besarnya kadar antibodi pada sampel yang dicari bisa diketahui setelah ada penambahan substrat. Substrat yang biasanya berisi kromogen akan dihidrolisis oleh enzim yang terdapat pada antibodi yang bereaksi dengan antigen yang dicari pada sampel dan antigen spesifik menjadi presipitat yang berwarna. Intensitas warna yang terjadi diukur absorbansinya dan dibaca pada kurva ekspert untuk dihitung kadarnya

14. Menghubungkan arus listrik alat elisa reader ke ups.dan menghubungkan ups ke arus listrik . Tekan tombol “on” pada UPS, dan tekan power “on” dibelakang mesin ( sudut kanan bawah . Tunggu mesin selesai loading Klik “test” Tunggu hingga proses selesai dan lamupu stabil Pilih program/ panjang gelombang yang diinginkan klik “test” Pilih letak well yang akan dianalisi ( baris A-H, kolom 1-12). Jika memakai seluruh well, klik “select all” dan jika ingin dihapus klik “clear all” Masukkan plate dan posisi plate harus pas. posisi plate yang tidak pas akan menyebabkan plate nyangkut dan mesin harus dibongkar Prosedur Elisa Reader

15. 9. Tutup kembali penutup tempat sempel dan tekan “start” 10. Tunggu hingga proses selesai 11. Hasil absorbansi / konsentrasi akan tertera di layar.hasil bisa di print atau di foto . 12. Jika sudah selesai , klik “cancel” 13. Keluarkan plate dari alat elisa reader 14. Kemudian klik power “off” dan tekan tombol “off” dibelakang mesin 15. Tekan tombol “off” pada ups 16 . Cabut arus listrik elisa reader ke UPS . Dan cabut arus listrik dari ups ke terminal listrik Lanjutan

16. Matikan alat setelah selesai digunakan . Bersihkan tray dari kotoran atau debu dengan menggunakan spond dadu atau dengan tissue. Lakukan kalibrasi pada alat secara keseluruhan seperti : lampu , proses dan pembacaannya minimal 6 bulan . Perawatan dan pemeliharaan elisa reader

17. Terima Kasih