SOLVED PREVIOUS YEAR (2022) DMLT (1st year) BIOCHEMISTRY PAPER, U. P. State Medical Faculty (in ENGLISH AND HINGLISH)

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About This Presentation

DMLT solved biochemistry question paper 1st year 2022 objective question - answer short notes detailed notes


Slide Content

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SOLVED PREVIOUS YEAR (2022) DMLT 1st year BIOCHEMISTRY PAPER, U. P. State
Medical Faculty (in ENGLISH AND HINGLISH)

Q. 1. Choose and write the correct option after writing the question number -

1.1. The liquid portion of blood remaining after its clotting is called? रक्त में थक्का बनने के बाद जो
तरल बचता है उसे कहते हैं?
(A)​Plasma प्लाज्मा (B) serum सीरम (C ) tissue ऊतक (D) lymph लसीका
Ans. 1.1. (B) serum. 1.1 (B) सीरम
1.2. What is PPE in a laboratory? ____. प्रयोगशाला में PPE क्या है?
(A)​Personal protective equipment कार्मिक सुरक्षा उपकरण (B) pipette per equipment
प्रतिउपकरण पिपेट (C ) professional pipetter पेशेवर पिपटर (D) none of these
Ans. 1.2. (A) Personal protective equipment 1.2. (A) कार्मिक सुरक्षा उपकरण
1.3. Serum differs from plasma as it lacks? सीरम प्लाज्मा से अलग होता है क्योंकि इसमें कमी होती है?
(A)​Antibodies एंटीबोडीज (B) clotting factors थक्के के कारक (C ) albumin एल्बुमिन (D) globulins
ग्लोब्यूलिन्स
1.3. (B) clotting factors 1.3. (B) थक्के के कारक
1.4. Which metal participates in blood coagulation process? रक्त जमाव प्रक्रिया में कौन सी धातु भाग
लेती है?
(A)​Iron ion आयरन आयन (B) calcium ion कैल्शियम आयन (C ) phosphorus ion फोस्फोरस आयन
(D) potassium ion पोटैसियम आयन
Ans. 1.4. (B) calcium ion 1.4. (B) कैल्शियम आयन
1.5. Normal Sp. Gr. of urine is _____.
(A)​1.000-1010 (B) 1.30-1.040 (C ) 1.003-1.030 (D) 1.040 -1.050
Ans. 1.5. (C ) 1.003-1.030

Q. 2. Choose right and wrong statements -

2.1. Mol wt of NaCl is 58.44 g/mol. NaCl का मोलेक्युलर वेट 58.44 g/mol होता है I
Ans. 2.1. Right 2.1. सही
2.2. Autoclave temp is 121°C. ऑटोक्लेव का तापमान 121°C होता है I
Ans. 2.2. Right 2.2. सही
2.3. Rothera's test is used for bile detection in urine. Rothera‘s टेस्ट मूत्र में बाइल की जाँच हेतु उपयोग
होता है I
Ans. 2.3. Wrong 2.3. गलत
2.4. Hemoglobin contains 2 atoms of iron. हीमोग्लोबिन में आयरन के दो एटम होते हैं I
Ans. 2.4. Wrong 2.4. गलत

Q. 3. Fill in the blanks -
3.1. The full for of ESR is Erythrocytes ________ rate. ESR का पूरा नाम Erythrocyte _________
rate है I
Ans. 3.1. sedimentation
3.2. Range of normal hemoglobin in adult male is _______ g/dl. (2022)
Ans. 3.2. 13.0 - 18.0

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Q. 4. Write short note on. इन पर संक्षिप्त टिप्पणी लिखें I

4.1. Normality and molarity. नॉर्मेलिटी और मोलैरिटी I
Ans.
Molarity - is the number of moles of solute per liter of solution; represented by 'M'. Example -
1M solution can be prepared by dissolving solute equal to the molecular weight of the solute in
grams (1 mole of solute) and making 1 litre of solution. Made in volumetric flask.
Number of moles of solute
Molarity (M) = —-------------------------------------
Volume of solution in liter
Number of moles = weight of that molecule in gram ÷ molecular mass of the molecule
Normality - number of mole equivalents per litre of solution ; represented by 'N'. It is used in
acid and base solutions. Example - 1N solution contains 1 gram-equivalent weight (amount of
equivalent weight in gram) of solute per litre of solution.
Number of mole equivalents of solute*
Normality = —-----------------------------------------------
Volume of solution in liters

*mole equivalents (Gram equivalents) = grams of solute ÷ equivalent weight of solute

In Hinglish

Ans.
मोलैरिटी - का मतलब है कि 1 लीटर विलयन (solution) में विलेय (solute) के कितने moles हैं I इसे 'M' द्वारा
represent करते हैं I उदाहरण - 1 Molar (1M) solution बनाने के लिए solute को उसके molecular weight के
बराबर ग्राम में तौल कर विलायक (solvent) में घोलकर 1 लीटर solution बनाते हैं I
Number of moles of solute
Molarity (M) = —-------------------------------------
Volume of solution in liter
Number of moles = weight of that molecule in gram ÷ molecular mass of the molecule
नॉर्मेलिटी - 1 लीटर solution में किसी compound के कितने mole equivalents हैं उसे उस solution की
Normality कहते हैं और इसे 'N' या Eq/l से represent करते हैं I उदाहरण - 1 N solution के 1 लीटर में 1
gram-equivalent weight (यानि equivalent weight की gram में मात्रा) solute होता है I
Number of mole equivalents of solute*
Normality = —-----------------------------------------------
Volume of solution in liters

*mole equivalents (Gram equivalents) = grams of solute ÷ equivalent weight of solute

Q. 4.2. Autoclave. ऑटोक्लेव I
Ans. Moist heat sterilization or steam sterilization is a physical method of sterilization and is the
most commonly used and reliable method for sterilization. The equipment used in this method is
called autoclave. The two basic types of steam sterilizers (autoclaves) are the gravity
displacement autoclave (class N) and the high-speed prevacuum sterilizer (class B). These may

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be large, medium or small (table-top) steam sterilizers. In this process the moist heat denatures
the structural proteins and enzymes of the microbes resulting in their complete destruction or
elimination. Four parameters used in steam sterilization are - steam (dryness fraction ≥97%),
pressure (106 kPa or 795 mmHg), temperature (121/132 °C) and time (30 min/4 min). However,
the duration of sterilization depends also on the item to be sterilized. When the items kept in the
autoclave come in direct contact with steam at a certain temperature and pressure the
vegetative cells and spores present on the items are completely destroyed. The items covered
with paper (e.g. glasswares) are kept in a hot air oven for some time after autoclave to prevent
the steam condensation and finally these sterilized items are kept in a clean, safe and closed
environment to maintain their sterility.

In Hinglish

Ans. Sterilization का एक physical method है - moist heat sterilization या steam sterilization जो
sterilization की सभी उपलब्ध विधियों में सबसे अधिक उपयोग होने वाली और सबसे अधिक भरोसेमंद विधि है I
इसमें इस्तेमाल होने वाले यन्त्र को autoclave कहते हैं I Steam sterilizers (autoclaves) मुख्यरूप से दो
प्रकार के होते हैं - gravity displacement autoclave (class N) और high-speed prevacuum sterilizer
(class B). ये large, medium या small (table-top) size के steam sterilizers होते हैं I
इस प्रक्रिया में moist heat के कारण रोगाणुओं की structural proteins और enzymes के denaturation के
कारण रोगाणु पूरी तरह नष्ट हो जाते हैं I Steam sterilization में चार parameters का इस्तेमाल होता है, जो हैं -
steam (dryness fraction ≥97%), pressure (106 kPa,795 mmHg), temperature (121/132 °C) और
time (30 min/4 min) I हालांकि, sterilization के समय का निर्धारण sterilize किये जाने वाले item पर भी
निर्भर करता है I Steam sterilization हेतु इस्तेमाल होने वाले एक autoclave में रखे सभी items के एक
आवश्यक temperature और pressure पर एक निश्चित समय के लिए steam के सीधे सम्पर्क में आने पर उन
पर उपस्थित रोगाणुओं के vegetative cells और spores दोनों ही पूर्णतया नष्ट हो जाते हैं I autoclave करने के
बाद autoclave किये गये paper से cover किये गये items (जैसे - glasswares) को hot air oven में थोड़ी देर
के लिए रखते हैं ताकि paper पर steam का condensation नहीं होने पाये और अन्त में autoclave किये गये
items को स्वच्छ, सुरक्षित और बंद वातावरण में रखना चाहिए ताकि items की sterility बनी रहे I

Q. 4.3. Mention the methods of Hemoglobin estimation and write in detail about Drabkin's
method along with its merits and demerits. हीमोग्लोबिन आंकलन की विधियों का उल्लेख कीजिये
और Drabkin विधि को उसके गुण दोषों सहित विस्तार में लिखिए I
Ans. Methods of Hemoglobin estimation :
There are several methods for hemoglobin estimation :

●​Sahli’s or acid hematin method
●​Cyanmethemoglobin method
●​Sodium Lauryl Sulphate method(cyanide free method)
●​Vanzetti Azide-methemoglobin method
●​Oxyhemoglobin method
●​Alkaline-hematin method
●​Measurement of oxygen-combining capacity
●​Measurement of iron content

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Cyanmethemoglobin method (Drabkin's method) - is the internationally recommended
method for determining hemoglobin. The basic principle of this method is as follows : When
blood is diluted in a solution (Drabkin's reagent) containing potassium ferricyanide, potassium
cyanide and potassium dihydrogen phosphate, the potassium ferricyanide oxidizes the iron in
heme of hemoglobin to the ferric state to form methemoglobin, which is converted to
hemiglobincyanide or Cyanmethemoglobin (HiCN) by potassium cyanide. HiCN has a maximum
absorbance at 540 nm and strictly obeys Beer-Lambert’s law. The absorbance of the diluted
sample at 540 nm is compared with absorbance of a standard HiCN solution whose equivalent
hemoglobin concentration is known.
Procedure -
●​Drabkin's solution and standard solution are brought to RT,
●​5 ml Drabkin's solution is taken in a clean test tube (mouth pipetting is prohibited),
●​The blood sample (EDTA tube) is mixed well by gentle inversions,
●​20 µl blood is drawn in a micropipette, the outer surface of the tip is wiped very carefully
to remove the excess blood,
●​The blood is delivered into the Drabkin's solution in the test tube by dipping the tip in the
solution and rinsing the tip several times as shown below :

●​The contents of the tube are mixed well (vortex mixer may be used) and left at RT for at
least 5 minutes,
●​The colorimeter or spectrophotometer is set for absorbance at 0 using blank solution
(Drabkin's solution) at yellow green filter or 540 nm,
●​Then the absorbance of standard solution is read; alternatively, a standard curve can
also be drawn by using different concentrations of standard made by diluting the
standard solution with Drabkin's solution,
●​Likewise the test solution absorbance is also read.
Calculation -

Absorbance of unknown × concentration of standard(mg/dl) × 251*
Blood Hemoglobin(g/dl) = -----------------------------------------------------------------------------------------
Absorbance of standard × 1000

(*251 is the dilution factor)

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Merits of this method -
●​Accurate International standard available worldwide ;
●​Easily adapted to automated hematology analyzers;
●​Well established and thoroughly investigated – ICSH recommended method ;
●​Inexpensive reagent.
Demerits of this method -
●​Manual method requires accurate pipetting and spectrophotometer;
●​Reagent (cyanide) hazardous;
●​The above, limit its use outside the laboratory;
●​Subject to interference from raised lipids, plasma proteins and leukocyte numbers
causing turbidity Centrifuging the diluted blood can, however, help overcome the
turbidity);
●​Does not distinguish those hemoglobin derivatives which have no oxygen-carrying
capacity (MetHb, COHb, SHb). Thus may overestimate the oxygen-carrying capacity of
blood if these are present in abnormal(more than trace) amounts.

In Hinglish

Ans. Hemoglobin estimation के कई methods हैं :
●​Sahli’s or acid hematin method
●​Cyanmethemoglobin method
●​Sodium Lauryl Sulphate method (cyanide free method)
●​Vanzetti Azide-methemoglobin method
●​Oxyhemoglobin method
●​Alkaline-hematin method
●​Measurement of oxygen-combining capacity
●​Measurement of iron content
Cyanmethemoglobin method (Drabkin's method) - यह hemoglobin determination का
internationally recommended method है I इस method का basic principle इस प्रकार है : Blood को जब
Drabkin's solution (जिसमें potassium ferricyanide, potassium cyanide और potassium dihydrogen
phosphate होते हैं) के साथ mix करते हैं तो hemoglobin methemoglobin (मेथीमोग्लोबिन) में बदल जाता है
जो potassium cyanide की उपस्थिति में Cyanmethemoglobin (साइनमेथीमोग्लोबिन, HiCN) में बदल
जाता है I यह साइनमेथीमोग्लोबिन 540 nm पर maximum absorbance देता है और Beer-Lambert’s का
कड़ाई से पालन करता है I Test sample से बने HiCN के 540 nm पर absorbance को standard HiCN
solution के absorbance से तुलना करके test sample के hemoglobin concentration की गणना कर लेते हैं
I
Procedure -
●​सर्वप्रथम Drabkin's solution और standard solution को कमरे के तापमान (RT) पर आने देते हैं I
●​एक साफ़ और सूखी test tube में 5 ml Drabkin's solution लेते हैं (mouth pipetting नहीं करते हैं) I
●​Blood sample (EDTA tube) को धीरे- धीरे inversion द्वारा अच्छी तरह mix करते हैं I
●​एक micropipette द्वारा 20 µl blood लेते है, tip की बाहरी सतह पर लगे blood को बेहद सावधानी से
tissue paper की मदद से साफ़ करते हैं I
●​Pipette की tip को test tube के Drabkin's solution में dip करके tip को कई बार rinse करते हैं
जिससे tip के अदंर का पूरा blood solution में आ जाए I

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●​Test tube के contents को अच्छी तरह mix करते हैं (vortex mixer की सहायता ले सकते हैं) और कम
से कम 5 minutes के लिए room temperature पर छोड़ देते हैं I
●​Colorimeter या spectrophotometer पर blank tube (केवल Drabkin’s solution) का absorbance
yellow green filter या 540 nm पर zero पर set करते हैं I
●​इसके बाद standard solution का absorbance नोट करते हैं; या फिर standard को कई
concentrations में Drabkin’s solution में dilute करके सभी dilutions का absorbance नोट करके
एक standard curve plot करते हैं I
●​अब इसी प्रकार test solution का absorbance भी नोट करते हैं I

Calculation -

Absorbance of unknown × concentration of standard(mg/dl) × 251*
Blood Hemoglobin (g/dl) = -----------------------------------------------------------------------------------------
Absorbance of standard × 1000
(*251 dilution factor है)

विधि के गुण -
●​पूरे world में accurate International hemoglobin standard उपलब्ध है;
●​यह method automated hematology analyzers के लिए आसानी से अनुकूलित किया जा सकता है;
●​सुस्थापित और गहनता से अनुसन्धानित एवं ICSH (International Council for Standardization in
Haematology) द्वारा recommended method है;
●​कम खर्चीला reagent है I
विधि के दोष -
●​Manual method में accurate pipetting और spectrophotometer की आवश्यकता होती है I
●​Reagent (cyanide) ख़तरनाक होता है;
●​उपरोक्त कारणों से इस method का उपयोग laboratory के बाहर सीमित होता है;
●​Lipids, plasma proteins का बढ़ा हुआ स्तर और leukocyte की बढ़ी हुई संख्या के कारण हुई turbidity
test में हस्तक्षेप कर सकती है;
●​Hemoglobin के वो derivatives जिनमें oxygen-carrying capacity नहीं होती (जैसे - MetHb,
COHb, SHb) उनमें यह method भेद नहीं कर पाता I इसलिए यदि ऐसे derivatives भी blood में
असामान्य मात्रा में उपस्थित होते हैं तो इस method द्वारा blood की oxygen-carrying capacity का
अधिमूल्यांकन (overestimation) हो सकता है I

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Q. 5.0. Answer in detail -

Q. 5.1. What is sterilization and define moist heat sterilization in detail. स्टेरिलाइजेशन क्या है
और नम गर्मी स्टेरिलाइजेशन को विस्तार में परिभाषित कीजिये I

Ans. Sterilization is a process by which the vegetative cells and spores of microbes are
completely eliminated or destroyed. Sterilization is used to decontaminate the culture media,
reagents and surgical instruments. The methods of sterilization are broadly divided into two
categories : I Physical methods and II Chemical methods
The physical methods include moist heat sterilization, dry heat sterilization, red heat
sterilization, incineration, infrared radiation and filtration. The chemical methods include various
chemicals in gaseous and liquid forms.

Moist heat sterilization is a physical method of sterilization and it is used in three ways in a
diagnostic laboratory -
1.​At a temperature of >100 °C (steam sterilization) - This is the most commonly used and
reliable method for sterilization. It is a procedure in which heated, high-pressure steam is
used to sterilize an object. The equipment used in this method is called autoclave. The
two basic types of steam sterilizers (autoclaves) are the gravity displacement autoclave
(class N) and the high-speed prevacuum sterilizer (class B). These may be large,
medium or small (table-top) steam sterilizers. In this process the moist heat denatures
the structural proteins and enzymes of the microbes resulting in their complete
destruction or elimination. Four parameters used in steam sterilization are - steam
(dryness fraction ≥97%), pressure (106 kPa or 795 mmHg), temperature (121/132 °C)
and time (30 min/4 min). However, the duration of sterilization depends also on the item
to be sterilized. When the items kept in the autoclave come in direct contact with steam
at a certain temperature and pressure the vegetative cells and spores present on the
items are completely destroyed. The items covered with paper (e.g. glasswares) are kept
in a hot air oven for some time after autoclave to prevent the steam condensation and
finally these sterilized items are kept in a clean, safe and closed environment to maintain
their sterility.
2.​At a temperature of 100°C - This is also a moist heat sterilization method of sterilization
in which the items to be sterilized are dipped in boiling distilled water for 30-40 minutes.
This method is used for sterilization of contaminated dishes, beddings, pipettes, other
instruments and temperature sensitive items. This method is less reliable than autoclave. 3.​Steaming at 100 °C (Tyndallization) - This is used to sterilize substances /media
containing ingredients sensitive to pressurized heating at temperature above 100 °C.
The process involves steaming on three successive days. On the first day the substance
(medium) is steamed for 30 minutes to kill the vegetative cells. Then it is left overnight at
room temperature to encourage the germination of endospores. The steaming for a
further 30 minutes on the second and third day ensures the destruction of the
germinated spores.

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Ans. Sterilization वो प्रक्रिया है जिसके द्वारा रोगाणु के vegetative cells और spores दोनों ही पूर्णतया नष्ट
हो जाते हैं I Sterilization का इस्तेमाल culture media, reagents और surgical instruments को
decontaminate करने के लिए होता है I Sterilization की कई विधियाँ हैं जिन्हें मुख्य रूप से दो श्रेणीयों में
विभाजित किया गया है : I Physical methods और II Chemical methods Physical methods में शामिल हैं - moist heat sterilization, dry heat sterilization, red heat
sterilization, incineration, infrared radiation और filtration जबकि chemical methods में विभिन्न
chemicals का गैस और तरल रुप में उपयोग होता है I
Moist heat sterilization - यह sterilization की एक फिजिकल विधि है और इसका उपयोग डायग्नोस्टिक
लबोरटरी में तीन प्रकार से होता है :
1.​At a temperature of >100 °C (steam sterilization) - sterilization की सभी उपलब्ध विधियों में
यह विधि सबसे अधिक उपयोग होने वाली और सबसे अधिक भरोसेमंद विधि है I इसमें इस्तेमाल होने
वाले यन्त्र को autoclave कहते हैं I The two basic types of steam sterilizers (autoclaves) are
the gravity displacement autoclave (class N) and the high-speed prevacuum sterilizer
(class B). These may be large, medium or small (table-top) steam sterilizers. इस प्रक्रिया में
moist heat के कारण रोगाणुओं की structural proteins और enzymes के denaturation के कारण
रोगाणु पूरी तरह नष्ट हो जाते हैं I Steam sterilization में चार parameters का इस्तेमाल होता है, जो
हैं - steam (dryness fraction ≥97%), pressure (106 kPa or 795 mmHg), temperature
(121/132 °C) और time (30 min/4 min) I हालांकि, sterilization के समय का निर्धारण sterilize
किये जाने वाले item पर भी निर्भर करता है I Steam sterilization हेतु इस्तेमाल होने वाले एक
autoclave में रखे सभी items एक आवश्यक temperature और pressure पर एक निश्चित समय के
लिए steam के सीधे सम्पर्क में आने पर रोगाणुओं के vegetative cells और spores दोनों ही पूर्णतया
नष्ट हो जाते हैं I autoclave करने के बाद autoclave किये गये paper से cover किये गये items (जैसे
- glasswares) को hot air oven में थोड़ी देर के लिए रखते हैं ताकि paper पर steam condensation
नहीं होने पाये और अन्त में autoclave किये गये items को स्वच्छ, सुरक्षित और बंद वातावरण में
रखना चाहिए ताकि items की sterility बनी रहे I
2.​At a temperature of 100°C - यह भी एक moist heat sterilization की विधि है जिसमें sterilize
किए जाने वाले items को उबलते हुए distilled water में 30-40 मिनट तक डुबो कर रखते हैं I इसका
इस्तेमाल दूषित dishes, beddings, pipettes, एवं अन्य instruments और temperature sensitive
items को sterilize करने के लिए करते हैं I यह autoclave के मुकाबले कम भरोसेमंद है I 3.​Steaming at 100 °C (Tyndallization) - यह विधि उन substances /media को sterilize करने हेतु
उपयोग की जाती है जो 100 °C से अधिक तापमान पर pressurized heating के प्रति संवेदनशील होते
हैं I इसमें लगातार तीन दिनों तक sterilization किया जाता है, जिसमें पहले दिन 30 मिनट तक
steaming करने पर vegetative cells नष्ट हो जाते हैं I फिर इसे room temperature पर रात भर छोड़
देते हैं ताकि बचे हुए endospores अंकुरित हो जाएं I अब दूसरे और तीसरे दिन पुनः 30 - 30 मिनट
steaming करने पर अंकुरित spores भी नष्ट हो जाते हैं I

Q. 5.2. Write about the use, care and the maintenance of centrifuge. Centrifuge के उपयोग,
देखभाल और रखरखाव के बारे में लिखें I
Ans.
Uses of centrifuge -
Centrifuge is an essential equipment for a medical laboratory and is required for :
●​separation of cells, serum and plasma.
●​separation immiscible liquids
●​sediment suspended solids (precipitates)

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●​fractionation of many subcellular organelles
●​separation of lipoproteins
●​obtaining urine sediments for microscopic examination of urine.
●​getting PCV
Safety precautions or care in handling centrifuges -
●​The centrifuge must be placed on rubber pads or a mat on a flat level surface.
●​The centrifuge should never be handled with wet hands.
●​The size of the test tubes should neither be too long nor too small) and these should not
be filled with more than ¾ with the liquid.
●​The tubes that are opposite each other should be balanced in terms of their weight
because the unbalanced tube may result in vibrations and damage in the machine and
breakage of test tubes.
●​The lid of the centrifuge should be closed before starting the centrifuge and it should not
be opened until it has come to a complete stop.
Maintenance of the centrifuge -
●​The bowl of the centrifuge must be cleaned daily or after any spillage occurs. 70%
ethanol for metal bowls and 1% bleach for plastic ones is used to clean it.
●​Routine check is required for its speed, timer, display etc.
●​It should be repaired by a trained personnel only.

In Hinglish

Ans.
centrifuge का उपयोग -
Centrifuge medical laboratory के लिए एक अति आवश्यक equipment है और इसकी आवश्यकता होती है :
●​Blood से cells, serum और plasma के पृथक्करण में,
●​अमिश्रणीय (immiscible) liquids के पृथक्करण में,
●​suspended solids (precipitates) के अवसादन (sedimentation) में,
●​विभिन्न subcellular organelles के प्रभाजन (fractionation) में,
●​lipoproteins के पृथक्करण में I
●​Urine के microscopic examination हेतु sediment प्राप्त करने में I
●​PCV निकालने में I
centrifuges के उपयोग में सावधानी और देखभाल -
●​Centrifuge को rubber pads या किसी mat पर एक flat level पर रखना चाहिए I
●​गीले हाथों से centrifuge नहीं छूना चाहिए I
●​Centrifuge में न तो बहुत छोटी और न बहुत लम्बी test tube लगानी चाहिए और test tube में तीन
चौथाई से अधिक liquid नहीं भरना चाहिए I
●​Centrifuge rotor में लगी आमने सामने की tubes का वजन बराबर होना चाहिए क्योंकि बिना balance
की tubes लगा कर centrifuge चलाने पर vibrations के कारण test tubes टूट सकती हैं और
centrifuge भी ख़राब हो सकता है I
●​Centrifuge start करने के पहले ढक्कन अवश्य बंद कर देना चाहिए और Centrifuge का ढक्कन खोलने
से पहले देख लेना चाहिए कि rotor पूरी तरह रुक गया हो I

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centrifuge का रखरखाव -
●​centrifuge के bowls को प्रतिदिन या किसी केमिकल या infectious पदार्थ के छलकाव (spillage) होने
पर तुरंत साफ़ करना चाहिए I इसके लिए metal bowls को 70% ethanol से और plastic के bowls को
1% bleach का इस्तेमाल करते हैं I
●​इसकी speed, timer, display आदि की नियमित जाँचकरना चाहिए I
●​इसकी मरम्मत केवल किसी प्रशिक्षित कर्मचारी से कराना चाहिए I

Q. 5.3. Discuss vein puncture in detail. वेन पंक्चर की विस्तार में चर्चा कीजिये I
Ans. After collecting the materials required for blood collection such as blood test requisition
form, disposal syringes/Vacuum extraction system accessories (with 21-22 gauge needles),
blood collection tubes, tourniquet, 70% alcohol swab for skin disinfection, clean and dry gauze
pads or cotton wool balls, non-sterile gloves (sterile gloves for blood culture sample), marker
pen (with waterproof ink) and a puncture-resistant sharp container, the venous blood is collected
as follows:
Process of blood collection from vein:
1. First we put on non-sterile gloves (sterile gloves for blood culture sample).
2. Locate the vein - A visible and straight vein in the antecubital fossa or forearm is located. The
patient may be requested to clench his/her fist (not to pump repeatedly) to make the veins
clearly visible.
3. Then the venipuncture site is cleaned using a 70% alcohol swab and let it dry.
4. A tourniquet is applied about 4-5 fingers width above the intended venepuncture site.
5. Then the venepuncture is done using vacuum extraction accessories or the syringe (with
needle bevel face up). Once the blood begins to flow, the tourniquet is loosened and the patient
is requested to open the fist if it was clenched.
6. The vacutainer tubes are filled in the correct 'order of draw' or the syringe is filled with the
required amount of blood. The blood is mixed by gentle inversion of vacutainers for the required
number of times
7.The tourniquet is removed and a clean gauge piece (preferably) or a dry cotton wool ball is
placed at the piercing site and the needle is pulled gently. The patient is requested to hold the
gauze piece/cotton wool ball with pressure for 2-10 minutes . An adhesive tape can be placed
on the gauze piece. 8. If blood collected is in a syringe - The required amount of blood is transferred (as mentioned
in the tube label) directly into the vacutainer held upright in tube rack (in the correct order of
draw) by piercing the rubber cap (without removing the cap) or by using a blood transfer device.
9. Transferring the blood to non-vacuum tubes-
● The needle is recapped by one-hand-scoop technique before its removal to avoid needle
stick.
● The needle of the syringe is removed carefully using plier or artery forceps.
● The blood is poured after removing the cap of the tubes one by one without exerting
excessive pressure on the piston of the syringe (to avoid hemolysis)
10. The blood in the tubes is mixed by gentle inversion and for the required number of times.
11. The tubes are labeled with patient's information. The patient's name, age, bed number,
date/time of collection, fasting /non fasting status and the name of the phlebotomist is written.

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12. All the used items including the gauze piece/cotton wool ball held by the patient (if the
bleeding is stopped) are discarded. The gloves are removed and discarded in the appropriate
bin.
13. The patient is thanked
14. The blood samples are sent to the laboratory as soon as possible. For light-sensitive
parameters such as vitamin A, E, B1, B6, B12 and bilirubin etc. the blood tubes are covered
with foil.
15. Finally we wash our hands.

In Hinglish

Ans. सर्वप्रथम blood collection हेतु आवश्यक सामग्री एकत्र करते हैं, जैसे - blood test requisition form,
disposal syringes/vacuum extraction system accessories (with 21-22 gauge needles), blood
collection tubes, tourniquet, 70% alcohol swab for skin disinfection, clean and dry gauze pads or
cotton wool balls, Non-sterile gloves (sterile gloves for blood culture sample), marker pen (with
waterproof ink) and a puncture-resistant sharp container आदि I फिर venous blood को इस प्रकार
एकत्र करते हैं और इस प्रक्रिया को phlebotomy कहते हैं :
[Phlebotomy वो प्रक्रिया है जिसमें किसी व्यक्ति का blood एक needle की सहायता से सीधे vein से लिया
जाता है]
Vein से blood लेने की विधि -
1. non-sterile gloves पहनेंगे (blood culture sample के लिए sterile gloves पहनेंगे) I
2. Locate the vein - सबसे पहले antecubital fossa या forearm में एक स्पष्ट और सीधी vein देखते हैं I यदि
vein स्पष्ट नहीं हो तो मरीज़ को अपनी मुट्ठी को कस के बंद करने को कहते हैं (लेकिन बार-बार खोलने बंद करने
को नहीं) ताकि vein साफ दिखे I
3. venepuncture site को 70% alcohol swab से पोछेगे और alcohol को सूखने देंगे I
4.अभीष्ट (intended) venepuncture site के 4-5 उँगलियों की चौड़ाई के बराबर ऊपर एक tourniquet बांध देते
हैं I
5. vacuum extraction accessories या syringe से venepuncture करेंगे (with needle bevel face up)I
जैसे ही blood आना शुरू होगा वैसे ही tourniquet को ढीला कर देंगे और मरीज़ को मुट्ठी खोलने को कहेंगे, यदि
मुट्ठी बंद हो I
6. सभी vacutainer tubes को correct order of draw में भरेंगे या फिर syringe से blood की required
amount collect कर लेंगे I सभी vacutainers को आहिस्ता से निर्धारित बार invert करके blood को अच्छी
तरह mix करेंगे (serum tube सहित) I
7. Tourniquet को हटा देंगे और एक साफ gauze piece या एक सूखी cotton wool ball को piercing site पर
रखेंगे और needle को धीरे से निकाल लेंगे I मरीज़ को कहेंगे कि वो gauze piece/cotton wool ball को
pressure के साथ 2-10 minutes तक दबाये रखे (हाथ को मोड़े नहीं क्योंकि इससे hematoma बनने का खतरा
होता है), gauze piece पर एक adhesive tape लगा सकते हैं I 8. अगर blood एक syringe में collect किया है तो blood की आवश्यक मात्रा (जैसा blood collection tube
label में लिखा हो) सही 'order of draw' में vacutainers (जो एक rack में सीधी खड़ी लगी हों) में उनके rubber
cap में छेद करते हुए डालेंगे (cap को निकाले बगैर) या एक blood transfer device का इस्तेमाल करेंगे I
9. non-vacuum tubes में syringe से blood transfer करना -
● needle को syringe से हटाने के पहले syringe की needle पर उसका cap लगाएंगे (one-hand-scoop
तकनीक द्वारा ताकि needle हाथ में न चुभे) I syringe की needle को एक plier या artery forceps की मदद
से सावधानीपूर्वक हटाएँगे I

12
● अब प्रत्येक tube में एक एक करके cap हटा कर syringe से blood, बिना अधिक pressure डाले, tube में
डालेंगे और cap लगाते जाएंगे I
10. प्रत्येक tube को आहिस्ता से निर्धारित बार invert करके blood को mix करेंगे I
11. सभी tubes के label पर मरीज़ का नाम, उम्र, bed number, blood collection की date/time,
fasting/non fasting और blood collect करने वाले का नाम लिखेंगे I
12. इस्तेमाल किये गये सामान, gauze piece/cotton wool ball सहित, को निस्तारित करेंगे I मरीज़ से
gauze piece/cotton हटाने से पूर्व सुनिश्चित करेंगे कि bleeding बंद हो गई हो I gloves भी उतारकर
निस्तारित करेंगे I
13. मरीज़ को धन्यवाद देंगे I
14. Blood samples को laboratory में जल्दी से जल्दी भेज देंगे I Light-sensitive parameters जैसे vitamin
A, E, B1, B6, B12 और bilirubin आदि के लिए samples को foil से ढक देंगे I
15. अपने हाथों को धो लेंगे I

5.4. Discuss about Universal precautions in diagnostic laboratories. नैदानिक प्रयोगशालाओं में
सर्वभौमिक सावधानियों पर चर्चा करें I
Ans Universal precautions were first designed (by Centers for Disease Control and Prevention
(CDC) in 1985 for workers who work in an environment where they are exposed to blood and
other bodily fluids visibly contaminated with blood such as semen, vaginal secretions, synovial
fluid, amniotic fluid, cerebrospinal fluid, pleural fluid, peritoneal fluid, feces and urine. In 1996,
the CDC expanded the concept and changed the term to "standard precautions", which
integrated and expanded the elements of universal precautions to include contact with all body
fluids (except sweat), regardless of whether blood is present or not. The purpose of these
precautions is to prevent health workers from any possible infection from such body fluids of the
patients. Infection can occur when these agents (infected body fluids) come into contact with
broken skin or contact with mucous membranes of the eyes, nose and mouth. It is important to
consider all biological wastes as infectious. Therefore, these universal precautions/standard
precautions should be followed by all the laboratory workers at all times in the laboratory. These
precautions are as under:
Hand Hygiene -
The hands should be washed -
●​Before wearing and after removal of gloves.
●​Before & after patient contact
●​Upon contact or when there's visible contamination with blood or other potentially
infectious material.
●​Upon completion of required tasks and before leaving the laboratory.
The hands should be washed thoroughly using soap and water and dried with a clean,
disposable paper towel or using an automatic hand dryer.
When soap and water are not available then an alcohol-based hand sanitizer that contains at
least 60% (preferably 70%) alcohol is used (hands rubbed until dry).
Use of protective barriers - Protective barriers reduce the risk of exposure of the health-care
worker's skin or mucous membranes to potentially infectious materials. Personal protective
equipment (PPE) includes protective clothing, gloves, face shields, goggles, facemasks and/or
respirators or other equipment designed to protect the wearer from injury, spread of infection or
illness, hazardous chemicals and radioactive substances.

13
How to put on PPE -
Hand hygiene → shoe covers, if applicable → gown → face mask → face shield /goggles →
gloves
How do you remove PPE -
Shoe covers → gloves → gown removed from shoulders → goggles/face shield → face mask
→ hand hygiene
Cleaning of contaminated surfaces/fluid spills -
●​Gloves should be worn before decontaminating the spill and disposable towels or other
means of cleaning that will ensure against direct contact with blood, body fluids or feces
should be used.
●​The contaminated area is decontaminated by first covering it with paper towels or any
absorbing papers then an approved germicide or 1:10 solution of concentrated bleach
solution is poured over it and left for at least 30 minutes.
●​The soaked papers are removed with gloved hands and discarded.
●​The contaminated surface of any equipment must also be thoroughly washed and
disinfected.
Safe handling/disposal of contaminated material -
●​Recapping of syringe with the used needle should be avoided, but if necessary,
"one-hand scoop technique" should be used.
●​All used 'sharps' should be discarded in the appropriate puncture-resistant containers.
●​The puncture-resistant gloves should be worn for handling all the contaminated wastes
to prevent body contact.
●​All biological waste should be disposed off in a puncture-resistant container lined with a
leak-proof plastic bag. A biological waste symbol should be pasted on the container.
●​Waste containers should not be overfilled or forcefully stuffed as it may increase the
contamination.

In Hinglish

Ans. Universal precautions, Center for Disease Control and Prevention (CDC), USA द्वारा 1985
में एड्स के मद्देनज़र introduce की गई guidelines का एक set हैं I इनकी रचना उन workers के लिए की गई
है जो ऐसे वातावरण में काम करते हैं जहाँ उनका लोगों के शरीर के blood और अन्य body fluids जो blood से
contaminated हों, जैसे - blood, semen, vaginal secretions, synovial fluid, amniotic fluid,
cerebrospinal fluid, pleural fluid, peritoneal fluid, feces और urine से exposure होता है I किन्तु 1996
में CDC ने इस संकल्पना (concept) का विस्तार करते हुए इसे एक नया नाम दिया 'Standard Precautions'
जिसमें सभी body fluids के contact से बचने को कहा गया चाहे उसमें blood present हो या न हो I इन body
fluids का संपर्क workers की कटी - छिली त्वचा या आँख, नाक और मुँह की mucous membrane से होने पर
उन्हें संक्रमण हो सकता है I सभी प्रकार के बायोलॉजिकल waste को भी रोग़जनक समझना चाहिए I इन
precautions का उद्देश्य स्वास्थ्य कर्मियों को मरीज़ के body fluids से होने वाले संभावित संक्रमण से बचाना है
I इसलिए सभी लैब workers को universal precautions/standard precautions का सदैव पालन करना
चाहिए और ये निम्न हैं :
1.हाथों की सफाई (Hand hygiene )
हाथ कब धोना चाहिए -
●​Gloves पहनने के पहले और उतारने के बाद I

14
●​मरीज़ के संपर्क /स्पर्श के पहले और बाद में I
●​Blood या अन्य संभावित रोग़जनक पदार्थ के संपर्क में आने पर I
●​लैब में काम समाप्त करने के बाद और लैब छोड़ने से पहले I
हाथों को साबुन और पानी से अच्छी तरह धोकर एक साफ़ disposable paper towel या एक automatic hand
dryer से सुखा लेना चाहिए I यदि साबुन और पानी उपलब्ध नहीं हो तो एक alcohol-based hand sanitizer,
जिसमें कम से कम 60% (बेहतर हो यदि 70% हो) alcohol हो, का इस्तेमाल करें (हाथों को सूखने तक मलना
चाहिए) I 2.Protective barriers का इस्तेमाल
Protective barriers से health-care workers की त्वचा या mucous membranes को संभावित संक्रामक
सामग्री के संसर्ग (exposure) के जोखिम को कम किया जा सकता है I इसके लिए PPE का इस्तेमाल करते हैं I
Personal protective equipment (PPE) में शामिल हैं - protective clothing, gloves, face shields,
goggles, face masks और/या respirators या अन्य equipment जिनके द्वारा injury या संक्रमण से बचा जा
सके I
PPE पहनने का क्रम - Hand hygiene → shoe covers, if applicable, → gown → face mask → face
shield /goggles → gloves
PPE उतारने का क्रम - Shoe covers → gloves → gown removed from shoulders → goggles/face
shield → face mask → hand hygiene
3.Contaminated surfaces/fluid spills को साफ करना
●​Blood या body fluid के spill को decontaminate करने के लिए पहले gloves पहन कर उसे paper
towel या कोई absorbent paper से cover करते हैं जिससे blood उसमेँ absorb हो जाए , फिर
water और किसी detergent से उतने area को साफ करते हैं I फिर कोई germicide या 1:10 diluted
bleach solution (5.25 % sodium hypochlorite) डाल कर कम से कम 30 मिनट छोड़ देते हैं I इसके
बाद soaked papers/paper towel को gloves पहन कर हटा कर उचित रूप से निस्तारित करते है I
●​किसी equipment की contaminated surfaces को भी इसी प्रकार अच्छी तरह साफ कर disinfect
करना चाहिए I
4.दूषित पदार्थों को सुरक्षापूर्वक संभालना और निस्तारण करना (safe handling/disposal of contaminated
material)
●​इस्तेमाल की गई needle को तोड़ना, मोड़ना या कोई हेर-फेर नहीं करना चाहिए I needle पर उसके cap
को पुनः नहीं लगाना चाहिए I यदि recap करना पड़े तो 'one hand scoop तकनीक' का इस्तेमाल
करना चाहिए I इस्तेमाल किये हुए sharps को निर्धारित sharp resistant container में रखना चाहिए I
sharps को सामान्य कूड़े में कभी नहीं डालना चाहिए I ●​Biological waste और अन्य दूषित पदार्थों का निस्तारण करते समय विशेष सावधानी रखनी चाहिए I
●​सभी biological waste को रोग़जनक समझना चाहिए और इसलिए इनको handle करते समय
puncture resistant gloves पहनने चाहिए तथा ये ध्यान रखना चाहिए कि इनका संपर्क शरीर से नहीं
हो I
●​Biological waste को leak proof प्लास्टिक बैग वाले puncture resistant container में डालना
चाहिए और container पर biological waste का symbol लगा होना चाहिए I
●​Container को उसकी क्षमता से अधिक नहीं भरना चाहिए और न ही उसमें ज़बरदस्ती ठूसना चाहिए
क्योंकि इससे संदूषण बढ़ सकता है I

5.5. Renal Function Tests. रीनल फंक्शन टेस्ट I
Ans. Renal function test (RFT) is used in the management of patients with kidney disease or
pathologies affecting renal function, identifying the presence of renal disease, monitoring the

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response of kidneys to treatment, and determining the progression of renal disease. The
following tests are done in urine and blood :
●​Urine - routine and microscopic examination
●​Glomerular Filtration Rate
●​Serum creatinine
●​Serum urea or blood urea nitrogen (BUN)
●​Serum cystatin C
Urine routine examination -
Physical examination - This includes mainly the appearance and the specific gravity of urine -
whether urine is clear or turbid (normal urine is clear/transparent), colour is normal or dark
(normal urine is straw coloured). The specific gravity is checked by an urinometer or a urine strip
(sp. gravity is an indicator of renal concentrating ability). The specific gravity of a normal urine is
1.003 - 1.030. The pH of urine is also checked by using litmus paper or pH paper strip. The
normal pH of urine is 6.0-6.5 (acidic). A higher pH (alkaline) indicates kidney stones/UTIs/
kidney-related disorders but a low pH (more acidic) may be found in diabetic
ketoacidosis/diarrhea/ starvation.
Chemical examination -
The analyte of interest in renal function tests is protein. Normal urine protein is up to 150 mg per
day (30% albumin) and its rising levels indicate a kidney problem. Albuminuria refers to the
abnormal presence of albumin in the urine. Urinary protein is tested by TCA, sulfosalicylic acid,
heat test or dip strips. Urinary albumin is estimated by immunoturbidimetric assay,
immunonephelometric assay or HPLC and then urinary albumin excretion (UAE), albumin
excretion rate (AER), urinary albumin concentration (UAC) or albumin : creatinine ratio (ACR) is
calculated to find normoalbuminuria, microalbuminuria and macroalbuminuria.
The microscopic examination of urine may also give indications about kidney function e.g. - the
presence of red blood cells, WBCs (pus cells), casts and crystals.
Glomerular filtration rate (GFR) - This is the best overall indicator of the glomerular function.
GFR is the rate in milliliters per minute at which substances in plasma are filtered through the
glomerulus. The normal GFR for an adult is 90 to 120 ml per minute. There are different
formulas for eGFR (estimated GFR) calculation - Cockcroft -Gault formula, MDRD formula,
CKD-EPI formula and IDMS traceable MDRD formula and these require serum creatinine value.
We can assess the renal disease, stage of chronic kidney disease (CKD), and response to
treatment by the level of eGFR (lower than normal).
Serum creatinine - Creatinine is the by-product of creatine phosphate in muscle, and it is
produced at a constant rate by the body. For the most part, creatinine is cleared from the blood
entirely by the kidney. Decreased clearance by the kidney results in increased blood creatinine
and hence the increased level of creatinine may be a sign of poor kidney function. The amount
of creatinine produced per day depends on muscle mass and diet. Serum creatinine may
increase due to prerenal, renal or postrenal causes.
Serum creatinine can be estimated by three methods - 'endpoint assay' and 'reaction rate assay’
(based on Jaffe's reaction), enzymatic endpoint method and E enzymatic kinetic method (based
on use of enzymes and change in absorbance at 340 nm).
Biological reference interval of serum creatinine : Male - 0.9-1.3 mg/dl, Female - 0.6 - 1.1 mg/dl

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Serum Urea/Blood Urea Nitrogen (BUN) - Urea is formed in the liver as the end product of
protein metabolism and the urea cycle. About 85% of urea is eliminated via kidneys.
The results of serum/plasma urea are expressed in two quite different ways viz. as whole urea
molecule (mmol/L or mg/dl) and as amount of urea nitrogen (commonly referred to as blood
urea nitrogen (BUN) concentration (mmol/L or mg/dl). Urea (mg/dl) is approximately twice that of
BUN. Serum/plasma urea concentration reflects GFR - as the GFR declines, plasma/serum
urea rises. However, there are some physiological and pathological non-renal causes of
increased plasma/serum urea as well. The ratio of BUN and creatinine can be useful to
differentiate prerenal from renal causes when the BUN is increased.
Urea can be estimated by three methods - Chemical endpoint method : Diacetyl monoxime
method, Enzymatic endpoint method: Urease Berthelot method and Enzymatic Kinetic method :
UV GLDH method. Serum urea reference interval is 14 - 50 mg/dl and BUN is 6.5 - 23 mg/dl
Cystatin C - Cystatin C is a low-molecular-weight protein produced by all nucleated cells in the
body. It is formed at a constant rate and freely filtered by the kidneys. Serum levels of cystatin C
are inversely correlated with the glomerular filtration rate (GFR). In other words, high values
indicate low GFRs, while lower values indicate higher GFRs, similar to creatinine. The
advantages of cystatin C over creatinine are that it is not affected by age, muscle bulk, or diet,
and various reports have indicated that it is a more reliable marker of GFR than creatinine,
particularly in early renal impairment. Cystatin C is measured by using immunoassays such as
nephelometry or particle-enhanced turbidimetry.
The reference interval of cystatin C is around 0.62 – 1.15 mg/L. Values can vary between
laboratories.
In addition to the above parameters, sometimes serum sodium, potassium calcium, phosphorus,
magnesium and uric acid are also investigated because their altered levels have been found to
be associated with altered kidney function.

In Hinglish

Ans. Renal function tests (RFT) का उपयोग renal disease की पहचान करने, kidney disease के
treatment का kidneys द्वारा दिए गए response की monitoring करने और Renal disease की प्रगति को
जानने के लिए किया जाता है I इसके लिए urine और blood में निम्नलिखित tests किये जाते हैं -
●​Urine - routine and microscopic examination
●​Glomerular Filtration Rate
●​Serum creatinine
●​Serum urea or blood urea nitrogen (BUN)
●​Serum cystatin चाहिए
Urine examination :
Physical examination - इसमें हम urine का appearance और specific gravity देखते हैं -
Urine clear है या turbid (normal urine clear/transparent होती है), colour normal है या dark है (normal
urine भूसे के कलर की होती है ) और Urine की specific gravity urinometer या urine strip द्वारा देखते हैं
(जो renal concentrating ability का एक सूचक है) l साथ में urine का pH भी देखते हैं (litmus paper या pH
paper strip द्वारा) I normal urine का pH 6.0-6.5 (acidic) होता है I Normal से अधिक pH (alkaline)
kidney stones/UTIs/ kidney-related disorders का संकेत देता है किन्तु सामान्य से कम pH (more acidic)
diabetic ketoacidosis/diarrhea/ starvation का संकेत देता है I

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Chemical examination -
Normal urine में कुल protein की प्रतिदिन की मात्रा लगभग 150 mg होती है (जिसमें 30% albumin होती है)
और इसकी बढ़ी हुई मात्रा kidney problem को दर्शाती है I Urine में protein TCA, sulfosalicylic acid, heat
test या dip strips द्वारा मापते हैं और urine sample में immunoturbidimetric assay,
immunonephelometric assay या HPLC द्वारा albumin estimate करके urinary albumin excretion
(UAE), albumin excretion rate (AER), urinary albumin concentration (UAC) या albumin :
creatinine ratio (ACR) calculate करके normoalbuminuria, microalbuminuria और
macroalbuminuria का पता लगा सकते हैं I
Urine के Microscopic examination द्वारा भी हमें kidney function के संकेत मिलते हैं, जैसे - Red blood
cells, WBCs (pus cells), casts और crystals की उपस्थिति होने पर I
Glomerular filtration rate (GFR) - यह glomerular function का सबसे अच्छा सूचक (indicator) होता है I
GFR मिलिलीटर प्रति मिनट में वो दर (rate) होती है जिससे plasma के पदार्थ glomerulus के माध्यम से filter
होते हैं I एक व्यस्क में normal GFR 90 से 120 ml per minute होता है I इसके लिए विभिन्न फॉर्मूले हैं, जैसे -
Cockcroft -Gault formula, MDRD formula, CKD-EPI formula और IDMS traceable MDRD formula,
जिनमें serum creatinine value की आवश्यकता होती है I eGFR के विभिन्न स्तर (सामान्य से कम) द्वारा
हम रीनल disease, stage of chronic kidney disease, और treatment के response को monitor कर
सकते हैं I
Serum creatinine - Creatinine, muscles में creatine phosphate का उप-उत्पाद (by-product) है और यह
शरीर में एक constant rate से बनता रहता है I जब kidneys द्वारा creatinine की निकासी (clearance) कम
होती है तो blood में creatinine की मात्रा बढ़ जाती है और यह kidney function के ख़राब होने का एक संकेत
होता है I शरीर में प्रति दिन उत्पादित creatinine की मात्रा शरीर के muscle mass और diet पर निर्भर करती है I
serum में creatinine बढ़ने के prerenal, renal या postrenal कारण हो सकते हैं I Serum creatinine
estimation के 3 methods हैं - Jaffe's reaction पर आधारित 'endpoint assay' या 'reaction rate assay',
Enzymatic endpoint method और Enzymatic kinetic method (विभिन्न enzymes के उपयोग द्वारा 340
nm पर absorbance में परिवर्तन के आधार पर kinetic method द्वारा) I Biological reference interval of
serum creatinine : Male - 0.9-1.3 mg/dl, Female - 0.6 - 1.1 mg/dl है I
Serum Urea/Blood Urea Nitrogen (BUN) - Urea protein metabolism और urea cycle के end
product के रूप में liver में बनता है I urea का लगभग 85% kidneys द्वारा eliminate होता है I
Serum/plasma urea के परिणाम दो तरह से प्रकट किये जाते हैं : एक तो पूरे urea molecule के रूप में
(mmol/l या mg/dl), और दूसरे urea nitrogen के रूप में, जिसे blood urea nitrogen (BUN) भी कहते हैं
(mmol/l या mg/dl) I urea BUN का लगभग दोगुना होता है I Serum/plasma urea concentration GFR को
दर्शाता है : जैसे - जैसे GFR कम होता है, वैसे - वैसे plasma/serum urea concentration बढ़ता है I हालांकि,
कुछ physiological और pathological non-renal कारणों से भी plasma/serum urea बढ़ जाता है I BUN
और Creatinine का अनुपात BUN के बढ़ने के prerenal और renal कारण में भेद करने में उपयोगी हो सकता है
I Urea estimation के 3 methods हैं - Chemical endpoint method : Diacetyl monoxime method,
Enzymatic endpoint method: Urease Berthelot method और Enzymatic Kinetic method : UV
GLDH method). Serum urea का reference interval : 14 - 50 mg/dl और BUN: 6.5 - 23 mg/dl
Cystatin C - Cystatin C एक low-molecular-weight protein है जो शरीर की सभी nucleated cells द्वारा
produce होती है और यह एक constant rate से बनती है और kidneys द्वारा freely filter होती है I serum में
इसकी बढ़ी हुई मात्रा low GFRs दर्शाती है और इसका घटा हुआ स्तर higher GFRs दर्शाता है, जो कि
creatinine के समान है I Creatinine की अपेक्षा cystatin C के फायदे ये हैं कि यह age, muscle mass, या
diet से प्रभावित नहीं होता और creatinine की अपेक्षा इसे एक अधिक भरोसेमंद marker मानते हैं , खासतौर पर
शुरुआती renal impairment में I Cystatin C को immunoassays जैसे - nephelometry या

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particle-enhanced turbidimetric methods द्वारा मापा जाता है I इसका reference interval 0.62 – 1.15
mg/L है जो विभिन्न लैब्स में अलग - अलग हो सकता है I
इन parameters के अतिरिक्त कभी - कभी serum calcium, sodium, potassium, phosphorus,
magnesium और uric acid की भी जाँच की जाती है क्योंकि kidney function में बदलाव होने पर इनके स्तर में
भी परिवर्तन पाये जाते हैं I

Disclaimer : The pictures given in the text have been downloaded from Google images and I
am thankful to the persons who have uploaded these pictures.
Dr. P. K. Nigam
Ph. D.
Retired Biochemist