Tinciones de GRAM y ZIEHL NEELSEN

trabajo sobre las tinciones de GRAM y ZIEHL NEELSEN

1. UNIVERSIDAD CATÓLICA DE CUENCA UNIDAD ACADEMICA DE SALUD Y BIENESTAR FACULTAD DE MEDICINA CATEDRA: MICROBIOLOGIA Y PARSITOLOGIA I CATEDRÁTICA: DRA. ANDREA ASTUDILLO . INTEGRANTES: MARITZA ENRÍQUEZ ANDREA ESCANDON ANDRES FLORES PARALELO: TERCER CICLO DE MEDICINA “A”

2. TINCIÒN Las células bacterianas son ricas en ácidos nucleicos tienen cargas (+) en los grupos fosfatos que se combina con las cargas (+) de los colorantes básicos. Los colorantes ácidos no tiñen a las células bacterianas, se utilizan para teñir el material de fondo para proporcionar un contraste de color

3. TINCIÒN DE GRAM Tinción utilizada para separar las bacterias en Gram (+) y Gram (-). Se fija la muestra en un portaobjetos mediante calentamiento o tratamiento con alcohol. Se expone ala muestra a violeta de cristal. Se añade yodo para formar el complejo con el colorante principal .

4. TINCIÒN DE GRAM En la decoloración con alcohol o acetona el complejo: Queda retenido en las bacterias Gram positivas y S e pierde en las Gram negativas. Los microrganismos Gram (-) retienen el colorante safranina( color rojo).

5. TINCIÒN DE GRAM El grado en el que un microrganismo conserva el colorante depende de: Del microorganismo De las condiciones del cultivo. Habilidades tintoriales del microscopista.

6. TINCIÒN DE GRAM

7. TINCIÒN DE GRAM

8. TINCIÓN DE ZIEHL NEELSEN

9. La  tinción de Ziehl-Neelsen  ( BAAR ) es una técnica de tinción diferencial rápida y económica, usada para la identificación de microorganismos patógenos, como  M. tuberculosis o el género Apicomplexa (coccidios intestinales) entre otros. Fue descrita por primera vez por dos médicos alemanes: Franz Ziehl , un bacteriólogo, y  Friedrich Neelsen , un patólogo. TINCIÓN DE ZIEHL NEELSEN

10. TINCIÓN DE ZIEHL NEELSEN Esta tinción demuestra la capacidad de ciertas bacterias de  resistir a la decoloración por ácidos y alcoholes , lo cual se correlaciona con su alto contenido en lípidos en la pared celular y presencia de  ácidos micólicos  que aumentan el carácter hidrófobo. Una de las bacterias que presentan esta característica es Mycobacterium tuberculosis Principal causante de la tuberculosis.

11. TINCIÒN DE ZIEHL NEELSEN Se utiliza para teñir micobacterias y otros microorganismos acido resistentes. Se tiñen con carbolfucsina básica. Resisten a la descoloración con soluciones de acido-alcohol. Se realiza contra tinción del fondo con azul de metileno. Los microorganismos aparecen de color rojo sobre un fondo azul claro.

12. Los reactivos necesarios para su realización son los siguientes: ácido periódico 58 % carbol fucsina de Ziehl culina ( fucsina fenicada). Preparar mezclando en el orden dado : 0,5 g fucsina básica 50 cc agua destilada 5 cc etanol absoluto 28,5 g cristales de fenol derretidos hematoxilina alcohol ácido 1%: alcohol de 35º ácido clorhídrico Técnica

13. PROCEDIMIENTO

14. Etapa 1: PREPARACIÓN DEL EXTENDIDO Tomar una cantidad homogénea de esputo y extenderla de un extremo a otro del portaobjetos para lograr una película homogénea

15. Etapa 2 CUBRIR El EXTENDIDO CON FUCSINA FILTRADA

16. Etapa 3 CALENTAR HASTA EMISIÓN DE VAPORES TRES VECES DURANTE 5 MINUTOS

17. Etapa 4 LAVAR CON AGUA

18. Etapa 5 CUBRIR CON SOLUCIÓN DECOLORANTE DURANTE 3 MINUTOS Solución decolorante: alcohol ácido

19. Etapa 6 LAVAR CON AGUA

20. Etapa 7 CUBRIR CON AZUL DE METILENO DURANTE 1 MINUTO

21. Etapa 8 LAVAR CON AGUA Y SECAR AL AIRE

22. ETAPA 10 OBSERVACION MICROSCÓPICA Y LECTURA DE EXTENDIDOS

23. INTERPRETACION DE RESULTADOS Células Color Bacilos y microorganismos Alcohol Acido-Resistentes. Rojo brillante Gérmenes, otros organismos y material de soporte. Diferentes tonalidades de azules