CURSO: EQUIPOS DE LABORATORIO CLINICO TEMA : TIPOS DE COLORANTES AÑO DEL BICENTENARIO, DE LA CONSOLIDACIÓN DE NUESTRA INDEPENDENCIA, Y DE LA CONMEMORACIÓN DE LAS HEROICAS BATALLAS DE JUNÍN Y AYACUCHO”.
DEFINICIÓN Los colorantes son compuestos químicos utilizados en laboratorios de diversas disciplinas, desde la biología y la química hasta la medicina y la industria alimentaria. Su aplicación es fundamental para resaltar, identificar o distinguir diferentes componentes en muestras o materiales, permitiendo así la realización de análisis precisos y la obtención de resultados significativos.
COLORANTES Cristal violeta . Da color azul o violáceo a las bacterias Gram positivas . Safranina . Da color rojizo o anaranajado a las bacterias Gram negativas. Aparte de estos colorantes, en la tinción de Gram se usará el Lugol como mordiente, y alcohol 96% para decolorar. Todas las células (sean Gram positivas o negativas) se teñirán con el cristal violeta
UTILIDADES La principal utilidad de la tinción de Gram es la de distinguir entre bacterias Gram positivas y negativas. Las Gram negativas que perdieron coloración por el tratamiento con alcohol ahora se verán de color rojo, naranja o rosáceo por acción de la safranina. Por otra parte, las bacterias Gram positivas teñidas con cristal violeta tendrán un color azulado o violáceo. Gram positivas Podemos observar que forman racimos, pero su forma es irregular, y los grupos pueden ser de diversa morfología . Se puede observar que es un cocobacilo alargado que suele agruparse formando cadenas. Visión de Listeria monocytogenes con la tinción de Gram. Visión de Staphylococus aureus con la tinción de Gram gram negativas Legionella pneumophila con la tinción de Gram . Pseudomonas aeruginosa con la tinción de Gram. Aparecen como bacilos alargados
Tinción Ziehl-Neelsen La tinción de Ziehl-Neelsen es de tipo diferencial, y sirve para detectar bacterias ácido-alcohol resistentes (BAAR), siendo la más destacada Mycobacterium tuberculosis . Esto es muy útil, sobre todo teniendo en cuenta que M. tuberculosis no puede ser detectada correctamente con la tinción de Gram.
Fucsina fenicada . Da un color rojizo a las bacterias AAR . Azul de metileno . Da un color azulado al resto de bacterias que no son AAR . COLORANTES En la tinción de Ziehl-Neelsen, el alcohol-ácido cumple la una función parecida a la del alcohol 96% en la tinción de Gram. En este caso, el contraste aparece por los ácidos micólicos, que hacen que sus bacterias sean impermeables al alcohol-ácido
UTILIDADES La principal función de la tinción de Ziehl-Neelsen es la detección de micobacterias , tales como las provocadoras de tuberculosis ( M. tuberculosis ) o la lepra ( M. leprae ). También hay otras micobacterias que, si bien no son patógenas, sí que pueden ser patógenos oportunistas en determinadas circunstancias.
Tinción de Wirtz-Conklin La tinción de Wirtz-Conklin se usa para observar bien las endosporas bacterianas. La muestra debe ser obtenida de un cultivo en fase estacionaria. En este caso, para su observación al microscopio hay que usar la lente x100, usando aceite de inmersión . COLORANTES Verde malaquita. Tiñe las endosporas de verde . Safranina. Es opcional , y sirve para colorear el resto de la célula con un color anaranjado .
UTILIDADES Se usa para observan las endosporas bacterianas, estructuras de resistencia que forman algunas bacterias para sobrevivir en condicione ambientales extremas donde no pueden hacer su ciclo de vida normal. Así, se pueden ver las endosporas que forman Bacillus anthracis y Clostridium perfringens ,
TINCIÓN DE LEIFSON La tinción de Leifson usa para la observación de flagelos bacterianos ; entra dentro de las tinciones selectivas . Tienen un espesor de 0.01 micrones, por lo que son invisibles al microscopio óptico; por ello hace falta esta técnica especial. Para su observación en el microscopio óptico, se debe usar aceite de inmersión y el aumento 100x . COLORANTES Se usa el colorante de Leifson que está formado por : Fucsina básica 95%. Es el colorante en sí mismo . Etanol 1.2%. Ácido tánico 3%. Tiene función de mordiente Ácido tánico 3%. Tiene función de mordiente .
UTILIDADES Esta tinción se usa para ver a los flagelos , algo esencial para identificar muchas especies. Y es que los flagelos pueden aparecen en número y disposición diferente en las bacterias, de ahí que sean una forma de clasificación de estas (para ver los tipos de bacterias según el número y disposición de flagelos puedes entrar en el artículo de la célula procariota , en la sección “flagelo”). Flagelos de diversas especies de Bacillus con la tinción de Leifson. Usando la tinción de Gram no se podrían ver dichos flagelos, de ahí la necesidad de usar esta alternativa.
TINCIÓN DE GIEMSA Esta tinción es más usada en citología , ya que puede discriminar entre zonas con altos contenidos de ADN, por lo que puede diferenciar diversos orgánulos de la célula; es una tinción diferencial. No obstante, también se usa en microbiología para la detección de ciertas bacterias, destacando Rickettsia . COLORANTES Colorante de Giemsa. Da un color azul oscuro o violáceo al microorganismo
UTILIDADES En microbiología, la tinción de Giemsa detecta a bacterias como Rickettsia y Chlamydia , a protistas como Plasmodium y Pneumocystis , y ciertos hongos , como Histoplasma . Dichos microorganismos se detectan en posibles células infectadas. Visión de Plasmodium malariae con la tinción de Giemsa (azul oscuro). Se pueden ver hasta 8 merozoitos dentro de la célula infectada Presencia de Helicobacter pylori (bacterias con forma de espirilo) con tinción de Giemsa en una bioscopia gástrica
TINCIÓN NEGATIVA Se usa para detectar las cápsulas que aparecen en algunas bacterias, así que entra en el grupo de las tinciones selectivas . La tinción negativa se puede usar para el microscopio óptico o para el microscopio electrónico. Esta técnica se basa en contrastar las muestras mediante una sustancia opaca en ambos microscopios. COLORANTES Nigrosina . Tinta china .
Utilidades La principal función de la tinción negativa es observar las cápsulas bacterianas. Esto ocurre porque las cápsulas no absorben la tinta china, por lo que estas estructuras aparecen como zonas claras en un fondo negro, oscuro . Vi sión de las cápsulas de Cryptococcus neoformans en el microscopio óptico con tinción negativa (tinta china)