Centrifugação
É uma técnica que separa partículas em suspensão
(células, organelas ou moléculas) de acordo com as
diferentes massas ou densidades. Ela acelera a
sedimentação submetendo as partículas em
suspensão à força centrífuga até 600.000 vezes a
força da gravidade g. É usada para separar um tipo de
material de outros e como técnica analítica para medir
propriedades físicas (por ex. peso molecular,
densidade, forma e constante de ligação e de
equilíbrio) de macromoléculas. Existem dois tipos de
centrifugação:
Centrifugação diferencial: ocorre separação do
material celular solúvel do material insolúvel por
diferença de massa e densidade. A célula
homogeneizada é colocada em um tufo e
centrifugada. As partículas mais densas são
coletadas no fundo do tubo como um pellet, e as
menos densas permanecem no líquido
sobrenadante, que pode ser transferido para
outro tubo. Geralmente é usado para purificação
de proteínas.
Centrifugação em gradiente de
densidade: ocorre separação de
partículas ou moléculas que podem ser
semelhantes na forma e na densidade,
formando bandas ou zonas de acordo
com as diferenças entre massas. As
partículas são centrifugadas em solução
contendo sacarose num tubo e são
centrifugados com velocidade controlada,
de acordo com as moléculas de seu
interesse. Pois o tempo curto ou muito
longo pode não ser suficiente ou danificar
o material, não alcançando o objetivo da
técnica.