Aula 1 - Uso do microscópio em biologia celular.pdf

Aula 1 - Uso do microscópio

1. LGN0114 –Biologia Celular
Maria Carolina Quecine
Departamento de Genética
[email protected]
DESCOBRINDO AS CÉLULAS: INTRODUÇÃO
AOS MÉTODOS DE ESTUDO DAS CÉLULAS
POR MEIO DA MICROSCÓPIA
Aula prática1

2. OBJETIVO:Forneceraosalunosconhecimentosbásicossobrea
estruturaefuncionamentodascélulas,demodoacapacitá-lospara
oentendimentodagenéticaedodesenvolvimentodasespécies
vegetais,animaisemicro-organismosdeinteresseagronômicoe/ou
florestal.
LGN0114 –BIOLOGIA CELULAR
 LGN0114 -Biologia Celular
 LGN0232 -Genética Molecular
 LGN0215 -Genética
 LGN0313 -Melhoramento Genético
Disciplinas LGN

3. TRABALHO PRÁTICO
Buscandoummelhoraproveitamentodasaulaspráticaseda
disciplina,vocêalunoutilizaráamodelagemcomoferramenta
deaprendizagem.Essaéumaatividadeobrigatória,que
constituirápartedaavaliaçãodadisciplina(0,4danotado
conteúdoprático).Maioresdetalhesembreve!!!

4. LGN0114 –BIOLOGIA CELULAR
Métodode avaliação
1ª PROVA TEÓRICA: 29 de Abril a 03 de Maio
APRESENTAÇÃO DO TRABALHO PRÁTICO: :29 de Abril a 03 de Maio
2ª PROVA TEÓRICA: 24 a 28 de Julho
PROVA PRÁTICA: 24 a 28 de Julho
Médiafinal
Provas teórica 1 + Provas teórica 2 + Nota trabalho prático (0,4) + Nota
prova prática (0,6)/3
Não haverá prova substitutiva ou repositiva;
Aprovado => 5,0 e frequência => 70%

5. Todas segundas-feiras
Horários extras de plantões à combinar!
Independente dos plantões procure o professor e o
estagiário PAE
APROVEITEM A OPORTUNIDADE

6. REGRAS DA BOA CONVIVÊNCIA
•Nãochegaratrasado;
•SEMPRE trazera ApostilaPráticade BiologiaCelular;
•Evitarmaterial emcimadas bancadas;
•Proibidoo usode celular(Lei n°12.730, de 11/10/2007)

8. amenorunidadedeumorganismovivo(vidaautônoma)éacélula;
aspropriedades(morfologiaefisiologia)deumorganismodependemdas
propriedadesdesuascélulas;
ascélulasseoriginamunicamenteapartirdeoutrascélulasesuacontinuidadese
mantémdevidoàtransmissãodeseumaterialgenéticoaolongodasgerações
(hereditariedade).
Biosfera
Ecossistemas
Comunidades
Populações
Organismos
Órgãos
Tecidos
Células
Organelas
Moléculas
TEORIA CELULAR

9. UNIDADES EM BIOLOGIA CELULAR
Unidade de comprimento:
1 mm = 1000 micrometros (µm)
1 µm = 1000 nanometros(nm)
1 nm= 10 Angstrons (A)
Árvore: 30 m
Homem: 1.5-2 m
Diâmetro de alga gigante: 5 mm
Ameba: 100 µm
Maioria das células eucarióticas: 10-50 µm
Maioria das células procarióticas: 1-5 µm
Maiores vírus: 300 nm
Menor vírus: 20 nm

10. Organizaçãoestruturale composição
Tecnologiasde visualização
Microscopiaóptica
Microscopiaeletrônica
Tecnologiasde coloração
Célulasvivasoufixadas
OBSERVAÇÃO DAS CÉLULAS
Células são extremamente pequenas, complexas e geralmente
incolores.

11. Instrumentodeprecisãoparaobservarobjetoscom
dimensõesinferioresaopoderderesoluçãodoolhohumano.
Resolução do olho humano a 25 cm é de 100 a 300 μm(0,1 a
0,3 mm)
MICROSCÓPIO

12. MICROSCOPIA ÓPTICA
O caminho da luz em
um microscópio óptico
Fonte de luz
Condensador
Espécime
Objetica
Ocular
Olho
humano

13. 13
braço
corpo
ocular
canhão
objetivas
mesa
condensador
controle do diafragma
base com fonte de luz
controle de
intensidade
de luz
nível do diafragma
parafuso
macrométrico
parafuso
micrométrico
ajuste da mesa
MICROSCÓPIO ÓPTICO
revólver

14. PORÇÃO MECÂNICA
1.Péoubase–servedeapoioparaosdemaiscomponentesdomicroscópio.
2.ColunaouBraço–fixoàbase,servedesuporteaoutroselementos.
3.MesaouPlatina–ondesefixaaamostraaobservar;apresentaumajanelaporondepassam
osraiosluminososetambémparafusosdentadosquepermitemdeslocaraamostra.
4.Tubooucanhão–suportaaocularnaextremidadesuperior.
5.RevólverouÓptico–peçagiratóriaportadoradeobjetivasdediferentesampliações.
6.Parafusomacrométrico–asuarotaçãoéresponsávelpormovimentosverticaisdaplatina,
rápidosedegrandeamplitude.
7.Parafusomicrométrico–asuarotaçãoéresponsávelpormovimentosverticaisdaplatina,
lentosedepequenaamplitude,permitemaperfeiçoarafocalização.
8.ComandodeCharriot-movimentaalâminadeumladoparaooutro,permitindoumaanálise
dalâminacomoumtodo.
9.Presilha–prendeomaterialaserobservadonamesa

15. 15
PORÇÃO ÓPTICA
1.Condensador–conjuntodeduasoumaislentesconvergentesqueorientameespalham
regularmentealuzemitidapelafonteluminosasobreocampodevisãodomicroscópio.
2.Diafragma–éconstituídoporpalhetasquepodemseraproximadasouafastadasdocentro
atravésdeumaalavancaouparafuso,permitindoregularaintensidadedaluzqueincideno
campodevisãodomicroscópio.
3.Objetivas–permitemampliaraimagemdoobjeto10x,40x,50x,90xou100x.
Asobjetivasde10x,40xe50xsãodesignadasobjetivassecaspoisentreaamostraeaobjetiva
existesomentear.
Asobjetivasde90xe100xsãodesignadasobjetivasdeimersão,umavezque,parautilizá-las,
énecessáriocolocarumagotadeóleodeimersãoentreelaseaamostra,oqual,porter
umíndicederefraçãosemelhanteaodovidro,evitaodesviodofeixeluminosoparafora
daobjetiva.
4.Oculares–sistemadelentesquepermiteampliaraimagemrealfornecidapelaobjetiva,
formandoumaimagemvirtualquesesituaaaproximadamente25cmdosolhosdoobservador.
Asocularesmaisutilizadassãoasdeampliação10x,masnosmicroscópiosbinocularestambém
existemocularesde12,5x,8xe6x.
5.Fonteluminosa–amaisutilizadaatualmenteéaluzartificial,fornecidaporumalâmpadade
tungstêniooudehalogênio,incluídanoaparelhojuntamentecomuminterruptorcomreostato,
quepermiteregularaintensidadedaluzemitida.

16. LENTES OBJETIVAS
4X
10X
40X
Objetiva de 4x
Objetiva de 10x
Objetiva de 40x

17. LENTES OBJETIVAS
óleoar
lente objetiva
lâmina
Objetiva de 100x

18. 18
4 X
10 X
40 X
CAMPO DE VISÃO

19. A total = A objetiva X A ocular
Objetiva de 4x Ocular de 10x
Objetiva de 10xOcular de 10x
Objetiva de 40xOcular de 10x

20. Olimitederesoluçãodependedaobjetiva(aocular
nãoacrescentadetalhesàimagem,suafunçãoé
apenasaumentarotamanhodaimagem).
Éimpostoporrestriçãofísica–comprimentode
ondalimite200nm
PODER DE RESOLUÇÃO
É a capacidade de fornecer imagens nítidas.
É inferido de forma indireta, tendo como base o limite de resolução.
LIMITE DE RESOLUÇÃO
Corresponde a menor distânciaque deve existir entre dois pontos, de
modo que ainda apareçam individualizados na imagem formada pelo
sistema de lentes.
Comprimento de onda
<limite de resolução> poder de resolução

21. material não abrasivo;
as lentes de imersão devem ser limpas com papel
macio (se necessário embebido com álcool 70%);
as lentes de imersão com resíduos de óleo seco
devem ser limpas com xilol.
Limpeza das lentes:
Iluminação:
Fonte luminosa;
Condensador;
Diafragma.
Material fresco sem coloração: pouca luz (condensador em baixo, diafragma
fechado);
Material corado: muita luz (condensador em cima, diafragma aberto).
COMO UTILIZAR O MICROSCÓPIO ÓPTICO?

22. 22
objetiva de menor ampliação;
parafuso macrométrico;
mudança para a objetiva de maior ampliação;
parafuso micrométrico.
COMO UTILIZAR O MICROSCÓPIO ÓPTICO?
Como focalizar:
luz apagada e desligado da tomada;
condensador em baixo;
objetiva de menor ampliação alinhada;
subir a mesa;
coberto.
Como deixar o microscópio:

23. DiscussãodaimportânciadousodemicroscópiosemestudosdeBiologia
Celular,eaimportânciadaBiologiaCelularnaEngenhariaAgronômicae
Florestal.
EXERCÍCIOS
1. Teoriacelularx limitesde visão

24. 2.Identificaçãodaspartesópticase
mecânicasdomicroscópio.
Agoravamosfazeroexercício5!!!
-Pingarumagotadeáguanalamina;
-Colocarapalavra“feira”
-Cobrircomalamínula
1.explorarautilizaçãodosaumentosedocampode
visão;
2.observaredesenharo“objeto”
EXERCÍCIOS

25. Meristema apical
(região de divisão
celular)
Região de elongação
Região de maturação
coifa
3.Utilizaçãodomicroscópioóptico:
-explorarautilizaçãodosaumentos;
-observaredesenharoobjetodaobservação-
pontaderaizdeAlliumcepa(cebola)
-anotaroaumentofinalutilizado.

26. Meristema apical
coifa
Divisão celular
100 X 400 X

27. 4.Examedepulgõese/ouácarosnalupa.
-Anotaroaumentofinalusado.
PULGÕES
ÁCAROS
EXERCÍCIOS
Quandousarlupaoumicroscópio?

28. Microscopiaópticaconvencionalcom
umsistemadecapturadeimagens
digitalacopladoàumcomputador
ATUALMENTE…

29. 1.Teoria celular;
2.Microscopia óptica: partes ópticas e mecânicas do microscópio;
3.Microscopia óptica: sistema de amplificação da imagem (aumento total);
4.Tipos de microscópios e suas utilizações;
5.Cuidados com o microscópio;
6.Distinçãoentre microscópioópticoe lupa.
ESTUDO DIRIGIDO

30. LEITURA DA SEMANA
Livro:
Alberts,B.;Bray,D.;Hopkin,K.;Johnson,A.;Lewis,J.;Raff,M.;
Roberts,K.;Walter,P.2011.FundamentosdaBiologiaCelular.
3ªEdiçãobrasileira.Artmed,PortoAlegre
CAPÍTULO1–INTRODUÇÃOÀCÉLULA