FACULDADE DO MÉDIO PARNAÍBA - FAMEP D ISCIPLINA: MICROBIOLOGIA E IMUNOLOGIA MORFOLOGIA E CITOLOGIA FÚNGICA Prof. Me. Joara TERESINA-PI 2022
FUNGOS – DEFINIÇÃO Os fungos não possuem nenhum pigmento fotossintético; Não formam tecido verdadeiro; Não apresentam celulose na parede celular (exceto alguns fungos aquáticos); Não armazenam amido como substância de reserva; Apresentam substância quitinosa na parede celular;
Sua estrutura somática é representada por hifas; São Heterotróficos – Eucarióticos; Nutrem-se de matéria orgânica morta (fungos saprófitas) ou viva (fungos parasitas); Apresentam dois grande grupos: os pluricelulares ou filamentosos(bolores) e os unicelulares (leveduras).
Decompositores primários de matéria orgânica. Responsáveis pela reciclagem de nutrientes. Alimentos Como alimentos Como produtor de alimentos : proteinas , vitaminas, etc. No preparo de alimentos : Panificação , bebidas (cerveja, vinho) Antibióticos (Penicilina, Cephalosporina , Griseofulvina ) F U NGOS: IMPO R T ÂN C IA DE S EU E S T U D O
Importância do estudo de fungos do ar Deterioração dos alimentos: Importantes recicladores de matéria orgânica do meio ambiente Degradação estética de paredes: Criam manchas escuras em ambientes com alta umidade (Ex: banheiros ) Doenças respiratórias (Ex. rinites e outras alergias do trato respiratório) causadas por inalação de esporos )
Doenças: Plantas, homem, animais.
REINO FUNGI FI LO S 1- Chytridiomycota: Sem interesse clín i co (esporos assexuados, móveis e com 1 flagelo) 2- Zygomycota: Fase sexuada (formação de zigósporos) Fase assexuada ( esporangiósporos) 3- Basidiomycota: Reprodução sexuada por basidiosporos 4 - A s c o myco t a: Fase sexuada (ascósporos) Fase Assexuada (conídios)
TAX O N O M IA FUNGI ZYGOMYCOTA BASIDIOMYCOTA ASCOMYCOTA CHYTRIDIOMYCOTA MICOSES
FUNGOS: E S T RU T U R A V E G E T A T I V A U n i c elul a r Le v ed u r a s Brotamento Cissiparidade Pluricelular Bolores Filamento Septado Cenocíti c o Pseudo Fi l a m e nto s o Candida albicans
Célula Fúngica Parede celular -Proteção e forma Membrana celular -Ergosterol Citoplasma -Núcleo com cromossomo linear -Membrana nuclear -Nucléolo, RE, mitoc ô ndria , ribossomos - V acú o l o s, complexo de G o l gi Cápsula Cryptococcus neoformans (levedura)
: M e m b ra n a celular Parede celular Sintese de ácidos Nucleicos
1,3 1,6 glucanas M.P. q ui t i na ergosterol mannoproteinas Esquema parede e membrana celular fungos:
Citologia d os fungos Parede celular : Forma do fungo – força mecânica Proteção osmótica – evita o choque osmótico Sede de antígenos - induz a produção de Anticorpos Composição química principalmente de: Manoproteina, glucanas e quitina (Leveduras – restrita a área de formação do blastoconídio: brotamento da célula-mãe). Quitina , glucanas (Bolor) Alguns lipídios e pigmentos (melanina – fungos demáceos )
Ma n o p r ot e ín a s são proteínas glicosiladas A parede celular dos fungos não tem peptideoglicano , fato que a difere da das bactérias.
Citologia de fungos Membrana celular Atua como uma barreira semi – permeável no transporte ativo e passivo das substâncias ; Constituída por uma porção hidrofóbica e outra hidrofílica ; Esteróis – Ergosterol Lipídeos associados a açucar –glicolipídeos - importantes na aderência da célula fúngica às células do hospedeiro
Citologia de fungos Núcleo Contém o genoma fúngico Agrupado em cromossomos lineares Composto de DNA dupla fita em hélice Contém histonas associadas ao DNA cromossomal Plasmídeos: estruturas circulares de DNA dupla fita localização extra cromossômica, capacidade de autoduplicação de modo independente dos cromossomos auto transferência para outras células Raramente evidenciados em leveduras Ribossomos: síntese proteica Mitocôndria: Fosforilação oxidativa
Citologia de fungos Núcleo Contém o genoma fúngico Agrupado em cromossomos lineares Composto de DNA dupla fita em hélice Contém histonas associadas ao DNA cromossomal Plasmídeos: estruturas circulares de DNA dupla fita localização extra cromossômica, capacidade de autoduplicação de modo independente dos cromossomos auto transferência para outras células Raramente evidenciados em leveduras Ribossomos: síntese proteica Mitocôndria: Fosforilação oxidativa
Cápsula : Facultativa Mucopolissacarídeos Fator de virulência→função : resistência à fagocitose (algumas leveduras) Ex: Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii Citologia de fungos
Morfologia dos fungos Macromorfologia: características macroscópicas (coloniais) Micromorfologia: características microscópicas
Bolores – fungos filamentosos e multicelulares MACROMORFOLOGIA Colônias de aspecto seco, aveludadas, algodonosas, pulverulentas. Os bolores são menos exigentes que as leveduras e bactérias, em relação a umidade, pH, temperatura e nutrientes; Normalmente cresce em a limentos ricos em carboidratos e ácidos; Co m o são em grande m aio r ia a eróbios e les c re s c em apenas na superfície do alimento em contato com o ar; A assimilação de nutrientes é bastante acelerada.
BOLORES (MACROMORFOLOGIA)
Aspergillus, Fusarium e Penicillium
ASPERGILLUS SP.
PENICILLIUM SP.
B OLORES (FUNGOS FILAMENTOSOS) Mic r om o rfol o gia 1. Características microscópicas: . Multicelulares e filamentosos . Hifas: Estruturas tubulares e ramificadas. Do grego hyphe quer dizer teia. . Hifas e esporos são características clássicas dos filamentosos. . Conjunto de hifas m ass a s fila m ento s as en o ve l ad a s) M I CÉLIO . Devido ao enovelamento das hifas filamentosas, as colônias são mais resistentes do que as de bactérias.
Tipos morfológicos de hifas: (micélio) Asseptada, não septada ou cenocítica septada
Rhizopus spp. Agentes deteriorantes comuns em alimentos de origem vegetal. Bolor comum em pão Muito utilizados no preparo de alimentos orientais fermentados
Fungos Pluricelulares Chap é u L a m e l as Corpo constituído por 2 componentes Reprodução (Esporos no ar) Micélio – mantém o fungo vivo - Atividade decompositora das hifas Hifas - Células com parede celular de quitina Os cogumelos são os corpos de frutificação de certos fungos .
LEVEDURAS – FUNGOS UNICELULARES
Coloração e Consistência Forma, superfície, margem, coloração, aspecto (seco, úmido), Tamanho – dependem do tempo de incubação, meio e temperatura LEV ED URAS
Necessitam para o seu crescimento de umidade superior a exigida pelos bolores e inferior a exigida pelas bactérias. Faixa de temperatura ideal para o crescimento em torno de 25°C a 30°C; O crescimento é favorecido em pH ácido; Multiplicando-se melhor em aerobiose (com exceção das leveduras fermentadoras que se multiplicam melhor em anaerobiose) e tendo açúcar como fonte de energia. As leveduras transformam o açúcar em álcool através do processo de fermentação. Ex: Candida tropicalis . Glicose → álcool etílico + gás carbônico As leveduras do gênero Saccharomyces são as que apresentam maior valor industrial e comercial como agentes biológicos de transformação em indústrias de bebidas fermentadas, de panificação e destilarias de etanol. Levedos (fermento biológico). Pão, cachaça, cerveja, vinho. Reprodução: brotamento Leveduras – fungos unicelulares
MICR O MO R FOLOGIA Unicelulares Esféricas, ovais ou elipsóides Algumas formam pseudo-micélio
LEVEDURAS M A CR O S C O P I A MICROSCOPIA
Cryptococcus neoformans
Levedura: Saccharomyces cerevisiae Levedura + Bactéria L e v e d uras
Colônia Mic é lio Hi f as
Desenvolvimento dos fungos
Aspergillus parasiticus Microsporum canis PLEOMO R FISMO Q uando os ciclos biológicos de nutrição e reprodução estão em plena atividade, esta pode apresentar forma filamentosa verdadeira – independe da temperatura.
D I M O R F ISMO TÉRMICO 25 ºC Bolores 37 ºC Leveduras É considerado um mecanismo de defesa importante para a adaptação de fungos às condições adversas do hospedeiro humano, à invasão de tecidos e ao estabelecimento da doença . A temperatura é um dos estímulos mais notórios no dimorfismo.
BOLORES (MACROMORFOLOGIA) Aspecto da colônia (aveludado, cotonoso, pulverulento), Bordas, Tamanho e Cores
Retirada da colônia da placa Tubo com meio De cultura Exame direto
ASPECTO MACROSCÓPICO ASPECTO MICROSCÓPICO As p ergill u s spp
Culturas Afetadas: Algodão, Amendoim, Arroz, Arroz irrigado, Aveia, Cevada, Ervilha, Feijão, Milho, Soja, Sorgo, Trigo É um dos fungos responsáveis pela produção de micotoxinas (aflatoxina) em grãos armazenados. As micotoxinas em grãos armazenados podem ser produzidas a baixas temperaturas. Responsável pela A spergilose - fonte de contágio mais comum é a via aérea, e causa de infecção grave com risco de vida em pacientes imunodeprimidos. Fungo de pós colheita ( Aspergillus spp )
Controle : A prevenção contra a infecção dos grãos por fungos promotores de grãos ardidos deve levar em consideração um conjunto de medidas: a) utilizar cultivares mais resistentes aos fungos do gênero Aspergillus ; b) realizar rotação de culturas com espécies de plantas não suscetíveis aos fungos do gênero Aspergillus ; c) interromper o monocultivo ; d) usar sementes de alta qualidade sanitária; e) evitar altas densidades de plantio; f) No caso do milho, utilizar cultivares com espigas decumbentes; g) evitar colher espigas atacadas por insetos e pássaros; i) não retardar a colheita;
BOLORES (MICROMORFOLOGIA) Conídios : forma (esféricos, fusiformes), cor (hialino, pigmentado), septos, isolados ou agrupados Fusarium Penicillium
LEVEDURAS M A CR O S C O P I A MICROSCOPIA
Cryptococcus neoformans
Muitas espécies possuem morfologia similar I d e n t i f icaç ã o molecular Diferenças morfológicas extremamente difíceis de serem detectadas Identificação clássica de fungos – uso de chaves de identificação
Identificação polifásica de fungos Características morfológicas Características fisiológicas C aracterísticas genéticas T é cnicas Moleculares
COMPARAÇÃO ENTRE OS MICRORGANISMOS DE IMPORTÂNCIA MÉDICA Características Bactérias Fungos Vírus- Células Sim Sim Não Diâmetro(µm) 1-5 3-10 0,02-0,2 Ácido Nucléico D N A e R N A D N A e R N A D N A o u R N A Tipo de núcleo Procariótico Eucariótico Nenhum Ribossomos 70S 80S Ausente Mitocôndria Ausente Presente Ausente Camada externa Parede rígida Parede rígida Proteina do contendo contendo capsídeo e peptidioglicana quitina lipoproteina do envelope Motilidade Alguns representantes Nenhum Nenhum Multiplicação Fissão binária Brotamento ou mitose Replicação