Dengue: obtención de mx, conservación, transporte y diagnostico

Dengue

1. PLAN DE FORTALECIMIENTO DE CAPACITACION PARA LA OBTENCION, CONSERVACION, TRANSPORTE Y DIAGNOSTICO DE DENGUE 2025 DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH BLGO. MOLECULAR CASTRO RODRIGUEZ RICHARD ALFONSO COORDINADOR DEL AREA DE BIOLOGIA MOLECULAR LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL ÁNCASH

2. GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH FINALIDAD La capacitación tiene como fin detectar oportunamente la circulación de Dengue en la región de Ancash, asimismo orientar la personal de laboratorio sobre la correcta obtención, conservación, transporte y diagnostico de muestras con sospecha de Dengue y así poder informar, orientar las medidas de prevención y control de estas enfermedades a nivel nacional, departamental, distrital y municipal.

3. GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH OBJETIVO GENERAL   Fortalecer a la red de laboratorios de la región de Ancash específicamente a la Red de Salud Pacifico Norte y Pacifico Sur en el manejo de la obtención, conservación, transporte y métodos de diagnóstico de Dengue.   OBJETIVOS ESPECIFICOS   Establecer los materiales necesarios para una correcta toma, manejo y transporte de las muestras para el diagnóstico de Dengue.   Establecer si las redes de laboratorios cuentan con el stock de insumos necesarios ante un posible brote de dengue en la región de Ancash.   Establecer los métodos de diagnóstico adecuados para el procesamiento de muestras con sospechas de dengue. Establecer los criterios de inclusión/exclusión para el envió de muestras positivas de Dengue para la evaluación de serotipos de Dengue por parte del Laboratorio de referencia regional de Ancash. OBJETIVOS

4. AMBITO DE APLICACION GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH El presente plan de fortalecimiento está basado mediante la norma técnica actual propuesto por el Instituto Nacional de Salud: NTS Nº125-MINSA/2016/CDC-INS “NORMA TECNICA DE SALUD PARA LA VIGILANCIA EPIDEMIOLOGICA Y DIAGNOSTICO DE LABORATORIO DE DENGUE, CHIKUNGUNYA, ZIKA Y OTRAS ARBOVIROSIS EN EL PERU ”

5. AMBITO DE APLICACION GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH N.º DISA/DIRESA/GERESA /DIRIS/RED LABORATORIOS METODO DIAGNOSTICO IMPLEMENTADO     1   ANCASH Salud pública- Red de salud Pacifico Norte Serología Salud pública- Red de salud Pacifico Sur Serología Laboratorio de Referencia Regional de Ancash Molecular 2   LIMA Laboratorio de Metaxénicas Virales-INS Secuenciación genómica, molecular

6. CAPACIDADES PARA LA OBTENCION, CONSERVACION, TRANSPORTE Y DIAGNOSTICO DE DENGUE GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH OBTENCION DE LA MUESTRA (TOMA DE MUESTRA DE SANGRE) Condiciones previas del paciente:  a. Estrictamente, la venopunción debe llevarse a cabo con el paciente en ayunas b. La ficha epidemiológica debe ser llenada adecuadamente al momento de la venopunción

7. GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH CAPACIDADES PARA LA OBTENCION, CONSERVACION, TRANSPORTE Y DIAGNOSTICO DE DENGUE CASO SOSPECHOSO Cumple con un criterio clínico asociado a síntomas específicos del virus del Dengue CASO PROBABLE Cumple con un criterio clínico y a la vez epidemiológico CASO CONFIRMADO Cumple con el criterio de laboratorio

8. CONSIDERACIONES GENERALES Cumplir con todas las medidas de bioseguridad pertinentes (USO DE EPPS) El personal debe colocarse y retirarse adecuadamente el EPP y realizar el lavado de manos frecuentemente durante todo el proceso Colocar los residuos biocontaminados en bolsas o recipientes de color rojo y punzocortantes en envases rígidos. GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH OBTENCION de la muestra

9. Ligadura para extracción de sangre Algodón Alcohol 70º Mesa de trabajo Guantes de latex Capuchón para el sistema tipo Vacutainer Agujas hipodérmicas estériles Sistema colector sanguíneo al vacío tipo Vacutainer GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH OBTENCION de la muestra

10. GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH OBTENCION de la muestra Venopunción Posición del paciente Punto para la extracción de sangre Técnica para la ligadura Indicación al paciente de abrir y cerrar la mano Palpado y ubicación de la vena Desinfección de la superficie externa de punto de venopunción

11. GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH OBTENCION de la muestra Armado del sistema Vacutainer Inmediatamente, colocar la aguja hipodérmica para el sistema tipo Vacutainer en el capuchón, colocar el tubo Vacutainer dentro del capuchón y retirar la tapa de la aguja Uso del sistema colector sanguíneo

12. GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH OBTENCION de la muestra Extracción de sangre - Introducir la aguja en el centro de la vena, sin dudar. - El sistema se llenará automáticamente. NOTA: Nunca intentar punzar una vena, por un lado. Introducir la aguja de 1 a 1.5 cm a lo largo de la vena

13. GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH NOTA: Los sistemas colectores sanguíneos al vacío tipo Vacutainer, son: Tapa amarilla/dorada: Vacuette Tubo 5 mL – Separador de Suero – Activador de coagulación Contenedor tipo Vacutainer, tapa amarilla Retirar la ligadura Retirar la aguja de la vena Presión del algodón sobre el punto de venopunción   OBTENCION de la muestra

14. GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH aplicar 2500 rpm por 5 minutos Trasladarlo a un criovial de 1.8 mL SEPARACIÓN DEL SUERO Centrifugación Calidad del Suero Las muestras no deberán ser hemolizadas, turbias o lipémicas Separación del suero OBTENCION de la muestra

15. NT. 153 - MINSA/2019/INS “Norma técnica de salud sobre preparación, embalaje y documentación para el transporte seguro de sustancias infecciosas” GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH

16. GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH

17. MUESTRAS CATEGORIA B GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH

18. GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH

19. Las muestras deben ser conservadas de manera correcta a una temperatura de 3 a 8 ªC . Las muestras deben ser enviadas al laboratorio de destino en un lapso no mayor a 24 horas. GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH Conservación de la muestra ESTABLECIMIENTO DE SALUD Identificación del caso: VIRUS DEL DENGUE Notificación y llenado de ficha de investigación Obtención de la muestra LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ANCASH Investigación y seguimiento del caso Procesamiento de la muestra positiva de VIRUS DEL DENGUE para la identificación de SEROTIPOS 1,2,3 Y 4 mediante la técnica de Biología Molecular: RT-PCR en Tiempo Real Información de resultado a través del sistema NETLAB 2.0 LABORATORIO DE SALUD PUBLICA(RSPS/RSPN) Análisis e identificación del VIRUS DEL DENGUE (ELISA NS1,IGM) Información de resultado al sistema NETLAB 2.0

20. GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH Conservación de la muestra CRITERIOS DE ACEPTACION DE MUESTRAS Cumplen con los criterios de inclusión según etiología Tienen fichas clínicas epidemiológicas Obtenidas oportuna y adecuadamente, según corresponda, a la temperatura adecuada y en crioviales. Están debidamente embaladas y conservadas óptimamente. CRITERIOS DE RECHAZO DE MUESTRAS No cumplen con los criterios de inclusión según etiología ( INICIO DE SINTOMAS ) Datos incompletos en la solicitud de análisis Envase roto y/o con derrame de muestra Evidente contaminación Deficiente conservación

21. GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH Conservación de la muestra Motivo de rechazo: Tª INADECUADA

22. Conservación de la muestra GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH Motivo de rechazo: DEGRADACION DEL MATERIAL GENETICO (ADN) TIEMPO DE ENVIO DE MUESTRA, MAYOR A 24 HORAS TOMA DE MUESTRA INADECUADA GENES INTERNOS AUSENTES(GENES HUMANOS)

23. ENVIAR LAS MUESTRAS INMEDIATAMENTE AL LABORATORIO DE SALUD PUBLICA O LRRA GARANTIZANDO LA CADENA DE FRIO DENTRO DE LAS 24 HORAS DE OBTENIDA LA MUESTRA Cumplir con lo establecido en la Norma Técnica de Salud Nª 153-MINSA/2019/INS sobre la preparación, embalaje y documentación para el transporte seguro de sustancia biológica de la categoría B. GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH TRANSPORTE DE MUESTRAS

24. GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH TRANSPORTE DE MUESTRAS Recipiente primario: Vial/frasco hermético (a prueba de filtraciones y derrames) que contiene el material infeccioso . Recipiente secundario : Envase hermético y duradero que encierra y protege al recipiente primario .

25. Embalaje exterior: Protege el contenido de los elementos exteriores que puedan causar daños físicos, mientras el paquete se encuentra en tránsito. El envase puede ser de tecnopor o cooler (plástico), por el hecho que la muestra requiere ser refrigerada. El embalaje secundario se coloca dentro del embalaje exterior con un material amortiguador. GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH TRANSPORTE DE MUESTRAS

26. GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH TRANSPORTE DE MUESTRAS Nombre, institución, número de teléfono y correo electrónico del responsable del envío (remitente) y del destinatario. La designación oficial de transporte “ SUSTANCIA BIOLÓGICA DE LA CATEGORÍA B ”. Muestra la marca UN3373 al interior de un rombo y está ubicada cerca de la designación oficial de transporte “SUSTANCIA BIOLÓGICA DE LA CATEGORÍA B ”. Etiqueta del a orientación que indica la posición de los recipientes primarios para el transporte .

27. TRANSPORTE DE MUESTRAS GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH LAS MUESTRAS NO CUMPLEN CON LA NORMA TECNICA Nº 153,CORRECTO USO DEL TRIPLE EMBALAJE DE LAS MUESTRAS LAS MUESTRAS NO ESTAN CODIFICADAS

28. GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH METODOS DE DIAGNOSTICO Virus del Dengue Aedes aegypti Agente etiológico Vector etiológico ENFERMEDAD METAXENICA ELISA Ag NS1 ,IgM

29. GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH TECNICA DE ELISA NS1 Muestras de suero con tiempo de enfermedad de 1 a 5 días de inicio de síntomas ESTA PRUEBA ES ALTAMENTE ESPECIFICA DURANTE LOS PRIMEROS 5 DIAS DESPUES DE INICIO DE LA FIEBRE DESPUES DEL SEXTO DIA LOS NIVELES DE NS1 SOLUBLE SE REDUCEN Y ES MEJOR EMPLEAR LAS PRUEBAS DE IgM o IgG Genoma del Virus del dengue

30. GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH FICHAS EPIDEMIOLOGICAS

31. GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH CRITERIOS DE INCLUSION MUESTRAS DE 1 A 5 DIAS DE INICIO DE SINTOMAS: REALIZAR ELISA NS1 DENGUE DE SER POSITIVO PASA A DENGUE SEROTIPOS POR RT-PCR EN TIEMPO REAL(LRR-ANCASH DE SER NEGATIVO,SE DESCARTA DENGUE Y PASA A DIAGNOSTICO DIFERENCIAL DE ZIKA Y CHIKUNGUNYA MUESTRAS DE 6 A 15 DIAS DE INICIO DE SINTOMAS: REALIZAR ELISA IgM DENGUE SI EL RESULTADO ES INDETERMINADO SE PIDE UNA SEGUNDA MUESTRA MAXIMO A LOS 10 DIAS DE INICIO DE SINTOMAS.

32. GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ANCASH El área de Biología Molecular del LRRA realizara la serotipifacion mediante RT-PCR en Tiempo Real Multiplex para la detección de los cuatro serotipos del virus Dengue Las muestras biológicas serán seleccionadas con resultados de ELISA Ag NS1 positivo , se enviarán semanalmente 6 muestras de suero (con densidad óptica superior a 1.0 y menor a 5) al LRRA

33. GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH FECHA DE ENVÍO: FIMA DEL ANALISTA RESPONSABLE FIRMA Y SELLO DEL RESPONSABLE DEL LABORATORIO

34. GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH EQUIPOS Y STOCK DE INSUMOS   N.º   MATERIALES/EQUIPOS/INSUMOS RED DE SALUD PACIFICO NORTE/SUR   CANTIDAD   HOSPITALES   CANTIDAD 1 Ligadura para extracción de sangre         2 Algodón         3 Alcohol de 70º         4 Mesa de trabajo         5 Guantes de latex         6 Capuchon para el sistema tipo vacutainer         7 Agujas hipodérmicas esteriles para tipo vacutainer         8 Sistema colector sanguíneo al vacio tipo vacutainer         9 Lector de ELISA         10 Lavador de ELISA         11 Criobox         12 Crioviales         13 Reactivos para ELISA AgNS1         14 Reactivos para ELISA IgM        

35. GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH PARTICIPACION Y RESPONSABILIDADES HOSPITALES/CENTROS DE SALUD Deben de garantizar que sus establecimientos de salud cuenten con los insumos y materiales necesarios para la correcta toma, manejo y transporte de muestras hacia el LRRA. LABORATORIOS DE SALUD PUBLICA (PACIFICO SUR Y PACIFICO NORTE) Deben de garantizar que el establecimiento cuente con las mesas de trabajo, stock de insumos de reactivos, materiales de procesamiento, para realizar el procesamiento mediante la técnica de ELISA para la identificación de muestras con sospechas de DENGUE . Los laboratorios deben de garantizar que los resultados sean confiables, trabajando con los criterios de controles internos. LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ANCASH Debe de garantizar el correcto procesamiento de muestras positivas de ELISA AgNS1 positivas y evaluar los serotipos de DENGUE . Verificación del correcto llenado de fichas epidemiológicas y validación de la información generada en la región de Ancash. Procesara de acuerdo a su capacidad de diagnóstico en coordinación con el Instituto Nacional de Salud. Reporte oportuno de resultados al NETLAB 2.0 . Enviara las muestras positivas con ser tipificación de DENGUE hacia el INS para la evaluación de secuenciación genómica.

36. GOBIERNO REGIONAL DE ÁNCASH DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH RECOMENDACIONES Realizar la toma de muestra a personas que cumplan con la definición de caso probable del virus del Dengue Realizar la correcta toma, conservación y trasnporte de muestras de casos sospechosos del Virus del Dengue. Cumplir con los criterios de inclusión a la hora de emplear el método de diagnostico a utilizar.

37. Gracias ¡ Gracias! BLGO. RICHARD CASTRO RODRÍGUEZ CEL. 991416142 LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL ÁNCASH LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL DE ÁNCASH