Diafanizacion y Tinción Ósea con Alizarina

1. Secuencia de aparición de centros de osificación en embriones y fetos bovinos mediante la técnica de diafanización y tinción ósea con alizarina Carlos A. Mejía G. Biólogo M. Sc. Morfología, UdeA

2. PROTOCOLO Técnica modificada de Dawson Etapas Fijación Deshidratación Tinción Diafanización

3. Fijación-Evisceración Formol 5% Especímenes pequeños Especímenes grandes Extraer encéfalo Extraer bloque toracoabdominal

4. Deshidratación- Coloración Etanol al 70% (1 día) Etanol al 70% + I 2 (1 día) Etanol al 70% (1 día) KOH al 2% + Alizarina (1 día)

5. Diafanización y Montaje permanente KOH al 2% (1 semana) (2 veces) KOH al 2%: NH 4 OH (v/v) (1 : 1) ( 1semana)(2 veces) KOH al 2%: NH 4 OH : GLICERINA (v/v) (1 : 1 : 1) ( 1semana) (2 veces) NH 4 OH : GLICERINA (v/v) (1 : 1) (1semana) (2 veces) GLICERINA (v/v) (1semana) (2 veces)

6. OBJETIVOS

7. Día 37

8. Día 40

9. Día 45

10. PERIODO EMBRIONARIO Estructura ósea Edad (Días) Longitud C-R ( cm ) OSIFICACION CLAVICULA 37 2.2 MEMBRANOSA MANDIBULA 40 2.8 MEMBRANOSA MAXILAR 45 3.5 MEMBRANOSA PALATINO 45 3.5 MEMBRANOSA FRONTAL 45 3.5 MEMBRANOSA HUMERO 45 3.5 ENDOCONDRAL FEMUR 45 3.5 ENDOCONDRAL RADIO 45 3.5 ENDOCONDRAL ULNA 45 3.5 ENDOCONDRAL TIBIA 45 3.5 ENDOCONDRAL FIBULA 45 3.5 ENDOCONDRAL TEMPORAL 45 3.5 MEMBRANOSA COSTILLAS 45 3.5 ENDOCONDRAL NO osificación en CLAVICULA Día 47

11. Día 58

12. Día 60

13. Día 70

14. Día 76

15. Día 90

16. PERIODO FETAL ( día 46 a día 90) Edad: 58 días Longitud C-R: 6cm ANILLO TIMPANICO ( E) ESCAPULA ( E) PARIETAL (M) CIGOMATICO (M) INCISIVO ( E) NASAL (M) LACRIMAL (M) OCCIPITAL BASILAR (E) APOFISIS ESTILOIDES (E) OCCIPITAL ESCAMOSA (M) ALAS ESFENOIDES (M) CUERPO VERTEBRAL C2 hasta L5 (E) ARCOS VERTEBRALES C1 hasta L2(E) ILION (E) METACARPOS(E) METATARSOS (E) FALANGES DISTALES (E) Edad: 60 días Longitud C-R: 7cm ISQUION 50 7 (E) CUERPO ESFENOIDES (E) Edad: 70 días Longitud C-R: 10.5cm VOMERONASAL(M) FALANGE PROXIMAL (E) Edad: 76 días Longitud C-R: 13cm FALANGE MEDIA (E) Edad: 90 días Longitud C-R: 14.5cm CALCANEO (E) ESTERNEBRAS E1 A E5 (E)

17. DISCUSION

18. Secuencia de aparición de centros de osificascion en la cabeza de bovinos

19. 1………………………… 2…………………………….. 3…………………………….. 4. …………………………… 5……………………………… 6……………………………… Secuencia de aparición de centros de osificación en las extremidades de los bovinos.

20. CONCLUSIONES

21. BIBLIOGRAFÍA Dawson, A. B. 1926. A note on the staining of the skeleton of cleared specimens with alizarin red S. Stain Tech., 1: 123-124. Barone R. (1976): Anatomie Comparée des Mammifères Domestiques. Tome I: Atlas y texto. Ostéologie . Ed. Vigot Fréres Mejía, C.A 1985. Observaciones sobre el desarrollo del sistema esquelético en los humanos durante las primeras 20 semanas de gestación. Revista Actualidades Biológicas

22. Muchas gracias!!! http://www.udea.edu.co/portal/page/portal/portal/A.InformacionInstitucional/H.UnidadesAcademicas/A.Facultades/Medicina/D.Departamentos/Morfologia?_piref359_3917610_359_3917529_3917529.tabstring=LaboratorioTecnicasMorfologicas http://medicina.udea.edu.co