Diagnóstico parasitológico(metodo directo,indirecto y molecular) (i parcial)

Primer Parcial

1. Diagnóstico ParasitológicoDiagnóstico Parasitológico

2. IntroducciónIntroducción
La única forma de confirmar el La única forma de confirmar el
diagnóstico es la demostración del diagnóstico es la demostración del
parásito.parásito.
Se fundamenta en el conocimiento de la Se fundamenta en el conocimiento de la
biologia del parásito :biologia del parásito :
–HábitatHábitat
–Ciclo evolutivoCiclo evolutivo
–Lo que permite tomar la muestra Lo que permite tomar la muestra
biológicabiológica
–Técnica de laboratorio adecuadaTécnica de laboratorio adecuada

3. La Muestr aLa Muestr a
La calidad de la muestra enviada a laboratorio tiene gran La calidad de la muestra enviada a laboratorio tiene gran
importancia, debido a que el transporte en pañal absorbente importancia, debido a que el transporte en pañal absorbente
o muestras recolectadas de bacinicas, no es de utilidad ya o muestras recolectadas de bacinicas, no es de utilidad ya
que solo se obtienen falsos negativos o simplemente no son que solo se obtienen falsos negativos o simplemente no son
útiles por encontrarse mezcladas con orina.útiles por encontrarse mezcladas con orina.
De igual forma, el tiempo de envío reviste mucha importancia, De igual forma, el tiempo de envío reviste mucha importancia,
en el caso de que se sospeche amebas o se desee buscar en el caso de que se sospeche amebas o se desee buscar
trofozoitos de Giardia u otros protozoarios, para dicho efecto trofozoitos de Giardia u otros protozoarios, para dicho efecto
la intención es que la muestra recolectada mantenga la intención es que la muestra recolectada mantenga
adecuada temperatura ya que al enfriarse los trofozoitos adecuada temperatura ya que al enfriarse los trofozoitos
inician su enquistamiento.inician su enquistamiento.

4. La MuestraLa Muestra
Por lo tanto si este es el objetivo, debe solicitarse al Por lo tanto si este es el objetivo, debe solicitarse al
laboratorio que facilite a los familiares envases térmicos o laboratorio que facilite a los familiares envases térmicos o
que la muestra sea recolectada en el mismo laboratorio.que la muestra sea recolectada en el mismo laboratorio.
También debe tomarse en cuenta si el paciente recibe También debe tomarse en cuenta si el paciente recibe
medicamentos como bismuto, aceite mineral, antibióticos o medicamentos como bismuto, aceite mineral, antibióticos o
antimaláricos, ya que alteran los resultados provocando antimaláricos, ya que alteran los resultados provocando
generalmente falsos negativos.generalmente falsos negativos.
Idealmente las muestras deben haberse obtenido en las Idealmente las muestras deben haberse obtenido en las
últimas dos horas, antes de procesarlas en el laboratorio.últimas dos horas, antes de procesarlas en el laboratorio.

5. Formas de diagnosticar una Formas de diagnosticar una
parasitósisparasitósis
Método directo Método directo
Método indirectoMétodo indirecto
Método molecularMétodo molecular

6. Método directoMétodo directo
Es la observación del agente etiológico y Es la observación del agente etiológico y
su caracterización morfológicasu caracterización morfológica..
Examen de frescoExamen de fresco
Examen macroscópicoExamen macroscópico
Examen microscópicoExamen microscópico
Métodos de concentración Métodos de concentración
Métodos cuantitativos(kato-katz)Métodos cuantitativos(kato-katz)
Métodos cualitativosMétodos cualitativos
Coloración rápidaColoración rápida

7. Examen Examen
coproparasitológicocoproparasitológico
NNos informa desde característicasos informa desde características Macroscópicas Macroscópicas como la como la
consistencia, la presencia de sangre, moco y parásitos consistencia, la presencia de sangre, moco y parásitos
observables a simple vista o partes de estos como las observables a simple vista o partes de estos como las
proglótides de las tenias. proglótides de las tenias.
La observación La observación MicroscópicMicroscópica arroja datos importantes que a arroja datos importantes que
hacen pensar en un proceso inflamatorio agudo como la hacen pensar en un proceso inflamatorio agudo como la
presencia de leucocitos abundantes, glóbulos rojos, cristales presencia de leucocitos abundantes, glóbulos rojos, cristales
de Charcot Leyden que aparecen por destrucción de de Charcot Leyden que aparecen por destrucción de
eosinófilos en intestino, glóbulos de grasa relacionados con eosinófilos en intestino, glóbulos de grasa relacionados con
problemas de absorción, la presencia de levaduras, el pH de problemas de absorción, la presencia de levaduras, el pH de
las heces fecales y principalmente la descripción de las las heces fecales y principalmente la descripción de las
formas parasitarias encontradas, cantidad y características formas parasitarias encontradas, cantidad y características
tintoriales.tintoriales.

8. Métodos de concentración:Métodos de concentración:
Sulfato de zinc: se utiliza para la Sulfato de zinc: se utiliza para la
observacion de quistes y huevos de observacion de quistes y huevos de
helmintos.helmintos.
Formol-eter: para recuperar quistes, Formol-eter: para recuperar quistes,
huevos y larvas de helmintos (mas huevos y larvas de helmintos (mas
eficiente).eficiente).

9. CultivoCultivo
El cultivo de protozoarios intestinales es poco frecuente El cultivo de protozoarios intestinales es poco frecuente
por las elevadas exigencias del parásito, que encarecen el por las elevadas exigencias del parásito, que encarecen el
estudio y no todos los laboratorios implementan el mismo estudio y no todos los laboratorios implementan el mismo
como prueba habitual. En caso de requerirse y de contar como prueba habitual. En caso de requerirse y de contar
con todos los medios se logra el desarrollo de con todos los medios se logra el desarrollo de Entamoeba Entamoeba
histolyticahistolytica, , Trichomona vaginalis, AcanthamoebaTrichomona vaginalis, Acanthamoeba y y
Naegleria spNaegleria sp. Los medios mas utilizados son el de . Los medios mas utilizados son el de
Robinson y el polixénicoRobinson y el polixénico..

10. ColoraciónColoración
Tinciones permanentes:Tinciones permanentes: Son Son
utilizadas cuando existen dudas utilizadas cuando existen dudas
diagnósticas y es necesario identificar diagnósticas y es necesario identificar
las características morfológicas del las características morfológicas del
parásito, caso típico de las parásito, caso típico de las
semejanzas entre la Entamoeba semejanzas entre la Entamoeba
histolytica y la Entamoeba coli; las histolytica y la Entamoeba coli; las
más utilizadas son la tricrómica y la más utilizadas son la tricrómica y la
hematoxilina férrica.hematoxilina férrica.

11. Métodos indirectosMétodos indirectos
Este método implica la detección Este método implica la detección
indirecta del parásito, ya sea por la indirecta del parásito, ya sea por la
respuesta humoral que desencadena respuesta humoral que desencadena
el paciente o por la captura de los el paciente o por la captura de los
antígenos que el parásito libera.antígenos que el parásito libera.

12. Métodos indirectosMétodos indirectos
Debido a que el diagnóstico de varias Debido a que el diagnóstico de varias
parasitosis incluso las intestinales puede parasitosis incluso las intestinales puede
resultar desalentador mediante pruebas resultar desalentador mediante pruebas
habituales en heces fecales, se recomienda habituales en heces fecales, se recomienda
realizar pruebas indirectas especialmente realizar pruebas indirectas especialmente
para aquellos parásitos cuya identificación para aquellos parásitos cuya identificación
en heces es difícil o para aquellos que en heces es difícil o para aquellos que
pueden tener localización tisular ya sea en pueden tener localización tisular ya sea en
la pared intestinal u otros sitios de difícil la pared intestinal u otros sitios de difícil
acceso incluso por biopsia.acceso incluso por biopsia.

13. Los métodos indirectosLos métodos indirectos
hacen evidente la respuesta inmune hacen evidente la respuesta inmune
especialmente humoral del hospedero ante especialmente humoral del hospedero ante
antígenos parasitarios. La mayor parte antígenos parasitarios. La mayor parte
permite identificar anticuerpos, pero permite identificar anticuerpos, pero
también existen pruebas para encontrar también existen pruebas para encontrar
células sensibilizadas, complejos antígeno células sensibilizadas, complejos antígeno
anticuerpo llamados complejos inmunes y anticuerpo llamados complejos inmunes y
células efectoras de la respuesta inmune células efectoras de la respuesta inmune
como reacciones del complemento y como reacciones del complemento y
citocinas.citocinas.

14. La mayoría de las pruebas serológicas están basadas La mayoría de las pruebas serológicas están basadas
en la detección de la respuesta específica de en la detección de la respuesta específica de
anticuerpos ante la presencia del parásito. anticuerpos ante la presencia del parásito.
Estas incluyen aglutinación clásica, fijación de Estas incluyen aglutinación clásica, fijación de
complemento, métodos de difusión en gel, complemento, métodos de difusión en gel,
inmunofluorescencia, Western Blotinmunofluorescencia, Western Blot
ELISA (coproantígenos)ELISA (coproantígenos)
Se utilizan para Se utilizan para E. Histolytica, Trypanosoma E. Histolytica, Trypanosoma
cruzi. Plasmodium etc.cruzi. Plasmodium etc.

15. ELISA:ELISA:

16. Métodos molecularesMétodos moleculares
el diagnóstico de enfermedades parasitarias ha el diagnóstico de enfermedades parasitarias ha
logrado un avance significativo gracias a la logrado un avance significativo gracias a la
aplicación de métodos de diagnóstico molecular aplicación de métodos de diagnóstico molecular
basados en la hibridación del acido nucleíco. Estos basados en la hibridación del acido nucleíco. Estos
estudios son factibles ya que todos los organismos estudios son factibles ya que todos los organismos
contienen secuencias de acido nucleíco que contienen secuencias de acido nucleíco que
pueden ser usados en estudios de hibridación que pueden ser usados en estudios de hibridación que
ayudan a determinar cepas, especies y género. ayudan a determinar cepas, especies y género.
Pueden detectarse simultáneamente varios Pueden detectarse simultáneamente varios
parásitos dependiendo de la especificidad del acido parásitos dependiendo de la especificidad del acido
nucleíco utilizado.nucleíco utilizado.

17. Métodos molecularesMétodos moleculares
Son utilizados por laboratorios de Son utilizados por laboratorios de
referencia para los parásitos de referencia para los parásitos de
interés prioritario,centrándose en el interés prioritario,centrándose en el
análisis de dos tipos de moléculas:análisis de dos tipos de moléculas:
Proteínas y ácidos nucleicos (ADN Y Proteínas y ácidos nucleicos (ADN Y
ARNm)ARNm)
Entre ellas estan: PCR,southern blotEntre ellas estan: PCR,southern blot

18. PCR:PCR:

19. Southern blot:Southern blot: