Diluciones Únicas y Seriadas ejemplos.pptx

Diluciones

1. Diluciones . Hemaglutinación

2. Diluciones

3. Diluci ón Fundamento: Reducir la concentración de un principio activo o soluto Cantidades pequeñas o difíciles de medir

4. Diluciones Relación entre las partes sin importar el volumen . Dilución 1:3 1 parte de soluto 1 litro mL 2 partes de diluyente 2 litros mL .......................................………………………………… …… . 3 partes totales 3 litros 24 mL

5. Dilución Única Puede ser medid a por métodos convencionales. Ejemplo: dilución 1:8 de hipoclorito de sodio en agua, en un volumen de 4 litros . 1 parte de soluto = L de NaClO 7 partes de diluyente = L de H 2 O 8 partes totales = 4.0 L de solución

6. Dilución Seriada Características: Se emplea una serie de tubos El volumen de transferencia es el mismo El volumen final es el mismo En todos los tubos se emplea el mismo factor de dilución

7. Dilución Seriada # Tubo Dilución Lograda Volumen Soluto   Volumen Diluyente Volumen de Transferencia Volumen Final Factor de Dilución   Observaciones       ¡Trabajar ordenadamente!

8. Dilución Seriada Ejemplo: hacer una dilución cuádruple seriada, en cuatro tubos con volumen final de 1.5 mL , iniciando por 1:5 . # Tubo Dilución Lograda Volumen Soluto Volumen Diluyente Volumen de Transferencia Volumen Final Factor de Dilución Observaciones 1) Llenar el cuadro con la info que tenemos

9. 1 2 3 4 1:5 Factor de dilución x4

10. # Tubo Dilución Lograda Volumen Soluto Volumen Diluyente Volumen de Transferencia Volumen Final Factor de Dilución Observaciones Dilución Seriada 2) Multiplicar la dilución inicial x Factor de dilución

11. 1 2 3 4 1:5 1:20 1:80 1:320

12. 3) Calcular volumen de transferencia (a partir del factor de dilución) X4: 1 parte es el volumen de transferencia 3 partes es el volumen final Diluyente # Tubo Dilución Lograda Volumen Soluto Volumen Diluyente Volumen de Transferencia Volumen Final Factor de Dilución Observaciones

13. 4) Calcular volumen SOLUTO y DILUYENTE (de la primera dilución 1:5 en 2mL ) Dilución única 1 parte (soluto) 4 partes (diluyente) ……………………………… 5 partes totales # Tubo Dilución Lograda Volumen Soluto Volumen Diluyente Volumen de Transferencia Volumen Final Factor de Dilución Observaciones

14. 1 2 3 4 1:5 1:20 1:80 1:320 TUBO DILUCIÓN VOLUMEN SOLUTO VOLUMEN DILUYENTE 0.4 mL 1.6 mL 1.5 mL 1.5 mL 1.5 mL 0.5 mL

15. Resultado final # Tubo 1 2 3 4 Dilución Lograda 1:5 1:20 1:80 1:320 Volumen Soluto 0.4mL   Volumen Diluyente 1.6mL 1.5mL 1.5mL 1.5mL Volumen de Transferencia 0.5mL 0.5mL 0.5mL 0.5mL Volumen Final 1.5mL 1.5mL 1.5mL 1.5mL Factor de Dilución x4 x4 x4 x4   Observaciones 1p= 0.5mL 1p= 0.4mL 3p= 1.5mL 4p= 1.6mL 4p= 2.0mL 5p= 2.0mL

16. 1 2 3 4 1:5 1:20 1:80 1:320 TUBO DILUCIÓN VOLUMEN SOLUTO VOLUMEN DILUYENTE 0.4 mL 1.6 mL 1.5 mL 1.5 mL 1.5 mL 0.5 mL 0.5 mL 0.5 mL 0.5 mL

17. Hemaglutinación

18. Hemaglutinación Fundamento: Las proteínas hemaglutinantes del virus se unen a los receptores de superficie de los eritrocitos . Los eritrocitos se conglomeran en grumos.

19. Hemaglutinación Interpretación: Positivo: eritrocitos uniformemente aglutinados cubriendo el tubo. Negativo: formación de sedimento compacto “en forma de botón”.

20. Hemaglutinación Interpretación: Punto final : la más alta dilución en la que se observa una reacción positiva. Unidad hemaglutinante : mínima cantidad de virus que se requiere para aglutinar el 100% de los eritrocitos. Título : Unidades hemaglutinantes contenidas en la muestra original de virus sin diluir. Inverso del punto final.

21. Título = 80 UHA con eritrocitos de pollo lavados y concentrados al 3%. 1:5 1:10 1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 Punto Final

22. Inhibición de la Hemaglutinación

23. Inhibición de la Hemaglutinación (IHA) Fundamento: Unión de anticuerpos a la hemaglutinina del virus, resultando en la inhibición de la hemaglutinación . Virus previamente titulado. A simple vista en un tubo de ensayo.

24. IHA Interpretación: Punto final : la más alta dilución en la que se observa una reacción positiva (inhibición). Título : Unidades inhibidoras de hemaglutinación (UIHA). Inverso del punto final del suero multiplicado por el número de UHA del virus usado .

25. IHA Punto Final Suero 1/5 1/10 1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 Título = 640 UIHA con eritrocitos de pollo lavados y concentrados al 1%. 8 UHA

26. Práctica Diluciones seriadas Trabajo PERSONAL . Entregar los dos ejercicios resueltos a mano. Debe incluir procedimiento. Debe tener su nombre.

27. Dilución Seriada Ejercicio 1 : en 4 tubos hacer una dilución triple seriada del virus “ X ” , partiendo de una dilución inicial 1: 4 de eritrocitos de pato al 50% , con un volumen final de 8 mL. # Tubo 1 2 3 4 Dilución Lograda Volumen Soluto Volumen Diluyente Volumen de Transferencia Volumen Final Factor de Dilución Observaciones

28. Dilución Seriada Ejercicio 2 : en 5 tubos hacer una dilución doble seriada del virus “ X ” (agua con colorante) partiendo de una dilución inicial 1:3 de solución “Y” (agua sin colorante) , con un volumen final de 100 mL . # Tubo 1 2 3 4 5 Dilución Lograda Volumen Soluto Volumen Diluyente Volumen de Transferencia Volumen Final Factor de Dilución Observaciones

29. Material para la próxima Práctica 5 00 mL (aproximadamente) de colorante natural a base de col Preparación : En una tabla de cocina picar en trozos pequeños ¼ de col morada. Colocar la col picada en una olla y verter 500-600 mL de agua y hervir durante 10-15 minutos. Esperar a que enfríe (a temperatura ambiente) y colar el líquido. * La col sigue siendo comestible, no la desperdicies. Guardar el líquido en el refrigerador hasta su utilización el día de la práctica .