Elisa de captura

ELISA de captura

1. ELISA de Captura

2. Es una técnica de inmunoensayo en la cual un antígeno o anticuerpo inmovilizado se detecta mediante un anticuerpo enlazado a una enzima que reaccionando con un conjugado, es capaz de generar un producto detectable, como cambio de color o algún otro tipo. ELISA es generalmente una medición objetiva que proporciona resultados numéricos que proporcionan información de diagnóstico y estado inmune medida (por ejemplo, la detección de anticuerpos IgM total o IgG ). El método ELISA utiliza las propiedades catalíticas de enzimas para detectar y cuantificar reacciones inmunológicas. Se utiliza un anticuerpo marcado con una enzima o conjugado antígeno marcado con enzima. La enzima, con su sustrato, detecta la presencia y la cantidad de antígeno o anticuerpo en una muestra del paciente. Los resultados de una prueba típica se calculan comparando la lectura espectrofotométrica de suero del paciente al de un control o suero de referencia. ELISA

3. Este método utiliza una etiqueta no isotópico que ofrece la ventaja de seguridad. Prueba de enzimas es que los resultados no son dependientes de un técnico de interpretaciones. E l procedimiento es más rápido Requiere menos trabajo de laboratorio que los métodos comparables. Pueden detectar sustancias en orden de nanogramos y picogramos por decilitro. Ventajas

4. Marcadores enzimáticos más comunes son: la peroxidasa de rábano picante, la fosfatasa alcalina, la glucosa-6-fosfato deshidrogenasa, y beta- galactosidasa . Una enzima de ELISA debe cumplir los siguientes criterios: • Alto grado de estabilidad • Extrema especificidad • Ausencia de antígeno o anticuerpo • Ninguna alteración por el inhibidor en el sistema

5. Es un ELISA heterogéneo no competitivo que está diseñado para detectar un tipo específico de anticuerpo, tal como IgM o IgG , IgM CMV, la rubéola IgM , o Toxoplasma IgM . Esta técnica es ampliamente utilizada para cuantificar IgM , para evitar la acción del factor reumatoide. El factor reumatoide es un autoanticuerpo generalmente IgM específica para IgG . Este factor es elevado en algunas situaciones, particularmente en las enfermedades reumáticas. Este anticuerpo se puede unir la IgG específica (en contra de la prueba de antígeno), presente en el suero del paciente, generando así un resultado positivo falso si utilizar un conjugado anti- IgM . ELISA de captura

6. Anticuerpos específicos para IgM o IgG está unido a una superficie de fase sólida (perla de plástico, placa de microtitulación ). La muestra del paciente que contiene potencialmente IgM o se añade IgG . *lavado Se añade el antígeno específico. *lavado Se añade anticuerpo marcado con enzima. *lavado Finalmente, se añade el sustrato cromogénico , que cambia de color en presencia de la enzima.   *Se lava para evitar que la sustancia que sobra no intervenga en las reacciones. * La cantidad de color que se desarrolla es proporcional a la cantidad de antígeno específico de IgM o IgG en el suero del paciente. Técnica

7. • Borrelia burgdorferi ( IgG & IgM ) Citomegalovirus ( IgG & IgM ) Hepatitis A virus ( Ig total) Hepatitis B virus (HBV)Anti- HBs Anti- HBc Anti- HBe Anti- HBc ( IgM ) Hepatitis delta virus(total Ab) HIV Ac Determinaciones de ELISA HTLV-I(h uman T- lymphotropic virus )Ac HTLV-II AC Human B- lymphotropic virus Ab Rubeola virus ( IgG and IgM ) Toxoplasma gondii ( Ig y IgM ) Plasmodium falciparum Trypanosoma cruzi Toxoplasma Gondii Entamoeba histolytica

8. Valores alterados o positivos del Factor Reumatoide (IGM) en: - Artritis Reumatoide   Dermatomiositis   Escleroderma Hepatitis crónica Infección viral crónica   Mononucleosis infecciosa Leucemia -   Lupus Eritematoso Sistémico  (LES )   Síndrome de Sjogren Síndrome Nefrótico Tuberculosis