Microorganismos Gram Negativos. Bacilos… Bacilos Gram Negativos Aerobios o Facultativos Familia Vibrionaceae Familia Enterobacteriaceae Familia Aeromonaceae Familia Campylobacteriaceae Familia Helicobacteriaceae Familia Pseudomonaceae Familia Pasteurellaceae
Familia Enterobacteriaceae… Género Escherichia Género Klebsiella Género Salmonella Género Shigella Género Citrobacter Género Enterobacter Género Morganella Género Proteus Género Serratia Género Yersinia Es el grupo más grande y heterogéneo de bacilos Gram negativos con importancia clínica… Estos géneros se han clasificado según sus propiedades bioquímicas (baterías bioquímicas), estructura antigénica (serotipificación) e hibridación y secuenciación de su material genético… A pesar de la complejidad de la familia menos de 20 especies son responsables de más del 95% de las infecciones…
Familia Enterobacteriaceae…
Caracteristicas Generales 40 Géneros 150 Especies 20 Especies responsables de patologia humana Distribuidas en suelo, agua y alimentos Flora Normal del Intestino de humanos y animales
Caracteristicas de Familia Se definen como bacilos Gram negativos fermentadores de glucosa, oxidasa negativa que reducen los nitratos a nitritos.
Caracteristicas Generales Algunos miembros, Salmonella, Shigella , Yersinia pestis , se asocian con patología, a diferencia de E. coli , Klepsiella pneumoniae , Proteus mirabilis son comensales. Son responsables del 30 al 35% de todas las septicemias, mas del 70% de las infecciones urinarias y muchas infecciones intestinales.
Caracteristicas Generales Descripción: Bacilos Gram negativos de 0.3-1.0 x 1.0-6.0 µ m. Usualmente móviles con flagelos peritricos No formadores de esporas Anaerobios facultativos Crecimiento a los en 18-24 horas de incubación en una gran variedad de medios selectivos Requerimientos nutricionales simples
Enterobacteriaceae Clasificación serológica: Antígeno O Antígeno capsular K: proteínas o polisacáridos, termolábil, pueden interferir con la detección de antígeno O. En Salmonella se conoce como Ag Vi Proteínas flagelares H, termolábiles, presentan variaciones antigénicas y presentarse en fases. E. coli O18: K1:H7
Pared celular Gram negativa
PARED CELULAR La bicapa es altamente asimétrica : E n la capa externa existe un 60% de proteínas y un 40% de una macromolécula exclusiva de esta membrana externa: el lipopolisacárido (LPS) ; E n la capa interna no hay LPS, existiendo fosfolípidos (FL), lipoproteínas (LPP) y otras proteínas. El conjunto es un mosaico fluido que permite el desplazamiento lateral de los fosfolípidos , del LPS, y de las proteínas, pero no de las lipoproteínas unidas covalentemente al peptidoglucano . Sin embargo, esta fluidez es menor que la de la membrana citoplásmica .
LIPOPOLISACARIDO
LPS Se le conoce también con el nombre de endotoxina (toxina termoestable, no difusible). Se trata de un glucolípido complejo, que podemos considerar compuesto de tres regiones o dominios: lípido A , que es la porción más proximal, y de carácter hidrofóbico ; región intermedia, llamada oligosacárido medular ; región distal ( cadena lateral específica , polisacarídica ) a base de repeticiones de unos pocos azúcares. Es de carácter hidrofílico y constituye el antígeno somático O de las 6bacterias Gram -negativas.
LPS / LIPIDO A El lípido A : esta región es prácticamente idéntica en todas las bacterias Gram -negativas. La región anclada a la membrana es hidrofobica .. Consiste de un dimero fosforilado de N- acetylglucosamina (NAG) con 6 a 7 ácidos grasos los cuales son saturados.
Lps: Core Region II. Core (R) antígeno o R polisacárido: Unido a la posición 6 de una NAG El antígeno R consiste de una cadena corta de azucares, e.g. : KDO - Hep - Hep - Glu - Gal - Glu - GluNAc – Dos azucares inusuales estan presentes: heptosa y 2-ceto-3deoxioctonico (KDO), el cual es único e invariable. El core es común en todos los miembros del genero pero estructuralmente difiere de otros géneros Gram negativos
Antigeno O Consiste de subunidades de oligosacarido de 3-5 azucares. Las cadenas individuales varian en longitud hasta de 40 unidades repetitivas. 20 azucares muchos de ellos dideoxihexosas Cambios en la morfología colonial
Virulencia del Ag O Colonias lisas:permite al organismo la adherencia a ciertos tejidos especialmente a tejido epitelial. Resistencia a fagocitosis El polisacarido O hidrofilico provee protección de daño por los Ac y complemento.
Antigeno O La perdida del Ag O resulta en perdida de virulencia La perdida proximal de core proximal forma colonias Rugosas profundas permitiendo la susceptibilidad de la bacteria a antibióticos, detergentes, sales biliares.
Antigeno O La perdida del Ag O resulta en perdida de virulencia La perdida proximal de core proximal forma colonias Rugosas profundas permitiendo la susceptibilidad de la bacteria a antibióticos, detergentes, sales biliares.
1.- Lysis of Gram-negative bacteria causes release lipopolysaccharide (LPS; endotoxin) from the outer membrane of their cell wall. 2.-The LPS binds to a LPS-binding protein circulating in the blood and this complex, 3.- It binds to a receptor molecule (CD14) found on the surface of body defense cells, macrophages. 4.- This is thought to promote the ability of the toll-like receptor TLR-4 to respond to the LPS, triggering the macrophage to release various defense regulatory chemicals called cytokines, including IL-1, IL-6, IL-8, TNF-alpha, and PAF. The cytokines then bind to cytokine receptors on target cells and initiate inflammation and activate both the complement pathways and the coagulation pathway. (LPS, lipopolysaccharide; IL-1, interleukin-1; IL-6, interleukin-6; IL-8, interleukin-8, TNF-alpha, tumor necrosis factor-alpha; PAF, platelet-activating factor.)
La interleucina-1 (IL-1) y factor de necrosis tumoral-alfa (TNF-alfa): mejorar la respuesta inflamatoria; Interleucina-8 (IL-8): ayuda en la capacidad de las células blancas de la sangre a salir de los vasos sanguíneos y entrar en el tejido, un quimio atrayentes para los fagocitos, La interleucina-6 (IL-6) promueve la actividad de los linfocitos B y D. La interleucina-12 (IL-12): promueve la actividad de los linfocitos T. TLR: Tool Like Receptor
Vias de Fermentacion de Glucosa Acidos mixtos Acido formico, acido acético acido succiono y otros 2-3 Butanodiol: Butanediol y etanol como producto, produce baja concentración de acido.
METABOLISMO Utilizacion de la Glucosa Via butilenglicol Klebsiella , Enterobacter y Serratia Fermentación de ácidos mixtos. E.coli , Proteus , Salmonella, Shigella
Invasinas Pili o fimbrias Habilidad para entrar y sobrevivir dentro del huesped Invaden o dañan las celulas del huesped
Capsula Defiende al microorganismo de la fagocitosis Toxinas Enterotoxinas Toxinas shiga hemolisinas
Diagnostico Uso de medios diferenciales / Selectivos Bioquímica Serología Antibiograma