ESTRUCTURA BACTERIANA Y TINCION DE GRAM.pptx

- Importancia de la membrana celular de las células procariotas
- Diferenciación de la cantidad de peptidoglucano que tiene la bacteria gram positiva y la bacteria Gram negativa.
- Métodos sencillos de tinción de la pared celular

1. Morfología y estructura bacteriana. ¿Qué es una bacteria?

2. ¿Qué es una bacteria? Microorganismos procariotas. No tienen un núcleo definido. En general, no presentan, orgánulos membranosos internos.

3. ¿De que se constituye una bacteria? Estructura Bacteriana.

4. Envuelta celular. Membrana citoplasmática. Pared celular. Cápsula.

5. Membrana citoplasmática.

6. Pared celular. Gram positivos. Gram negativos.

7. Estructuras externas. Flagelos. Pili.

8. Flagelo. Es un apéndice móvil con forma de látigo. Proporcionan capacidad de movimiento independiente. Por lo general se encuentran en bacilos Gram negativos. Miden menos de 20 nm de diámetro.

9. Pili. Son vellosidades. Les permite la fijación a ciertas superficies: como a las células a la que infectan, al igual para la transferencia de ADN. Un Pili suele tener unos 3-25 nm de diámetro y de 10-20 nm de longitud.

10. Estructuras internas. Nucleoide. Citoplasma.

11. Nucleoide. Nucleoide es el nombre que recibe la estructura en la que se compacta el DNA procariota. Contiene el ADN en el citoplasma. El Nucleoide está compuesto fundamentalmente por ADN (60%), con pequeñas proporciones de ARN y proteínas.

12. Estructura Bacteriana

13. Citoplasma. Esta limitado por la membrana citoplasmática, y en el se encuentran las inclusiones celulares. Esta atravesado por numerosas membranas que lo compartimentarían. Esta compuesto de agua, enzimas, sustancias nutritivas, desechos, y gases, contiene estructuras celulares como ribosomas, cromosoma y plásmidos.

14. La espora. Es una estructura compleja que se forma dentro de la célula para asegurar la supervivencia de la especie ante condiciones ambientales desfavorables. La formación de esporas es inherente a algunos tipos de bacilos. Las esporas pueden observarse en el interior de las bacterias o libremente después de la desintegración de las células progenitoras.

15. ¿ Cuantas formas puede tener una bacteria? Morfología de las bacterias.

16. Tamaño de las bacterias. μm: El micrómetro o micra es una unidad de longitud equivalente a una millonésima parte de un metro. Bacillus anthracis: Es uno de los bacilos más grandes, 1 x 10 μm Francisella tularensis: Bacterias con menor tamaño 0,2 x 0,7 μm Células individuales observables sólo al microscopio. Colonias bacterianas apreciables a simple vista.

17. Formas de las bacterias. Cocos. Bacilos. Espirilos.

18. Características de las colonias: Cuando tienes un cultivo en agar siempre es relevante anotar la morfología colonial de la cepa bacteriana para facilitar la identificación. Generalmente se reporta la morfología colonial tal como uno la percibe. También puedes agregar características que consideres importante para identificarlas, por ejemplo el olor.

19. Bordes, superficie y consistencia.

20. Pigmentación, hemólisis y olor. Pigmentación: Es característica de pocas especies bacterianas, se observa en colonias y células individuales. Hay que tener cuidado y no confundir la pigmentación, hay que usar indicadores especiales.

21. Hemólisis. Algunas bacterias especialmente los cocos, son capaces de hemolizar los hematíes de la sangre, se debe a que se libera una sustancia llamada hemolisina. La producción de hemosis sirve para identificar estreptococos.

22. Olor. Algunas bacterias se descomponen su metabolismo, liberando un olor característico de esa bacteria. Es posible saber qué tipo de bacteria es solo cuando están en colonias, se distinguen fácil en cultivos mixtos o contaminados.

23. Uso de las tinciones en microbiología

24. Tinción de Gram Descubierta por Hans Christian Gram. Usada con frecuencia para examen microscópico directo de muestras y subcultivos .

25. Técnica de tinción de Gram Realizar frotis delgado del material a estudiar y dejar secar al Fijar el material en el portaobjeto pasándolo 3 ó 4 veces a través de la llama de un mechero Bunsen. Colocar el frotis sobre un soporte para tinción y cubrir la superficie con solución de cristal violeta por el lapso de 1 min. Lavar con agua destilada o buffer. Cubrir el frotis con solución de yodo , durante 1 min. Lavar nuevamente con agua. Cubrir la placa con decolorante de alcohol acetona hasta que no desprenda mas el color violeta, (30 seg .). Lavar con agua corriente. Cubrir la placa con safranina durante 1 min. Lavar con agua corriente y colocar la placa en una posición que drene el exceso de agua y el frotis seque. Observar el frotis con 1 gota de aceite de inmersión con objetivo x 100.

26. Procedimiento Técnico

27. Resultados de la coloración

28. Escherichia coli Bacterias gram negativas Lactobacillus acidophilus Bacterias gram positiva

29. Las micobacterias están recubiertas por un grueso material céreo que resiste la tinción, sin embargo una vez teñidas las células bacterianas resisten la decoloración con solventes orgánicos fuertes como alcohol ácido. Por ese motivo, estas bacterias se conocen como acidoalcohol resistentes, fenómeno descubierto por Ziehl y Neelsen en 1882. Tinción para Microorganismos Acido-alcohol resistentes

30. Técnica de tinción de Ziehl - Neelsen Realizar frotis delgado del material a estudiar, dejar secar al aire. Fijar el material en el portaobjeto pasándolo 3 ó 4 veces a través de la llama de un mechero Bunsen. Colocar el frotis sobre un soporte para tinción y cubrir la superficie con solución fucsina fenicada por 3 min. Mientras se calienta la placa de la siguiente manera: Pasar la llama por debajo de la placa, hasta la emisión de vapores, dejar enfriar. Repetir esta operación tres veces. Lavar la placa con abundante agua corriente para eliminar el exceso de colorante.

31. Decolorar con la solución de alcohol ácido hasta que el extendido no elimine mas colorante, 30 seg . Lavar la placa con agua. Cubrir la placa con azul de metileno por el lapso de 1 min. Lavar con agua el exceso de colorante. Dejar secar la preparación y examinar al microscopio aplicando una gota de aceite de inmersión X100. Técnica de tinción de Ziehl - Neelsen

32. Resultados de la tinción