Hematimetria 3

1. HEMATIMETRIA: ESTUDIO DE LA
SANGRE PERIFERICA
CRISTINA CARRILLO RAMIREZ
MEDICO RESIDENTE DE PATOLOGIA CLINICA
HOSPITAL NACIONAL “LUIS N SAENZ” PNP

2. HEMATIMETRIA
El estudio de la sangre periférica es de suma importancia
en el diagnóstico y tratamiento de las
enfermedades hematológicas (y no
hematológicas).
Tejido más fácilmente accesible.

3. HEMATIMETRIA
Estudio cuantitativo (propiamente dicho).
Estudio cualitativo.
Permite:
Diagnóstico de enfermedades específicas.
Da perspectivas en la fisiopatología de determinado proceso.
Medición de respuesta al tratamiento.

4. ¿Para qué?
¿Está produciendo la MO suficiente cantidad de
células maduras para todas las estirpes celulares?
¿El desarrollo de cada una de las series es
cualitativamente normal?
Las medidas cuantitativas obtenidas por los
contadores automáticos son bastante fiables y
permiten de una manera eficiente identificar alteraciones
groseras en la hematopoyesis.

5. Sin embargo…
El estudio morfológico es esencial para
confirmar ciertos hallazgos cuantitativos y
cualitativos, e investigar cualitativamente las
posibles diferenciaciones anormales de las estirpes
celulares.
 “Guiado en el estudio morfológico, el médico puede
concentrarse más en la médula ósea o en las enfermedades
sistémicas que de forma secundaria afectan al sistema
hematopoyético”

6. AUTOMATIZACION EN EL LABORATORIO
DE HEMATOLOGIA
Analizadores automáticos en Hematologia: 1950
“Principio de la electroconductividad” Wallace Coulter
Surge por la necesidad de dar solución al número cada
vez mayor de solicitudes recibidas y al
aumento del número de sustancias a
determinar, así como por la necesidad de
controlar mejor todos los pasos y
manipulaciones realizadas de forma manual y para
que los resultados sean emitidos con mayor
objetividad y fiabilidad

7. EVOLUCION DIAGNOSTICA
Primera Generación:
C.H. MANUAL (CAMARA
NEUBAUER)
Segunda Generación:
C.H. SEMIAUTOMATICO
Tercera Generación:
C.H. AUTOMATIZADO,
HISTOGRAMA ( GR,GB,PLT )
RECUENTO % GB
Cuarta Generación:
C.H. AUTOMATIZADO,
PERFORACION TAPA,
HISTOGRAMA ( GR, PLT )
DISPERSOGRAMA ( GB ) EN
5 PARTES

8. MEDIDAS CUANTITATIVAS DE LOS ELEMENTOS
HEMATOPOYÉTICOS DE LA SANGRE
(HEMATIMETRIA)
CONTADOR AUTOMÁTICO TÍPICO:
Sangre aspirada es dividida en dos:
Una es lisada y diluida para permitir medir la
concentración de hemoglobina y el recuento de
leucocitos (RDL);
La otra es diluida, pero sin lisis, para el recuento y medida de
las células rojas y las plaquetas (también reticulocitos).

9. Componentes de los autoanalizadores
Sistema de aspiración y dilución de la
muestra: cantidad precisa y dilución en solución
isotónica con capacidad conductora
Sistema de bombeo y distribución de las
muestras y reactivos: fraccionamiento, distribución,
mezcla y conducción a dispositivos de medida

10. Componentes de los autoanalizadores
Dispositivos de medida: parte fundamental.
Diferentes métodos: conductividad eléctrica, dispersión
de luz laser o campo oscuro, colorimétricos,
espectrofotométricos, reacciones citoquímicas, tinciones,
centrifugado, reconocimiento morfológico, etc.  EL
DISPOSITIVO DE MEDIDA DEPENDE DEL TIPO
DE PARAMETRO ANALIZADO Y SU DISEÑO A
SU VEZ DEPENDE DEL MODELO DE
AUTOANALIZADOR

11. Componentes de los autoanalizadores
Sistema de transducción y discriminación de
datos: Interpretación. Transforma señales en impulsos
eléctricos clasificados
Lector y registrado de datos: Procesamiento de
datos por sistemas de transducción (procesador
informático, pantalla, impresión)

12. Sistema de conductividad eléctrica
(resistencia, impedancia eléctrica)
“El número de señales
eléctricas generadas indica el
numero de células, y la
amplitud de la señal eléctrica
es directamente proporcional
al tamaño o volumen de las
células”

13. Método de dispersión de luz: rayo de luz
LASER
“El grado de interferencia es
directamente proporcional al
tamaño de la célula, y el número
de interferencias indica el número
de células presentes en la
muestra”

14. Método de dispersión de luz: campo oscuro
(luz halógena)
“El número de señales luminosas
indica el número de células
presentes en la muestra, y la
intensidad de las dispersiones o
desviaciones de los rayos luminosos
es directamente proporcional al
tamaño de las células”

15. Recuento de eritrocitos
Recién nacido
De 4 a 5 millones/ml
A los 3 meses
De 3,2 a 4,8 millones/ml
Con 1 año
De 3,6 a 5 millones/ml
Entre los 3 y 5 años
De 4 a 5,3 millones/ml
Entre 5 y 15 años
De 4,2 a 5,2 millones/ml
Hombre adulto
De 4,5 a 5 millones/ml
Mujer adulta
De 4,2 a 5,2 millones/ml

16. Parámetros normales de las células
sanguíneas
N° de hematíes:          
Hombre: 4,5 - 6,2 millones / mm3
Mujer: 4,2 - 5,4 millones / mm3
Hemoglobina:              
Hombre: 14 - 18 gr. /dl
Mujer: 12- 16 gr. /dl
Hematocrito               
Hombre: 42 - 52 %
Mujer: 37 -48 %

17. Parámetros normales de las células
sanguíneas
VCM                         
Hombre: 80-94 fL
Mujer: 81 -99 fL
HCM                         
27-3l pg
CHCM                                  
33-37gr. /dl
IDH (RDW) INDICE DE ANISOCITOSIS      
11,5 - 14,5

18. Parámetros normales de las células
sanguíneas
N° leucocitos           4 - 10,5 x 103 /mL
Neutrófilos 30-70 %       1,3 - 7,4 x 103 mL
Linfocitos        20-50 %       0,9-5,2 x 103 / mL
Monocitos      2- 10%         0,16- 1,00 x 103 / mL
Eosinófilos      1- 5 %             0,00-0,20 x l03 / mL
Basófilos         0,0- 1,5 %    0,00-0,20 x 103 / mL

19. Parámetros normales de las células
sanguíneas
N° plaquetas            130 - 400 x l03 / Ml

20. CELULAS ROJAS
 Medición directa:
•Recuento de eritrocitos
•VCM
•Hemoglobina
Todos los parámetros de la serie roja son extraídos de
estos (ej. Hto).
Método: IMPEDANCIA ELÉCTRICA (sangre diluida por
solución electrolítica, pase a través de orificio con
impedancia cuantificable, salto de impedancia por bicapa
lipídica, impedancia es proporcional al tamaño).

21. Hematocrito
Hto = Hematíes x VCM/10
VCM falsamente elevados y recuento de hematíes
disminuido cuando existen anticuerpos frente a hematíes
y mantienen su capacidad de unión a temperatura
ambiente (ej. Aglutininas frías)  agregación de hematíes.
Antes: Hto medido directamente (centrífuga), pero este
microhematocrito incluye plasma atrapado entre
hematíes (2-3%).

22. Hematocrito
Otros factores de error:
Eritrocitos anormales (anemia falciforme, talasemias,
ferropenia, esferocitosis): atrapamiento de plasma por la
rigidez del hematíe.
Sangre completamente oxigenada tiene Hto 2% menor que la
totalmente desoxigenada.
Policitemia (Hto>55%): mayor plasma atrapado.
 Hto obtenido por centrifugación puede estar
artefactualmente elevado (hasta 6%), por lo que se
prefiere la medición directa de la hemoglobina.

23. HEMOGLOBINA
Hb intensamente captada
Hematies contienen una mezcla de:
Hemoglobina,
Oxihemoglobina,
Carboxihemoglobina,
Metahemoglobina, etc.
Células son lisadas y las variantes de Hb son convertidas a un
compuesto estable de cianohemoglobina para la cuantificación
por absorción a 540 nm (menos la sulfhemoglobina).
Mayor fuente de interferencia: Quilomicronemia.

24. INDICES ERITROCITARIOS
VCM (principal).
Principio de Coulter: “el área transversal de una
partícula no conductiva, sumergida en una solución
electrolítica, es directamente proporcional al
aumento de impedancia eléctrica provocado por la
partícula cuando pasa por un orificio estrecho”.
VCM: diagnóstico diferencial de anemias.
HCM, CHCM: menor valor clínico, pero si importancia, como
aviso de potenciales interferencias en la medida del VCM y
recuento de hematíes.

25. INDICES ERITROCITARIOS
VCM, HC, CHCM: obtenidas como medias y pueden no
detectar anomalías en poblaciones mixtas de hematíes (ej.
Anemias sideroblásticas, transfundidos, etc).
ADE/IDH/RDW: (Amplitud de Distribución Eritrocitaria):
específicamente diseñado para reflejar las variaciones de
tamaño de los hematíes  Amplitud de la curva de
distribución del volumen de los hematíes.
 ADE puede emplearse como indicador que permita
seleccionar que muestras, de las remitidas para estudio
automatizado, deberían ser revisados manualmente para el
estudio de la morfología.

26. LEUCOCITOS
Muestras de sangre diluidas con solución que lisa los
hematíes (ácido o detergente) pero preserva la integridad
leucocitaria.
Los recuentos manuales están sujetos a más variabilidad
técnica que los automatizados, debido a factores
estadísticos o técnicos.
Recuentos leucocitarios falsamente elevados:
por crioglobulinas, criofibrinógeno, plaquetas agregadas o
fibrina, agregación plaquetaria inducida por EDTA,
hematíes nucleados o hematíes no lisados.

27. Recuento diferencial leucocitario (RDL)
Parámetros para identificar y enumerar los 3, y luego 5,
tipos morfológicos principales en sangre periférica (x
dispersión de luz desde diferentes ángulos o ola
conductividad eléctrica).

28. PLAQUETAS
Son enumeradas electrónicamente al contar partículas de una
muestra, no lisada, de una ventana a un volumen especificado
(2-20fl).
Mayor dificultad de automatizar por pequeño tamaño,
tendencia de agregarse y potencial solapamiento con las células
rojas más numerosas.
Sin embargo, el conteo plaquetario, con los métodos
automáticos actuales, es fiable y preciso, incluso en el rango
trombocitopénico.
Pueden estar falsamente disminuidos si la muestra no esta
completamente anticoagulada (presencia de coágulos o fibrina).

29. PLAQUETAS
Posibles interferencias:
Fragmentación celular intensa,
Microcitosis,
“Satelitismo plaquetario”.

30. EXAMEN MORFOLOGICO DE LA SANGRE
PERIFERICA
El examen microscópico de la extensión de sangre periférica
sobre un portaobjetos ofrece información muy valiosa sobre
todos los elementos formes de la sangre.
Considerar daño mecánico de las células.
Secado, fijación y tinción suponen exposición al agua y
metanol.
Evaluación de diferentes zonas del frotis.
Área óptima de estudio es examinada con 40-100x.

31. IMPORTANCIA DEL FROTIS DE SANGRE
PERIFERICA
ENFERMEDAD HALLAZGOS FROTIS SP
ANEMIA HEMOLITICA ADQUIRIDA
COMPENSADA
ESFEROCITOS, POLICROMATOFILIA,
AGLUTINACIÓN ERITTROCITARIA (INMUNE)
ESFEROCITOSIS HEREDITARIA ESFEROCITOS, POLICROMATOFILIA
HEMOGLOBINA C/TALASEMIAS CELULAS DIANA
ELIPTOCITOSIS ELIPTOCITOS
INTOXICACIÓN POR PLOMO PUNTEADO BASÓFILO (NO ESP)
MIELOMA MULTIPLE, MACROGLOBULINEMIA ROULEAUX
MALARIA, BABESIOSIS PARASITOS EN HEMATIES
COAGULOPATIA DE CONSUMO ESQUISTOCITOS (NO ESP)
HEMOLISIS MECANICA ESQUISTOCITOS
INFECCION SEVERA NEUTROFILIA CON NEUTROFILOS INMADUROS,
CUERPOS DE DOHLE, VACUOLAS EN
NEUTROFILOS
MONONUCLEOSIS INFECCIOSA LINFOCITOS ATÍPICOS
LEUCEMIA AGUDA (RECAIDA TEMPRANA) BLASTOS

36. CBC TRANFUSION

39. ANALIZADOR DE HEMATOLOGIA ANALIZADOR DE HEMATOLOGIA
ADVIA 120ADVIA 120

40. SISMEX XE 2100

41. TAMAÑO CELULAS
SANGUINEAS
Linfocitos: 50 – 100
fL
Monocitos: 100 – 150
fL
Granulocitos:150 – 380
fL
Eritrocitos: 60 – 110 fL
Plaquetas: 2 – 20 fL

42. RBC ( 3.80 – 5.80 )RBC ( 3.80 – 5.80 )
HGB ( 11.0 – 16.5 )HGB ( 11.0 – 16.5 )
HCT ( 35.0 – 50.0 )HCT ( 35.0 – 50.0 )
MCV ( 80 – 97 )MCV ( 80 – 97 )
MCH ( 26.5 – 33.5 )MCH ( 26.5 – 33.5 )
MCHC ( 31.5 – MCHC ( 31.5 –
35.0 )35.0 )
RDW ( 10.0 – 15.0 )RDW ( 10.0 – 15.0 )
HISTOGRAMA GLOBULOS ROJOSHISTOGRAMA GLOBULOS ROJOS

43. ADE: ADE: Ancho Distribución Ancho Distribución
EritrocitariaEritrocitaria
HeterogéneaHeterogénea: : A. Adquirida
HomogéneaHomogénea: : A. Genética
VCM:VCM: Tamaño Tamaño
MacrocìticoMacrocìtico
NormocìticoNormocìtico
MicrocìticoMicrocìtico
HCM, CHCM:HCM, CHCM: Cantidad Cantidad
NormocròmicaNormocròmica
HipocròmicaHipocròmica
RBC, HTO, Hb:RBC, HTO, Hb:
PoliglobuliaPoliglobulia
NormalidadNormalidad
AnemiaAnemia
HISTOGRAMA G. HISTOGRAMA G.
ROJOSROJOS

44. LINFOCITOSLINFOCITOS
CELULASCELULAS
MONONUCLEARESMONONUCLEARES
GRANDESGRANDES
GRANULOCITOSGRANULOCITOS
SUBPOBLACIONES WBCSUBPOBLACIONES WBC
LINFOCITOS: LINFOCITOS:
Variantes de Linfocitos y Variantes de Linfocitos y
Linfocitos madurosLinfocitos maduros
CEL GRANDES CEL GRANDES
MONONUCLEARES:MONONUCLEARES: Monocitos, Monocitos,
Línea Mieloide, Promonocitos, Línea Mieloide, Promonocitos,
ProlinfocitosProlinfocitos
GRANULOCITOS: GRANULOCITOS: Todos los Todos los
PMN más cayados o PMN más cayados o
segmentadossegmentados
Gráfica Normal según población Gráfica Normal según población
predominante acorde a la edad:predominante acorde a la edad:
NIÑOS ( LINFOCITOS )NIÑOS ( LINFOCITOS )
AADULTOS ( PMN )DULTOS ( PMN )

45. HEMOGLOBINA+ reactivo HGBHEMOGLOBINA+ reactivo HGB META HEMOGLOBINA META HEMOGLOBINA
CIANOMETA HB.CIANOMETA HB.
UFC Filtro +Fotodiodo
Cámara de reacción de HGB
Lámpara
ADVIA 120 ADVIA 120
HEMOGLOBINAHEMOGLOBINA
El reactivo ADVIA 120 HGB contiene:El reactivo ADVIA 120 HGB contiene:
- Cianuro de potasio, 20 mmol/L- Cianuro de potasio, 20 mmol/L
- Oxido de Dimethilaurilamina, 2.0%Oxido de Dimethilaurilamina, 2.0%
Reacción:Reacción:
- Los eritrocitos son hemolizados para liberar - Los eritrocitos son hemolizados para liberar
la hemoglobina. la hemoglobina.
- El grupo Hem se oxida de su forma ferrosa a - El grupo Hem se oxida de su forma ferrosa a
férricaférrica
y se combina con el cianuro para formar:y se combina con el cianuro para formar:

46. Sysmex XE 2100

47. Sysmex

50. GRACIAS POR SU ATENCION…