HORMONA GONADOTROFINA CORIONICA Y EMBARAZO 2021.pptx

HORMONAS

1. HORMONA GONADOTROFINA CORIONICA LABORATORIO EN EL EMBARAZO NORMAL Y PATOLOGICO Dra. Magda Cruzado Villanueva Universidad Nacional Federico Villarreal

2. GONADOTROFINA CORIONICA HUMANA HCG Proteína sintetizada principalmente por los tejidos embrionarios; está constituida por 2 cadenas de aminoácidos alfa ( α) y beta ( β) La subunidad α es común a otras hormonas como la hormona luteinizante (LH), la estimulante del folículo (FSH), la tirotrofina hipofisaria (TSH); mientras que la β es diferente y es quien le confiere la especificidad.

3. GLICOPROTEINAS Hormona Luteinizante (LH). Hormona Folículo Luteinizante (FSH). Hormona Tirotrofina (TSH). Hormona Gonadotrofina Coriónica (GH).

4. GONADOTROFINA CORIONICA HUMANA HCG Es una glicoproteina de 237 aa , con masa molecular de 38 kda , formada por dos subunidades alfa y beta codificadas por genes independientes La actividad biológica de la HCG depende de la integridad y el correcto acoplamiento de la dos subunidades El gen de la subunidad alfa esta localizado en el cromosoma 6 y codifica para un polipéptido de 92aa que es idéntico a la cadena alfa de las hormonas FSH; LH y TSH

5. GONADOTROFINA CORIONICA HUMANA HCG La subunidad beta HCG de 145 aa le otorga especificad biológica La HCG alfa es codificada por un solo gen La HCG beta es codificada por 6 genes distintos localizados en el cromosoma 19

6. CARACTERISTICAS QUIMICAS DE LA HCG CONTENIDO DE CH EN UN 30 %. LA VIDA MEDIA PLASMÁTICA ES 24 HORAS, SIENDO EL DE LA LH DE 2 HORAS. ALFA TIENE 92 AMINOACIDOS Y LA BETA TIENE 145 AMINOACIDOS. NO TIENEN ACTIVIDAD BIOLOGICA CUANDO ESTAN SEPARADAS.

7. BIOSINTESIS DE HCG Su secreción está relacionada a la masa de tejido trofoblástico correlacionada con la extensión trofoblástica desde la 4ª a las 20 semanas y con el peso desde las 20 a las 28, Desde allí al término de la gestación existe incremento en el dímero de la hCG que es proporcional al tamaño placentario y de las vellosidades coriales ; esto significa que su elevación se debe a proliferación e invasión placentaria, mientras que su disminución obedece a reducción del tejido trofoblástico.

8. BIOSINTESIS DE HCG Se han descrito mas de 30 isoformas de hCG en sangre al principio del embarazo La fracción β se ha encontrado en los tejidos fetales humanos, ovarios, testículos, riñón y timo . También es sintetizada por algunos tumores como los derivados del trofoblasto malignos y benignos y se ha observado acompañando a síndromes de pubertad precoz en varones, en hematoblastomas y teratomas, en neoplasias ováricas y testiculares y en tumores de “células de avena” del pulmón

9. BIOSINTESIS DE HCG Ahora se sabe que la gonadotrofina coriónica (GC) de los humanos está formada por un grupo de 5 moléculas, cada una compartiendo una secuencia común de aminoácidos, pero que difieren en la estructura merica y la cadena de aminoácidos, ellas son: la hCG , la HCG forma sulfatada, la hCG hiperglicosilada ( hCG -H), la hCG -β y la hCG -β hiperglicosilada . Se producen en células separadas y cada una posee funciones biológicas distintas

10. Ejemplos la hCG y la forma hCG sulfatada, son elaboradas por las células del sincitiotrofoblasto placentario y las células gonadotrópicas de la hipófisis la hCG hiperglicosilada se originan en las células del citotrofoblasto placentario de manera autocrina; esta forma hiperglicosilada impulsa y estimula la malignidad de los cánceres placentarios, testiculares y de las células germinales del ovario. La formas hCG -β y la hCG -β hiperglicosilada son producidas también de manera autocrina por una gran mayoría de cánceres, además de los ya conocidos de células germinales y coriocarcinoma, como los son la mayoría de los tumores epiteliales malignos o carcinomas, adenocarcinomas, sarcomas, teratomas, blastomas , leucemias y linfomas La hCG puede ser considerada como una molécula “marcadora” para el diagnóstico y seguimiento del embarazo normal o patológico y de algunas otras neoplasias distintas a las gestacionales.

11. GONADOTROFINA CORIONICA POSEE UNA SUB UNIDAD BETA QUE LA DIFERENCIA DE LAS DEMAS. SU SUBUNIDAD BETA LE DA ESPECIFICIDAD BIOLOGICA E INMUNOLOGICA. ES SECRETADO POR EL SINCICIOTROFOBLASTO. ES UNA GLUCOPROTEINA, CON UN CONTENIDO ELEVADO DE HIDRATOS DE CARBONO.

12. INDICACIONES IMPLANTACION UTERINA EMBARAZO NORMAL ABORTO EMBARAZO ECTOPICO MOLA HIDATIFORME CORIOCARCINOMA TERATOMAS TUMORES TESTICULARES (TERATOCARCINOMA O CORIOCARCINOMA)

13. USOS CONFIRMAR DIAGNOSTICO DE EMBARAZO DURANTE EL I TRIMESTRE. IDENTIFICAR GESTANTES ANTES DE PRESCRIPCION DE RX. Y MEDICAMENTOS. CONFIRMAR UN EMBARAZO ECTOPICO. EVALUAR PELIGRO DE ABORTOS. DX. Y SEGUIMIENTO DE TUMORES TROFOBLASTICOS Y NO TROFOBLASTICOS. SE HACE VISIBLE EL SACO GESTACIONAL A LA ECOGRAFÍA CUANDO HCG ES DE 1,500 A 2,000 mIU /ml.

14. METODOS METODO BIOLOGICO: Galli- Mainini . METODO CUANTITATIVO METODOS INMUNOLOGICOS. METODO DE RADIOINMUNOANALISIS. METODOS CUALITATIVOS o RAPIDOS.

15. METODOS BIOLOGICOS La primera descripción de la presencia de hCG en orina de mujeres embarazadas se atribuye a Aschheim y Zondek en el año 1927 , quienes creyeron que era sintetizada por la hipófisis anterior y la denominaron “ Prolan ”, palabra derivada posiblemente del latín “prole” que significa recién nacido consistía en inyectar pequeñas cantidades de orina de la mujer embarazada a ratas hembras , dos veces por día durante 3 días consecutivos y sacrificar al animal 4 días después, donde se apreciaba la presencia del cuerpo amarillo en los ovarios de las ratas positivas.

16. METODOS BIOLOGICOS En 1931 Friedman , la modernizó, utilizando 2 muestras de orina de la mañana e inyectándolas en la vena de la oreja de conejas vírgenes que habían sido aisladas de los machos, buscando los mismos cambios en 48 horas después de la primera inyección. En 1934 Shapiro inyectó ranas Xenopis Laveis En 1947, Witberger mejoró para los resultados en 2 horas después de inyectar la orina en el saco dorsal de ranas Pipiens machos, para buscar al microscopio la presencia de espermatozoides en el agua en la cual la rata saltaba.

17. METODOS BIOLOGICOS En 1948 Carlos Galli Mainini : orina de mujeres embarazadas inyectada en el saco linfático dorsal de los sapos estimulaba la espermatogénesis bajo el estímulo de gonadotropina coriónica ; con esta prueba se obtiene positividad en la primera semana de ausencia menstrual y su ejecución se realizaba en tres horas

18. HCG EN ORINA Se descubre el embarazo cuando las concentraciones de HCG son superiores a 10 mUI /ml.

19. HCG EN SUERO MATERNO En suero materno la HCG puede ser cuantificada con seguridad mediante inmunoanálisis específicos en la implantación, entre los días 6 y 12 (media 9,1) tras la ovulación.

20. NIVELES DE HCG EN SUERO MATERNO DURANTE LA GESTACION Al primer mes: 2,000 mIU /ml. Al tercer mes: 100,000 mIU /ml. Del tercer mes al noveno mes: se mantiene en meseta o ligeramente va disminuyendo. Al momento del parto y alumbramiento los niveles bajan hasta 5 mIU /ml. Habitualmente las concentraciones de HCG se duplican cada dos días o menos.

21. VALORES REFERENCIALES (mIU/ml) 3 - 4 semanas 9 - 130 4 - 5 semanas 75 - 2600 5 - 6 semanas 850 - 20800 6 - 7 semanas 4000 - 100200 7 - 12 semanas 11500 - 289000 12 -16 semanas 18300 - 137000 16 -29 semanas 1400 - 53000 29 -41 semanas 940 - 60000

22. PRUEBA RAPIDA INMUNOCROMATOGRAFIA A los 5 minutos se obtiene la respuesta. Detecta niveles mayores de 25 mUI /ml. Resultado Positivo: mayor de 25 mUI /ml. Resultado Negativo: menor de 25 mUI /ml. Resultado Nulo o Invalido: cuando no aparece la banda de control por deterioro o la prueba no se ha efectuado en forma correcta. La prueba consiste en la reacción de la hCG con anticuerpos y posterior formación de una marca de color por inmunocromatografía

23. PRUEBA RAPIDA INMUNOCROMATOGRAFIA Son capaces de detectarse a los 4 a 5 días de retraso Tras un aborto estas pruebas pueden permanecer positivas hasta 24 días tras un legrado y por tanto una prueba positiva no significa que el embarazo continua.

24. INMUNOENSAYO Wide en 1960 - 1962. La concentración de HCG se expresa como UI/ml de orina o suero; ng/ml de orina o suero. La relación entre UI/ml y ng/ml se expresa: 1 UI/ml = 83,3 ng/ml; 1 ng/ml = 12 mUI/ml.

25. INMUNOENSAYO INHIBICION DE LA HEMAGLUTINACION (HAI). INHIBICION DE LA AGLUTINACION DE LAS PARTICULAS DE LATEX (IAL) O AGLUTINACUION INDIRECTA. AGLUTINACION DIRECTA DE LAS PARTICULAS DE LATEX (ADL).

26. INHIBICION DE LA HEMAGLUTINACION Anti-HCG (antisuero) + orina del paciente  incubar. Añadir eritrocitos recubiertos con HCG con partículas de látex. Si la orina contiene HCG: Prueba Positiva (ausencia de hemaglutinación). Si la orina no contiene anti-HCG: Prueba Negativa (hemaglutinación). Prueba + (EMBARAZO). Prueba - (No Embarazo). Sensibilidad: 750 – 3,000 mIU /ml. Actualmente en desuso

27. AGLUTINACION DIRECTA DE LAS PARTICULAS DE LATEX antiSuero anti HCG + Partículas de Látex. Si la orina contiene HCG, se produce aglutinación y la prueba será POSITIVA. Si la orina no contiene HCG, NO SE PRODUCE aglutinación y la prueba será NEGATIVA.

28. RADIOINMUNOENSAYO (RIA) Se clasifican de acuerdo al antisuero. Los antisueros son específicos para la HCG beta. Usa anticuerpos contra la B HCG. Sensibilidad: 5 mlUI /ml de HCG (0.4 ng/ml). La muestra problema compite con el trazador por la unión al yodo radiomarcado (I125). Se basa en la unión de hCG marcada con I125 con una cantidad fija de anticuerpo específico ( antihCG o anti- β- hCG ) No resulta afectado por niveles de LH. Dura de 1 a 5 horas.

29. ENZIMOINMUNOENSAYO (ELISA) Detecta la β- hCG en suero o plasma de forma tanto cualitativa, como cuantitativa desde las 3.5 semanas, con una sensibilidad de 25 mUI /ml. Los anticuerpos monoclonales se unen la la hcg de la muestra. Posteriormente se añade un segundo anticuerpo al que se une una enzima (fosfatasa alcalina), que produce una reacción que mostrará una coloración azulada cuya intensidad será proporcional a la cantidad de β- hCG de la muestra.

30. QUIMIOLUMINISENCIA Es un ensayo inmunométrico quimioluminiscente en fase sólida. Duración: 42 minutos. Tiene anticuerpos monoclonales murinos anti HCG. Resultado mayor o igual a 30 mIU /ml indica positividad para el embarazo. Sensibilidad: 1,1 mIU /dl. Especificidad: alta.

31. FACTORES QUE INTERFIEREN EN LAS PRUEBAS DE EMBARAZO-FALSOS (+) HEMATURIA Y PROTEINURIA. LOS ANTICONVULSIVANTES, ANTIPARKINSONIANOS, HIPNOTICOS, Y TRANQUILIZANTES. HEMOLISIS. DE LA SANGRE. Concentraciones de hematíes hasta de 30 ul /ml no tiene efecto en resultados. PACIENTES EXPUESTOS A ANIMALES O PRODUCTOS SERICOS DE ANIMALES. CANCER PULMONAR, DEFICIENCIA DE IG. A, AC.HETERÓFILOS. TRATAMIENTO DE INFERTILIDAD: HCG. TÉCNICAS: Lectura tardía.

32. FACTORES QUE INTERFIEREN EN LAS PRUEBAS DE EMBARAZO-FALSOS (-) Las pruebas precoces da falsos negativos. Los diuréticos y la prometacina dan falsos negativos. Bilirrubinas: Concentraciones hasta 200 mg/l no tienen ningún efecto en resultados.

33. RESULTADOS ANORMALES (Niveles Aumentados) EMBARAZO NORMAL. EEMBARAZO ECTOPICO. MOLA HIDATIFORME. CORIOCARCINOMA DE UTERO, TESTÍCULO Y OVARIO. OTROS TUMORES.

34. RESULTADOS ANORMALES (Niveles Disminuidos) AMENAZA DE ABORTO. ABORTO INCOMPLETO. FETO MUERTO U OBITO.

35. ¡Muchas Gracias!