Esterilización y
Desinfección
Microbiología y Parasitología
2do Cuatrimestre 2022
Para aislar un microorganismo de
un proceso infeccioso,
es necesario inocularlo en un
sistema ESTÉRIL
Por que?
SANEAMIENTO
Se entiende por saneamiento a las
acciones destinadas a mantener o
restablecer un estado de limpieza y
desinfección en las instalaciones, equipos
y procesos de elaboración a los fines de
prevenir enfermedades o contaminación.
DESINFECCIÓN
Eliminación “selectiva”de ciertos microorganismos
indeseables por interferencia en su estructura o
metabolismo a fin de impedir su transmisión.
●Es selectiva y se aplica a objetos inanimados o
superficies.
●En general se usan agentes químicos
(desinfectantes o germicidas)
Es el uso de una sustancia química
no tóxica (antiséptico) sobre tejidos vivos,
para prevenir o detener el crecimiento o la
acción de los microorganismos, ya sea
inhibiendo su actividad o destruyéndolos.
ANTISEPSIA
ASEPSIA
Estado de objetos o superficies libres
de microorganismos.
METODOS DE ESTERILIZACION
FÍSICOS
1.Calor
2.Radiaciones
3.Filtración
4.Ultrasonido
QUÍMICOS
1.Óxido de etileno
2.Glutaraldehído
3.Formaldehído
MECANISMOS DE ACCIÓN DE MÉTODOS
DE DESINFECCIÓN Y ESTERILIZACIÓN
1.Alteración del DNA.
2.Alteración de proteínas y enzimas.
3.Alteración de la membrana celular.
1.Alteración del DNA:
-Radiaciones (UV, ionizantes)
-Químicos: alquilantes (glutaraldehído,
formaldehído
y óxido de etileno)
-Calor
-Ácidos y álcalis
-Oxidantes: Peróxido de hidrógeno, Iodo
-Metales pesados:mercurio
2. Alteración de proteínas y enzimas:
●Alcoholes
●Fenoles
●Agentes tensioactivos (amonios
cuaternarios, jabones, detergentes)
3. Alteración de la membrana celular:
Factores que afectan la potencia
desinfectante
Tiempo
Temperatura
pH
Concentración del agente
Presencia de materia orgánica
Características del microorganismo
ESTERILIZACIÓN - AGENTES FÍSICOS
1.CALOR:
- Incineración
-Flameado
-Aire caliente
B) Húmedo
- Vapor (autoclave)
-Tyndalización
A) Seco
En todos los métodos se debe lavar el instrumental, secar y
empaquetar o envolver o guardar en cajas antes de esterilizarlos.
USAR CINTA TESTIGO
1.A) Calor Seco
Horno de Pasteur o Estufas:
material de vidrio, metales, objetos termoestables
Autoclave
VAPOR FLUENTE:100º Cx 30min
para sustancias termolábiles a más de 100º C
VAPOR A PRESION:
más utilizado y más seguro: todo tipo de material de
laboratorio (medios, instrumental, ropa, etc)
1.B) Calor Húmedo
ESTERILIZACIÓN - AGENTES FÍSICOS
Vapor a presión
121º Cx15 min
134ºCx7 min
Las presiones/temperaturas alcanzadas son:
1 at : 121º C;1,5 at : 126º Cy2 at : 134º C
1.B) Calor Húmedo
ESTERILIZACIÓN - AGENTES FÍSICOS
Tindalización
1.Calentar a 80º Cx30 min.
2.Incubar el medio 24 hs a 35º C.
3.Repetir este proceso 3 a 5 días sucesivos
Para líquidos que no resisten temperaturas altas.
Ha sido reemplazada por la filtración de membrana.
1.B) Calor Húmedo
ESTERILIZACIÓN - AGENTES FÍSICOS
CALENTAMIENTO INTERMITENTE
Membrana filtrante
poros
bacteria
2. RADIACIONES
Radiaciones ionizantes:
-gamma: más eficiente y seguro
Fuente: Cobalto 60
Para elementos que no soportan el calor y la
humedad (jeringas, catéteres, materiales médicos
y de orígen biológico: medicamentos, alimentos)
Desventaja:medidas de seguridad y costo
ESTERILIZACIÓN - AGENTES FÍSICOS
1.ÓXIDO DE ETILENO:
-Se debe combinar con C02
-Gran poder de penetración
-Uso:4 hs a 58º C con 40% de humedad.
Si se utiliza a temperatura ambiente debe actuar 12 hs.
-Airear los elementos antes de ser utilizados (tóxico,
mutagénico, inflamable)
-Objetos termolábiles: material descartable, válvulas y
prótesis, equipos electrónicos
ESTERILIZACIÓN - AGENTES QUÍMICOS
2. GLUTARALDEHÍDO:
-Se utiliza al 2% en solución acuosa
-Bactericida, tuberculicida y viricida en 10 min.
-Tiene efecto esporicida pero necesita de 10 hs. A
temperatura ambiente
-Luego de su uso se deben enjuagar los elementos con
abundante agua estéril
-Se utiliza para objetos de plástico e instrumentos de
cirugía y tejidos
ESTERILIZACIÓN - AGENTES QUÍMICOS
3. FORMALDEHÍDO
Se presenta comercialmente en solución acuosa al 40%, a partir
de ella se realiza la solución final al 3 u 8 % (según uso).
●Formalina al 8% esporicida (no menos de 18 hs. A
temperatura ambiente)
●Para “desinfección” (laboratorio, instrumental, guantes)
●Los materiales deben seguir el mismo tratamiento que para el
óxido de etileno y glutaraldehído.
●Uso muy restringido, altamente tóxico.
Alquilante. Modifica
químicamente a biomoleculas.
Proteínas y ADN.
Mecanismo de Acción
ESTERILIZACIÓN - AGENTES QUÍMICOS
MÉTODOS DE DESINFECCIÓN y ANTISÉPTICOS
FÍSICOS: sólo usados para desinfección
1.Calor Húmedo:
- ebullición:100ºC x 10/30 min
- pasteurización: eliminar microorganismos patógenos
-AlcoholETILICO 70 %
-Clorhexidina
-Jabones
-Detergentes
-Sol. Yodadas
-Metales pesados
-Peróxido de Hidrógeno 3-6%
MÉTODOS DE DESINFECCIÓN y ANTISÉPTICOS
FENOLES Y DERIVADOS
●Actúan en presencia de materia orgánica
●Al 5% excelente desinfectante para
Micobacterium tuberculosis
●De olor muy picante y tóxico
QUÍMICOS
Daño a las membranas con pérdida de
los constituyentes citoplasmáticos,
inactivan enzimas de membrana
irreversiblemente.
Mecanismo de Acción
MÉTODOS DE DESINFECCIÓN y ANTISÉPTICOS
ALCOHOLES
●Etílico o isopropílico (al 70%)
●Concentraciones menores al 45% tienen una
actividad incierta.
●Desinfección y antisepsia
(2 min de contacto mata casi el 90% de los
microorganismos cutáneos )
QUÍMICOS
Desestabilizan la membrana celular
y desnaturalizan proteínas.
Mecanismo de Acción
MÉTODOS DE DESINFECCIÓN y ANTISÉPTICOS
CLORHEXIDINA
Concentración: de 0.05% a 2% en solución acuosa o
alcohólica.
Ej: lavado tópico con hisopos y friega quirurgica: 2,00 %
Enjuague oral: 0,12 %
●Antiséptico y desinfectante con acción de amplia gama (bacterias
gram+ y gram-, anaerobios facultativos, aerobios y levaduras).
●Algunas especies de Pseudomonas y Proteus tienen baja
sensibilidad.
●Es ineficaz frente a micobacterias.
QUÍMICOS
MÉTODOS DE DESINFECCIÓN y ANTISÉPTICOS
●A baja concentración es bacteriostático; a concentración más
elevada se comporta como bactericida.
● Actúa en presencia de materia orgánica.
Alteración de la permeabilidad
celular, coagulación del
citoplasma (es bactericida)
Mecanismo de Acción
CLORHEXIDINA
QUÍMICOS
MÉTODOS DE DESINFECCIÓN y ANTISÉPTICOS
●Mayor actividad a pH alcalino
●No son esporicidas, ni tuberculicidas. En la actualidad las
Pseudomonas son refractarias
●Su acción es interferida por la presencia de materia orgánica y
son neutralizados por jabones y detergentes aniónicos.
Se usan como “desinfectantes” (saneamiento ambiental)
NO es efectivo para eliminar Mycobacterium tuberculosis, Virus de Hepatitis y algunos
Estreptococos
DETERGENTES CATIÓNICOS (AMONIOS CUATERNARIOS)
QUÍMICOS
La porción hidrófoba penetra en las membranas, el
grupo polar catiónico se asocia con los fosfatos de los
fosfolípidos, provocando alteraciones en las
membranas (con salida de metabolitos desde el
citosol). También actúan sobre proteínas.
Mecanismo de Acción
MÉTODOS DE DESINFECCIÓN y ANTISÉPTICOS
CLORO y compuestos
El más usado: Hipoclorito de Na+ (lavandina)
●Se usan como “desinfectantes” de superficie de
instrumentos de laboratorio en solución acuosa (material
contaminado 1/10; sino al 0,3%).
●Inestable, las soluciones se deben preparar en el
momento y proteger de la luz y el calor.
El ClOH atraviesa la pared celular, el Cl es el
elemento que ataca químicamente sustancias
biológicas como proteínas. Estresa a la célula.
NaClO + H
2
O → Na
+
+ ClHO + H
+
Mecanismo de Acción
QUÍMICOS
MÉTODOS DE DESINFECCIÓN y ANTISÉPTICOS
Iodo y compuestos
Para antisepsia de heridas y piel
Tintura de Iodo,Iodóforos
Oxidante, actúa sobre las proteínas
estructurales y enzimáticas de las
células microbianas.
Mecanismo de Acción
povidona de Iodo
QUÍMICOS
MÉTODOS DE DESINFECCIÓN y ANTISÉPTICOS
Peróxido de Hidrógeno
●Concentracion: Se utiliza al 3-6 %
Solución madre al 30%, a partir de aquí se hace la solución
final.
●Se prepara antes de usar y se guarda en frasco color
caramelo.
●Para antisepsia de heridas y desinfección
(dispositivos médico-quirúrgicos y lentes de contacto blandos)
●Concentrado es corrosivo para la piel, ojos, nariz, garganta,
pulmones y tracto gastrointestinal.
Oxidante fuerte: produce OH
-
y radicales libres
que atacan una amplia variedad de compuestos
orgánicos (lípidos y proteínas que componen las
membranas).
Mecanismo de Acción
QUÍMICOS
MÉTODOS DE DESINFECCIÓN y ANTISÉPTICOS
SALUD PUBLICA
RESOLUCIÓN MINISTERIAL 387/2004
Ministerio de Salud
Guía de Procedimientos y Métodos de
Esterilización y Desinfección para
Establecimientos de Salud.
Programa Nacional de Garantía de Calidad
de la Atención Médica.