INTRODUÇÃO A HISTOTECNICA aula para curso de odonto

histotecnica

1. HISTOLOGIA Histotécnica e suas fases

2. INTRODUÇÃO A HISTOLOGIA A histologia é o estudo da estrutura do material biológico e das maneiras como os componentes individuais se relacionam estrutural e funcionalmente Parte da Ciência que estuda os tecidos e como eles se organizam para constituir os órgãos. Histologia - histos = tecido e logos = estudo (Mayer, 1819). Tecido: "Conjunto de células semelhantes e associadas intimamente, adaptadas para funções específicas".

3. Histotécnica Fases 1. Coleta ou Colheita do material 2. Fixação 3. Clivagem 4. Desidratação 5. Diafanização 6. Impregnação 7. Inclusão 8. Microtomia 9. Coloração de rotina 10. Montagem

4. Coleta/Colheita do Material Quem realiza esta fase? Tipos : in vivo ( biópsia) x post-mortem Biópsia = é a remoção de tecido de pacientes vivos para exame diagnóstico (amostra obtida por biópsia) Acondicionar o material, identificar e colocar a substancia fixadora de modo adequado são fundamentais nesse momento!

5. Fixação Conceito: É o tratamento dado a um tecido a fim de se evitar a deterioração do mesmo por suas próprias enzimas ( autólise ) ou por microrganismos. Preserva a morfologia e a composição química do tecido através da insolubilidade das proteínas. Método Físico Método Químico Imersão Perfusão

6. Fixação Fixadores Químicos: Simples Compostos Formol 10% Bicromato de potássio Bicloreto de Mercúrio Etanol Metanol Líquido Bouin Líquido de Zenker Líquido de Helly

7. Fixação Fixadores Físicos Frio Congelamento / Câmaras frigoríficas Calor Fixação de esfregaços O esfregaço de sangue permite avaliar leucócitos, hemácias e plaquetas. Essas populações de células são produzidas na medula óssea e liberadas na corrente sanguínea quando necessário

8. Fixação Formol 10% Fórmula: 100ml de formol 40% (solução estoque) 900 ml de água corrente ou 1 litro de formol 40% (solução estoque) 9 litros de água corrente

9. Fixação O que um fixador precisa ter para ser considerado bom? agir rapidamente, matando a célula; não interferir na coloração, aumentando a afinidade do tecido pelo corante preservar morfologia e composição química teciduais; evitar a autólise e o crescimento de bactérias e fungos; não produzir artefatos ou estruturas artificiais; ter alto poder de penetração; endurecer sem deformar; ser de baixo custo / "atóxico“; ter ação conservante;

10. Fixação Quais os requisitos para uma boa fixação? intervalo mínimo entre a colheita e a fixação contato superfícies/ substância fixadora fixador = 20x o volume da peça espessura da peça = 1-6 mm boa colheita Cadáver 12h 48h 1 semana Fresco Resfriado Congelado

11. Fixação Descalcificação Quando realizar esta fase adicional?

12. Coleta e Fixação

13. Clivagem 1. Registro 2. Descrição Local: Lesão ou Tumor Quantidade: Peça única/retalho/fragmento Formato: irregular/arredondado/ovalado Tamanho: ...x...x.. cm/... cm diâmetro Descrição macroscópica de PC

14. Clivagem Superfície Externa Tonalidade Lisa/rugosa Recoberta por pele ( parcial , total, tricomizada ) Úlcera / Íntegra Envolta por tecido (do tipo adiposo, conjuntivo) Nodular/ papilomatosa /deprimida/ulcerada/crostosa Coberta de sujidades/sangue/muco/pus Presença de ecotoparasitas

15. Consistência aos cortes Friável/ gelatinosa/ bem macia/ macia/ esponjosaElástica / firme-elástica/ firme/ rangente/ pétreaOra macia, ora firme/ deixando fluir líquido Superfície de cortes Tonalidade Irregular/ lisa (compacta)/ fasciculada/ marmóreo/ Aspecto fibroso/ untuosa/ lobada ou multilobada cística ou policística (...cm de diâmetro) Conteúdo dos cistos: consistência (líquido, gelatinoso, caseoso, purulento...) Tonalidade (brancacenta, pardacenta, rósea, enegrecida...) Odor (pútrido, inodoro, amoniacal...) Material: Navalha , faca Bisturi Tamanho: 2 a 6 mm Finalidade Planos de corte

16. Clivagem Outras possibilidades E se o fragmento for pequeno ? Dividir ao meio ou processar inteiro E se a peça for muito grande ? Fazer cortes para a penetração da substância fixadora ou descrever a peça e retirar fragmentos menores para exame, desde que sejam representativos da lesão

17. Desidratação/Diafanização/Impregnação pela parafina Desidratação - Duração 6h Remoção de aguas dos tecidos com substancias miscíveis com a água Diafanização – Duração 3h Remoção de álcool por substancias miscíveis com o álcool e com a parafina Impregnação pela parafina – 2h Utilizado temperatura 56 a 58 °C

18. Desidratação Quais os cuidados nesta fase? Desidratação gradual o álcool etílico... Evitar artefatos Substituição periódica do álcool Tempo de permanência do álcool Obs : nesta fase ocorre retração tecidual

19. Diafanização Substituição periódica do Xilol Tempo de permanência no xilol Obs : nesta fase os fragmentos ficam translúcidos ( diafanados )

20. Impregnação pela parafina Cuidados nesta fase: Substituição periódica da Parafina Tempo de permanência na Parafina Temperatura adequada

21. Inclusão Inclusão em parafina Parafina fundida … 56°C… solidificar a temperature ambiente Molde apropriado Altura 1,5 cm

22. Inclusão em Parafina Quais os cuidados com a inclusão em parafina? Obedecer critérios de consistência e tamanho dos fragmentos de acordo com a lamínula Quais os possíveis erros que podem ocorrer?

23. Microtomia O estudo dos tecidos na dimensão celular da vida, requer a preparação de cortes histológicos de modo a que sejam observados ao M.O.C. Tecidos e órgãos são opacos à luz devido à sua espessura e densidade Cortes devem ser finos e translúcidos

24. Microtomia Quais são os cuidados com esta fase? Navalha afiada Espessura dos cortes Técnico com experiência Temperatura de banho-maria Temperatura de estufa

25. Coloração de Rotina Corantes Hematoxilina e Eosina Hematoxilina Corante básico, cora estruturas ácidas (natural/vegetal) Núcleo Eosina Corante acido, cora estruturas básicas (artificial) Citoplasma

26. Coloração de Rotina Preparo adequado dos corantes; Respeitar o tempo de cada subfase da coloração ; Substituição periódica da substância utilizada

27. Montagem Cobrir adequadamente dos cortes histológicos com as lamínulas Utilizar o balsamo na diluição correta – evitar bolhas