microaasasasasaasasassasasasasasasasasa.pptx

as

1. Técnicas de microscopía

2. Microscopía

3. Definiciones MICROSCOPIO: i nstrumento modulador de  la energía fotónica que a base del empleo de lentes ofrece una imagen amplificada y nítida del objeto examinado. MICROSCOPIA: c onjunto de técnicas y métodos destinados a hacer visible los objetos de estudio que por su pequeñez están fuera del rango de resolución del ojo normal. Instrumento óptico construido a base de lentes aplicado a la observación  de objetos que escapan del poder de visión del ojo humano. Técnica cuyo objetivo es la observación de estructuras u objetos que por su dimensión no son observables a simple vista y requieren del uso de lentes de aumento. Arraiza et al.(2019)

4. Galileo   Según los Italianos   Jansen   Según los Holandeses Publicaron un trabajo sobre la observación microscópica del aspecto de una abeja. Malpighi: observo al microscopio los capilares sanguíneos Hooke: publico su obra Micrographia . Leeuwenhoek describió por primera vez Protozoos, Bacterias, Espermatozoides y Glóbulos rojos. Antecedentes históricos 1610 1700 1660-1665

5. Continuación… 1877 Abbe: publico su teoría del microscopio 1816-1888 Carl Zeiss: Mejoro la Microscopía de Inmersión, 2000 aumentos 1931 Max Knoll y Ernest Ruska 1942 se desarrolla el microscopio electrónico de barrido (SEM). Utiliza un haz de electrones para enfocar la muestra consiguiendo aumentos de 100.000 X Antiguo Moderno

6. Continuación… Las células solo se pueden observar con la ayuda de un microscopio, instrumento que proporciona una imagen ampliada de un objeto diminuto. Las lentes ópticas se hicieron por primera vez en Europa, en el siglo xiii , y los primeros microscopios ópticos compuestos (de doble lente) se construyeron a fines del siglo xvi . A mediados del siglo xvii , un puñado de científicos pioneros había utilizado sus microscopios hechos a mano para descubrir un mundo que nunca se habría revelado a simple vista. Iwasa, J., & Marshall, W. (2019). El descubrimiento de las células generalmente se atribuye a Robert Hooke, un microscopista inglés que, a los 27 años, recibió el puesto de conservador de la Royal Society of London Hooke intentó responder fue por qué los tapones hechos de corcho (parte de la corteza de los árboles) eran tan adecuados para mantener el aire en una botella Hooke llamó a los poros células, porque le recordaban las celdas habitadas por los monjes que vivían en un monasterio. Había observado las paredes celulares vacías del tejido vegetal muerto, paredes que originalmente habían sido producidas por las células vivas que las rodeaban. Uno de los microscopios compuestos (doble lente) más ornamentados de Robert Hooke. (Recuadro) Dibujo de Hooke de un corte delgado de corcho, que muestra la red de “células” en forma de panal.

7. Iwasa, J., & Marshall, W. (2019). Continuación…

8. Escala logarítmica de las dimensiones microscópicas

9. Escala logarítmica de las dimensiones microscópicas

10. Clasificación y tipos de microscopio Tipo de energía utilizada para la generación de la imagen Microscopio de Luz o Fotónicos Microscopios Electrónicos Microscopio Electrónico de Transmisión Microscopio Electrónico de Barrido Simples ( una sola lente ) Compuestos (dos o mas lentes)

11. Microscopia óptica Surge para poder visualizar correctamente células vivas o muestras no coloreadas, para lo cual se emplean filtros, condensadores especiales, etc. Arraiza et al.(2019)

12. Microscopia Óptica Simple Esta provisto de una lente o sistema de lentes convergentes dispuestas de manera que proporcionan una imagen virtual, derecha y mayor que el objeto, que a su vez esta situado entre la lente y el foco. Este tipo de microscopio se le denomina Lupa y pueden ser : Monoculares Binoculares Arraiza et al.(2019)

13. Microscopía de campo oscuro Bloquea la parte central del rayo de luz, por lo que la muestra sólo recibe rayos oblicuos. El objeto iluminado dispersa la luz y se hace visible contra el fondo oscuro que tiene detrás. Las zonas transparentes de la muestra quedan oscuras mientras que superficies y partículas se ven brillantes. Para ello se usa un condensador especial. Arraiza et al.(2019)

14. Esta técnica se emplea para: Arraiza et al.(2019)

15. Microscopía de contraste de fases Similar al caso anterior, pero el cono de luz es más estrecho, lo que provoca un cambio de fase en la longitud de onda. De esta manera, se forman variaciones en el índice de refracción de una muestra transparente, haciéndola visible.

16. Microscopía de interferencia La luz se divide en dos haces, uno atraviesa la muestra y el otro pasa lateralmente y sirve de referencia para cuando se juntan los haces de nuevo. El resultado es una imagen con coloración oscura o clara sobre un fondo gris, lo que aporta sensación de relieve, como si las estructuras arrojaran sombras hacia el lado. Se utiliza para células vivas y no coloreadas, para muestras gruesas o para fertilización in vitro. Campus Formación Granada. (2020).

17. Microscopía de fluorescencia Campus Formación Granada. (2020).

18. Microscopía de luz ultravioleta Este microscopio proporciona un mayor poder de resolución que la luz visible. La imagen no se observa directamente, ya que es peligrosa, sino a través de fluorescencia, fotografía o un sensor digital. Es similar al microscopio de fluorescencia, pero cambia la fuente de iluminación, usándose lámparas de arco de mercurio o xenón. Campus Formación Granada. (2020).

19. Microscopía de polarización Es una técnica que mejora de manera muy amplia la calidad de la imagen, usando filtros que recombinan las ondas para enfocar mejor la muestra. Permite la visualización de sustancias cristalinas o fibrosas intracelulares (citoesqueleto) y extracelulares (colágeno, cristales de uratos…). Campus Formación Granada. (2020).

20. Microscopía Electrónica Permite ver la ultra estructura celular, alcanzando una resolución unas 40.000 veces superior al microscopio fónico. Utilizan haces de electrones y depende del voltaje empleado para acelerar los mismos. No es posible cambiar el objetivo; el aumento se obtiene variando el haz de electrones y el voltaje Rivera, M. (2019).

21. Microscopía electrónica de barrido En el microscopio electrónico de barrido (MEB), o microscopia de exploración electrónica (SEM), los electrones inciden desde arriba sobre la preparación. Por ello la muestra puede ser de cualquier grosor o tamaño. Pennycook, S. J. (2018). Emplea dos técnicas preparatorias: Secado por congelación Secado por punto critico Aplicación: Estudio de la morfología de células y tejidos, así como de la morfología interna. Estudio de moléculas.

22. Microscopía electrónica de transmisión

23. Técnicas que mas se utilizan para este tipo de microscopio

24. Procesamiento de tejidos para el MET Observar muestras con esta técnica requiere que sean procesadas correctamente a través de los siguientes pasos: Aplicaciones del MET: Estudios de la ultraestructura celular. Estudios de citoquímica, histoquímica e inmunohistoquímica. Reconocimiento de virus y sus características.

25. Microscopia confocal de barrido láser Permite, utilizando la tecnología láser: La observación de secciones finísimas dentro de una espesa muestra fluorescente Digitalizar y reconstruir a gran velocidad las imágenes de alta resolución en tres dimensiones. Rivera, M. (2019). Aplicaciones del Microscopio Confocal : a)Medir actividades enzimáticas, reacciones de oxidación, fagocitosis, apoptosis… b)Electrofisiología c)Estudios de ADN y ARN d)Morfología de orgánulos citoplasmáticos e)Cirugía y otros métodos clínicos

26. Otros tipos de microscopios ópticos Microscopio estereoscópico Proporciona una imagen en 3D de la muestra, se usa para especímenes de gran tamaño, sin corte o preparación previa Microscopio quirúrgico Se emplea en microcirugía, proporciona buena iluminación y aumento de estructuras atómicas Microscopio invertido Utilizado para cultivos celulares y técnicas de reproducción asistida Microscopios de barrido con sondas Se coloca la sonda cerca del objeto generando una corriente eléctrica. El sistema informático recibe la información y genera una imagen en 3D. Esto permite distinguir incluso un átomo de otro.