MICROPROPAGAO.pdf eeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeee

otimo

1. PROPAGAÇÃO
ASSEXUADA DE
PLANTAS
MICROPROPAGAÇÃO

2. MICROPROPAGAÇÃO
Ramo da cultura de tecidos que visa
a multiplicação de pequenas partes
da planta, capazes de gerar um novo
indivíduo.

3. CULTURA DE TECIDOS
•Conjunto de técnicas nas quais um explante (célula,
tecido ou órgão) é isolado e cultivado em condições
assépticas em meio nutritivo.
•Baseia-se na totipotência celular “capacidade que
uma célula possui de regenerar um indivíduo
inteiro”.

5. CULTURA DE TECIDOS
Utilizada principalmente em espécies de difícil
propagação pelos métodos convencionais,
permitindo a obtenção de grande número de
plantas sadias e “geneticamente uniformes”
em curto período de tempo.

7. Cultura de tecidos vegetais
•Os explantes desinfestados (esterilizados), são
cultivados assepticamente em meio de cultura
apropriado.
•Clones

8. TÉCNICAS DE CULTIVO IN VITRO
•Embriogênese ou cultura de embriões: formação e
desenvolvimento do embrião, ocorrido após a
formação do zigoto.

9. TÉCNICAS DE CULTIVO IN VITRO
•Embriogênese somática: formação de embriões a
partir de células somáticas sem que ocorra fusão
dos gametas.

10. TÉCNICAS DE CULTIVO IN VITRO
•Cultura de meristemas ou ápices caulinares: cultivo
in vitro de explantes oriundos de excisões de ápices
caulinares (primórdios foliares e regiões
meristemáticas).

11. •Cultura de protoplastos ou suspensões celulares:
cultivo de células desprovidas de parede celular
em meio nutritivo liquido sob agitação.
TÉCNICAS DE CULTIVO IN VITRO

12. •Micro-enxertia: enxertia in vitro.
TÉCNICAS DE CULTIVO IN VITRO

13. APLICAÇÕES DA CULTURA DE
TECIDOS
•MELHORAMENTO GENÉTICO
•FITOPATOLOGIA
•MICROPROPAGAÇÃO

14. MICROPROPAGAÇÃO
•Conjunto de técnicas de propagação vegetativa in
vitro utilizando propágulos de pequeno tamanho.

15. Aplicação comercial da micropropagação
•Limpeza clonal
•Multiplicação de espécies herbáceas e
arbustivas
•Produção de porta-enxertos de frutíferas
e essências florestais

16. Vantagens da micropropagação
•Manter as características da planta matriz
•Alto rendimento/planta matriz – propágulos
pequenos
•Propagação de plantas livres de vírus e outras
doenças
•Cultura de meristema ou ápices caulinares, micro-
enxertia
•Controle total das condições ambientais

17. Vantagens da micropropagação
•Produção intensiva em curto período de tempo e
necessidade mínima de espaço
•Abacaxi: 30 explantes – 1.250.000 mudas
•Bananeira: 1 meristema - 4.000 mudas
•Aplicação do melhoramento genético
•Clonagem de espécies de difícil propagação vegetativa
•Preservação a longo prazo de plantas matrizes
•Obtenção de porta-enxertos sadios
•Aumento da produtividade - morango

19. Fatores que limitam o uso da propagação in
vitro
•Custo e mão-de-obra
•Distância entre pesquisas e micropropagação comercial
•Ocorrência de infecções
•Ocorrência de mutações – instabilidade cromossômica
das células
•Produção de compostos tóxicos – fenóis
•Dificuldade de enraizamento em plantas lenhosas
•Aclimatação

20. Fatores que Afetam a
Regeneração in vitro
•Genótipo
•Fonte de Explantes
•Condição da Cultura
Cultivar
Espécie
Variedade
Tecido Utilizado
Maturidade
Estado Fisiológico
Meio de Cultura – nutrientes, reguladores
Luz – intensidade, fotoperíodo, qualidade
Temperatura
Recipiente – tamanho, trocas gasosas

21. Etapas do processo de micropropagação
1) Condicionamento das plantas matrizes
•Casa de vegetação ou câmara de crescimento
•Redução de estresse e contaminantes
•Sadias
•Melhores explantes
•Próximos à região apical, com intensa atividade
meristemática e consistência herbácea
•Poda
•Armazenamento a frio – alongamento de gemas e
crescimento de gemas laterais dormentes
•Pré-tratamento com reguladores de crescimento
•Tratamento com fungicidas e bactericidas
•Estiolamento: menos lignina e menos fenóis

24. Etapas do processo de micropropagação
2) Estabelecimento do cultivo in vitro
–Seleção do explante
•Gemas apicais ou axiliares, segmentos
foliares, botões florais, etc.
–Alta capacidade de regeneração:
•Genótipos, condições ambientais,
fitorreguladores e estádio de
desenvolvimento da planta matriz.

25. Etapas do processo de micropropagação
2) Estabelecimento do cultivo in vitro
–Preparo do meio de cultura
•Padrão: meio MS
•Termoterapia na planta matriz: 35 °C/ 30
dias
•Assepsia do explante: NaClO e água
esterilizada
•Isolamento dos ápices meristemáticos em
câmara de fluxo laminar
•Transferência para salas de crescimento a 25
°C, 2000 lux, e fotoperíodo de 16 horas

26. Etapas do processo de micropropagação
2) Estabelecimento do cultivo in vitro
–A partir do meristema – brotações
–Termoterapia
–Assepsia: NaClO, HCl, CaClO, MgCl
2, Tween
–Isolamento dos ápices meristemáticos em
câmara de fluxo laminar
–Transferência para salas de crescimento
–Meristema – calo/ brotações

28. Etapas do processo de micropropagação
3a) Multiplicação
–Explantes: brotações – citocinina (meio de
cultivo)
–Sub cultivos
3b) Alongamento das brotações
–Meio de cultivo – GA
3
–Redução da citocinina

31. Etapas do processo de micropropagação
4) Enraizamento
–Meio contendo auxina
–In vitro ou ex vitro
5) Aclimatação
–Casa de vegetação
–Umidade, temperatura e taxa fotossintética