numeration_reticulocyte plus d'explications

Numération des reticulocytes explication

1. Année 2008
Équipe pédagogique du lycée Jean MOULIN (ANGERS)
POCHET
1
Numération des Numération des
réticulocytesréticulocytes

2. Année 2008 2Équipe pédagogique du lycée Jean MOULIN (ANGERS) POCHET
Érythropoïèse : genèse du réticulocyteÉrythropoïèse : genèse du réticulocyte
Proérythroblaste
Érythroblaste
basophile I
Érythroblaste
basophile II
Érythroblaste
polychromatophile
Érythroblaste
acidophile
Réticulocyte ou
Proérythrocyte
Réticulocyte ou
Proérythrocyte
Hématie, Érythrocyte
ou Globule rouge
M
O
E
L
L
E

O
S
S
E
U
S
E

R
O
U
G
E
S
A
N
G

3. Année 2008 3
Équipe pédagogique du lycée Jean MOULIN (ANGERS)
POCHET
Présentation du réticulocytePrésentation du réticulocyte
Globule rouge
passé dans le sang depuis moins de 48 heures
témoin de l’activité érythropoïétique de la moelle
osseuse rouge
Cellule
de taille légèrement plus élevée que l’hématie mature
non saturée en hémoglobine,
possédant encore quelques ribosomes et des traces
de protoporphyrine permettant de terminer la
synthèse de l’hémoglobine

4. Année 2008 4
Équipe pédagogique du lycée Jean MOULIN (ANGERS)
POCHET
Mise en évidenceMise en évidence
Cellule non repérable à la coloration au MGG
À peine plus grosse
À peine plus uniformément colorée en gris-bleuté
Cellule identifiable grâce à la révélation des
ribosomes et traces de protoporphyrine par
Précipitation (colorants vitaux)
Marquage spécifique de l’ARN ribosomal

5. Année 2008 5
Équipe pédagogique du lycée Jean MOULIN (ANGERS)
POCHET
Technique de colorationTechnique de coloration
Colorants
Bleu de Crésyl Brillant,
Bleu de Una,
New Methylen Blue …
Incubation
volume à volume du sang avec le colorant (sauf hématocrite
faible : 1 volume de colorant pour 2 volumes de sang)
10 minutes (37°C) à 20 minutes (température laboratoire)
Réalisation d’un frottis fin et séché rapidement

6. Année 2008 6
Équipe pédagogique du lycée Jean MOULIN (ANGERS)
POCHET
Résultat de la colorationRésultat de la coloration
au microscope grossissement x1000 à immersion
Réticulocytes
Hématie
Évolution cytologique durant 24 à 48 heures avec
charge progressive en hémoglobine
disparition des restes ribosomaux
Attention aux artéfacts

7. Année 2008 7
Équipe pédagogique du lycée Jean MOULIN (ANGERS)
POCHET
DénombrementDénombrement
Compter tous les globules rouges (hématies
matures et réticulocytes) présents dans un
champ
Identifier et dénombrer les réticulocytes
présents parmi eux
Poursuivre le dénombrement jusqu’à avoir
identifier un nombre suffisant de
réticulocytes (environ 50)
Si les zones sont homogènes, les globules
rouges ne peuvent être comptés que tous les
cinq champs

8. Année 2008 8
Équipe pédagogique du lycée Jean MOULIN (ANGERS)
POCHET
DénombrementDénombrement
43 globules rouges dont 5 réticulocytes

9. Année 2008 9
Équipe pédagogique du lycée Jean MOULIN (ANGERS)
POCHET
DénombrementDénombrement
65 globules rouges dont 2 réticulocytes et de nombreux artéfacts !!!

10. Année 2008 10
Équipe pédagogique du lycée Jean MOULIN (ANGERS)
POCHET
Résultat du dénombrementRésultat du dénombrement
En dénombrant les globules rouges 1 champ sur 5
Total de globules rouges : 314
Total de réticulocytes : 110
Calcul de la valeur relative en %
%
rétic
= 110 x 100 / (314 x 5) = 1100 / 1570 = 7 %
7 % des globules rouges sont des réticulocytes
Calcul de la valeur absolue en 10
9
/L
À l’aide du résultat de la numération des hématies, par
exemple 2.10
12
/L
N
rétic = 7 x 2 x 10
12
/ 100 = 140.10
9
/L

11. Année 2008 11
Équipe pédagogique du lycée Jean MOULIN (ANGERS)
POCHET
Interprétation du résultatInterprétation du résultat
Numération réalisée en cas d’anémie
taux d’hémoglobine < 110 g/l
taux d’hémoglobine < 130 g/L
pour en estimer le caractère régénératif selon
un seuil de 120.10
9
/L
< arégénérative ≥
régénérative
Conclusion
N
rétic
= 140.10
9/L : anémie régénérative