PERHITUNGAN KUANTITATIF MIKROBA (haemocytometer)(1).pptx

Pernghitungan kuantitatif mikroba

1. PERHITUNGAN KUANTITATIF MIKROBA

2. Para mahasiswa dapat menguasai t eknik perhitungan mikroba dengan metode perhitungan langsung menggunakan Haemocytometer TUJUAN :

3. Pendahuluan Ada beberapa metode untuk menghitung jumlah mikroba : a. Metode l angsung menggunakan H aemocytometer + =

4. b. Metode Hitung Cawan Cawan yang sudah terdapat mikroba Dihitung menggunakan Colony C ounter

5. c. Metode Turbidimetrik Pengenceran Diukur menggunakan spektrofotometer

6. Alat : Bahan : Alat dan Bahan Biakan khamir ( Saccharomyces cerevisiae ) Haemocytometer Mikroskop Pipet

7. 1. Bersihkan permukaan alat Haemocytometer dan cover glass dengan kertas lensa yang sudah dibasahi alkohol 2. Letakkan cover glass diatas permukaan Haemocytometer PROSEDUR KERJA Haemocytometer Dibersihkan menggunakan kertas lensa Meletakkan cover glass

8. 3. Kocoklah biakan khamir agar homogen , setelah itu diambil 0,1-0,5 ml suspensi ragi / khamir menggunakan pipet dan dimasukkan pada lekukan berbentuk V pada tepi kaca tutup Haemocytometer Menghomogenkan biakan khamir Mengambil biakan khamir Memasukkan biakan khamir ke Haemocytometer

9. 4. Taruhlah Haemocytometer diatas pentas mikroskop dengan hati-hati . Melihat biakan khamir menggunakan mikroskop Hasil pengamatan menggunakan mikroskop

10. Seluruhnya ada 9 area, @ berukuran 1mm 2 Kotak yang ditengah ( semua sisinya dibatasi garis ganda )  dibagi menjadi 25 KOTAK BESAR Setiap kotak besar terbagi menjadi 16 kotak kecil Kotak tengah berisi 25x16= 400 kotak kecil Kedalaman / tinggi cairan = 0,1 mm Volume kotak tengah = 1mm 2 x 0,1mm= 0,1 mm 3 1 mm 3 = 10 -3 cm 3 0,1 mm 3 = 10 -4 cm 3 = 10 -4 ml

11. Menghitung jumlah sel ragi Hitunglah jumlah sel khamir pada kotak 1, 5,.13, 21, dan 25 1 5 13 21 25

12. Cara menghitung SEL RAGI Hitung terlebih dahulu jumlah sel di keseluruhan 25 kotak ∑ total sel = x 25 Volume dari sampel yang mengandung sel yang akan diukur adalah 0.1 mm 3 Sehingga konsentrasi sel adalah = ∑ sel / 0.1 mm 3 = ∑ sel x 10.000 / cm 3 = ∑ sel x 10.000 / ml Contoh   Kotak ∑ sel 1 10 5 20 13 12 21 15 25 18 ∑ sel = x 25 = x 25 = 15 x 25 = 375 sel Konsentrasi sel = 375 x 10.000/ml = 3.75 x 10 6 sel /ml  

13. PENGAMATAN Hitunglah jumlah sel khamir pada kotak 1, 5,.13, 21, dan 25 Kotak 1 Kotak 5

14. PENGAMATAN Kotak 13 Kotak 21

15. PENGAMATAN Kotak 25

16. HASIL PENGAMATAN ∑ sel kotak 1 … sel ∑ sel kotak 5 … sel ∑ sel kotak 13 … sel ∑ sel kotak 21 … sel ∑ sel kotak 25 … sel ∑ total sel … sel Konsentrasi sel … sel /ml

17. PEMBAHASAN Cara perhitungan jumlah sel dan konsentrasi sel dengan Haemocytometer Aplikasi perhitungan jumlah sel dengan Haemocytometer