Principios de histologia

1. HISTOLOGIA PRINCIPIOS GENERALES Jaime Eduardo Velásquez MVZ-UT 2013 Histología Veterinaria Aplicada - Willan J. Banks

2. Histología La  HISTOLOGÍA   ( histós "tejido" y   logía , ‘’tratado , estudio, ciencia’’) es la ciencia que estudia todo lo relacionado con los  tejidos orgánicos : su estructura microscópica, su desarrollo y sus funciones.

3. Histología La histología moderna (anatomía microscópica) es una ciencia refinada dirigida al estudio de la estructura y función de los tejidos desde los mas diversos enfoques multidisciplinarios. Anatomía Fisiología Química Bioquímica Física Microscopia Histoquímica Citoquímica

4. Métodos Histológicos Relación con el avance tecnológico de otras disciplinas. La histología se basa en la implementación de métodos o técnicas que permiten estudiar tanto células vivas como muertas y resolver problemas. Microscopia Ej : contraste de fase o campo oscuro Cámaras transparentes de observación Colorantes vitales y supravitales Cultivos celulares

5. Métodos Histológicos TÉCNICAS DE INCLUSIÓN EN PARAFINA: es el método más común de endurecer el tejido y consiste en infiltrar la muestra con sustancias líquidas que tras un proceso de polimerización o enfriamiento se solidifican , sin afectar a las características del tejido. Obtención de muestras Fijación Deshidratación y aclarado Inclusión Obtención de cortes Tinción y montaje

6. Principios de tinción La tinción tiene como objetivo mostrar las estructuras de la célula, según el colorante se tiene un estructura diferente Colorantes ácidos y básicos Hematoxilina y eosina Tinción de romanowsky Tinción de acido peryodico

7. Técnicas selectas de preparación Son muchos los enfoques técnicos que se deben cumplir para obtener la información. La información que se obtiene es limitada por el tipo por el enfoque técnico que se escoja. Técnicas Citológicas (estructuras de poca importancia) Técnicas de congelación (alteración morfología y función) Histoquímica y citoquímica (identificación de sustancias en las células y tejidos) Técnicas de metacrilato Autorradiografia Inmunohistoquímica ( Ag - isotiocianato de fluorescencia) Microscopia electrónica ( trancision – barrido) Microscopia óptica (campo oscuro, contraste, fluorecencia ) Congelado y fractura (replicas metálicas de los tejidos)

8. Técnicas selectas de preparación Técnicas Citológicas: citologia la rama de la biología que estudia las células en lo que concierne a su estructura, sus funciones y su importancia en la complejidad de los seres vivos.  (estructuras de poca importancia ) Técnicas de congelación (alteración morfología y función )- técnica de liofilizacion ( La  liofilización  es un proceso en el que se congela el producto -170°C y posteriormente se introduce en una cámara de vacío para realizar la separación del agua por  sublimación)

9. Técnicas selectas de preparación Histoquímica y citoquímica (identificación de sustancias en las células y tejidos) Citoquímica : rama de la biología celular enfocada en el estudio de la composición química de las células y sus procesos biológicos moleculares mediante análisis químicos y quimicofísicos que permitan su observación . Histoquímica: "Conjunto de técnicas que permiten la identificación , localización y cuantificación de una sustancia en un tejido o en una célula ".

10. Técnicas selectas de preparación Autorradiografia : Imagen obtenida sobre una placa fotográfica por la aplicación de un corte de tejido quecontiene un cuerpo radiactivo: éste, por su radiación, impresiona la placa y revela así sudistribución en el tejido Inmunohistoquímica (Ag - isotiocianato de fluorescencia ); procedimiento histopatológico que se basa en la utilización de un anticuerpo específico, marcado mediante un enlace químico con una enzima aplicado a una muestra de tejido orgánico, correctamente fijada e incluida en parafina.

11. Técnicas selectas de preparación Congelación - fractura Autorradiografia

12. Microscopia Es el conjunto de técnicas y métodos destinados a hacer visible los objetos de estudio que por su pequeñez están fuera del rango de resolución del ojo normal.

13. Microscopia El tamaño de las células implica el uso de aparatos que permitan aumentar al imagen de las muestras  para discriminar estructuras tisulares diminutas como son las células o sus compartimentos. Estos aparatos se llaman microscopios . Hay dos tipos de microscopios: los ópticos y los electrónicos .

14. Microscopia Los  microscopios ópticos , o de campo claro, ultilizan la luz visible y lentes de cristal que permiten un aumento de las muestras de unas 1000 veces, con un poder de resolución de unos 0,2 micrómetros.

15. Microscopia Los  microscopios ópticos ; Modificaciones Contraste de fase . necesita de objetivos especiales y se basa en ligero retraso que sufre la luz cuando pasa por unas estructuras tisulares en función de la  densidad . Se emplea para ver muestras sin teñir o acuosas, así como células vivas, por ejemplo en tejidos celulares . Campo oscuro . Consiste en la incorporación de un  objeto opaco bajo el condensador , entre la fuente luminosa y la sección de tejido. Este objeto sólo deja pasar la  luz  más lateral que incidirá sobre la muestra de forma  oblicua , allí donde no haya tejido aparecerá obscuro.

16. Microscopia FLUORESCENCIA El microscopio de fluorescencia se usa para observar sustancias fluorescentes denominadas fluoróforos . Los fluoróforos se utilizan como marcadores para la detección de otras moléculas tisulares

17. Microscopia Los   MICROSCOPIOS ELECTRÓNICOS  se basan en la alta frecuencia de los electrones para conseguir un poder de resolución de 1 nanometro . Se usan para observar la ultraestructura de la célula y los tejidos, es decir, para estudiar el nivel subcelular , como orgánulos, membranas u organizaciones moleculares (por ejemplo, se pueden observar los ribosomas). Hay dos tipos de microscopios electrónicos: los de transmisión , que se usan para estudiar la ultraestructura membranosa y molecular de la celula , y el de barrido , que permite estudiar superficies.

18. Microscopia Microscopio electrónico de transmisión En este tipo de microscopio se produce el haz de electrones en un filamento de tungsteno, que funciona como cátodo. Los electrones se condensan mediante electroimanes y se focalizan sobre una sección de tejido.

19. Microscopia Microscopio electrónico de barrido. Los microscopios electrónicos de barrido sirven para observar  superficies tisulares . Ello es posible porque los electrones no atraviesan la muestra sino que interaccionan con su superficie. 

20. INTERPRETACIÓN Exámenes de especímenes (observación macroscópica de órganos) Color y morfología (importancia de la morfología) Cortado y morfología Artefactos histológicos (manejo)

21. Banks, J. (1996). Histología veterinaria aplicada . El manual moderno S.A; México D.F. http:// webs.uvigo.es/mmegias/inicio.html http:// es.wikipedia.org/wiki/Histolog%C3%ADa BIBLIOGRAFÍA

22. GRACIAS MVZ-UT 2013