Resultados lipasa amilasa

1. UNIVERSIDAD TÉCNICA PARTICULAR DE LOJA
Alejandro Stalin; Encalada Karem; Muñoz Jéssica; Pozo Gabriel

Determinación de Enzimas Pancreáticas.
RESUMEN.
Las enzimas son moléculas esenciales para la buena salud producidas por el cuerpo, a cada
instante millones de ellas trabajan en el organismo para que podamos respirar, saltar o comer. El
páncreas participa en la digestión y absorción de los alimentos mediante la secreción de enzimas
al intestino conocidas como las enzimas pancreáticas, como la lipasa y amilasa.(1)
Los valores referenciales de la lipasa son de 0 a 160 unidades por litro (U/L) (2), mientras que el
rango normal de la amilasa es de 23 a 85 unidades por litro (U/L). Algunos laboratorios dan un
rango de 40 a 140 U/L(3).
PALABRAS CLAVE: Enzimas pancreáticas – Lipasa - Amilasa.

INTRODUCCIÓN.
Dentro del grupo de enzimas pancreáticas se encuentran: la lipasa es una enzima que se usa en el
organismo para disgregar las grasas de los alimentos de manera que se puedan absorber. Su
función principal es catalizar la hidrólisis de triacilglicerol a glicerol y ácidos grasos libres. Las
lipasas se encuentran en gran variedad de seres vivos.
Esta enzima en humanos se encuentra en la leche materna y, es idéntica a la enzima colesterol
esterasa (o lipasa pancreática no específica), por lo que se supone que el origen es pancreático y
llega a las glándulas mamarias a través de la circulación sanguínea. La función principal de la lipasa
es la digestión de grasas.
La amilasa, denominada también sacarasa o ptialina, es un enzima hidrolasa que tiene la función
de catalizar la reacción de hidrólisis de los enlaces 1-4 del componente α-amilasa al digerir
el glucógeno y el almidón para formar azúcares simples, se produce principalmente en
las glándulas salivales (sobre todo en las glándulas parótidas) y en el páncreas. Tiene actividad
enzimática a un pH de 7. Cuando una de estas glándulas se inflama, como en la pancreatitis,
aumenta la producción de amilasa y aparece elevado su nivel en sangre (amilasemia).

2. METODOLOGÍA
DETERMINACION DE AMILASA POR REACCIONES ACOPLADAS
Se mide la actividad de la amilasa con un método cinético enzimático. En la reacción, la amilasa
cataliza la hidrólisis del sustrato definido (maltotetraosa) a maltosa. La velocidad de formación de
maltosa se mide mediante el uso de tres reacciones relacionadas que catalizadas por la maltosa
fosforilasa (MP), la β-fosfoglucomutasa (PGM), y la glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6PDH),
dan como resultado la producción de β-dinucleótido de nicotinamida adenina reducido (NADH) a
partir de β-dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD).
La cantidad de CNP formado puede ser detectado espectrofotométricamente a 405 nm dando una
medida directa de la actividad de la α-amilasa de la muestra. La reacción no está inhibida por
factores endógenos.
Medir el incremento de la absortividad por minuto durante 1, 2 y 3 minutos ∆A/min. Mezclar y
leer.

DETERMINACION DE LIPASA POR REACCIONES ACOPLADAS
La lipasa pancreática en presencia de colipasa, desoxicolato, además de iones calcio, hidroliza el
sustrato 1-2-O-dilauryl-rac-glycerol-3-glutárico acido-(6' -metilresorufina)-ester, según la secuencia
de las siguientes reacciones: 1-2-O-dilauryl-rac-glycero-3-glutárico ácido-(6' -metilresorufina)-ester
>1-2-O-dilauril-rac-glycerol + glutáricoacido-6'-metilresorufina ester (no estable) > ácido glutárico
+ Metilresorufina.
R.1 y R.2, ambos reactivos están listos para su uso. Agitar suavemente el R.2 antes de su uso.
Estándar: reconstituir el vial con 1 mL de agua bidestilada. Mezclar y leer.
RESULTADOS
AMILASA
LECTURAS ABSORBANCIAS
1
era
lectura a los 30 segundos 0,768
2
da
lectura al 1 minuto 1,061
3
era
lectura a los 2 minutos 1,306
4
ta
lectura a los 3 minutos 1,534

CALCULOS
Diferencia de absorbancias
1,061 - 0,768 = 0, 293
1,306 - 1,061= 0,243
Promedio absorbancias
0,2546

3. 1,306 – 1,534 = 0,228
VALOR DE AMILASA = 0,246 * 3954 = 1006,68 U/L
LIPASA
BLANCO
LECTURAS ABSORBANCIAS
1
era
lectura 0,289
2
da
lectura 0,295
3
era
lectura 0.303

PATRON
LECTURAS ABSORBANCIAS
1
era
lectura 0,373
2
da
lectura 0,404
3
era
lectura 0,444

MUESTRA
LECTURAS ABSORBANCIAS
1
era
lectura 0,805
2
da
lectura 1,133
3
era
lectura 1,451

CALCULOS
??????�??????����−�??????����
??????�����−�??????����
?????? 58
0,323−0,007
0,0355−0,007
?????? 58
11,09 ?????? 58=??????��,�� ??????/??????
DISCUSION:
De acuerdo con Ruiz Reyes y Ruiz Arguelles los valores normales de amilasa van hasta 90 U/L y los
de lipasa van de 10 – 28 U/L. Los valores obtenidos en nuestra practica fueron amilasa igual 1006,
68 U/L, y de lipasa fue de 643 U/L. Estos valores nos indica que el paciente padece de una
pancreatitis aguda lo cual debe ser correlacionado con la clínica para confirmar el diagnóstico. La
determinación simultánea de estas dos pruebas tienen una especificidad diagnostica del 97% para
pancreatitis (Ruiz Reyes y Ruiz Arguelles, 2010).
PROMEDIO BLANCO
0,007
PROMEDIO PATRON
0,0355
PROMEDIO MUESTRA
0,323

4. CONCLUSIÓN:
Se concluye que los valores obtenidos en este procedimiento (amilasa=1006,68 U/L; lipasa=643
U/L) son mayores a los valores normales en una persona sana, lo que nos demuestra que este
paciente podría padecer un bloqueo del intestino, una pancreatitis u otras enfermedades
relacionadas. Además esta prueba tiene un tiempo de lectura por lo que se recomendaría realizar
de acuerdo al procedimiento, ya que si se pasa en el tiempo puede dar lecturas equivocas y dar
falsos positivos.
BIBLIOGRAFIA:
1. SALUD. Las enzimas digestivas y pancréatica. Datos consultados: 05/07/2014.
http://www.saberalternativo.es/spa/salud.asp?var1=&var2=Las%20enzimas%20digestivas
%20y%20pancre%E1ticas&nar1=1&nar2=788
2. Medline Plus. Información sobre su salud. Exámen de Lipasa. Datos consultados:
05/07/2014. http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003465.htm
3. Medline Plus. Información sobre su salud. Exámen de Amilasa. Datos consultados:
05/07/2014. http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003464.htm
4. Ruiz Reyes, G., Ruiz Arguelles, A., (2010).determinaciones enzimáticas de utilidad
diagnóstica. Fundamentos de interpretación clínica de los exámenes de laboratorio. 2
da

Edición. México. Editorial Panamericana.