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SALUD Y MEDICINA

1. “INSTITUTO DE EDUCACION SUPERIOR TECNOLOGICO PUBLICO MANUEL NUÑEZ BUTRON” LABORATORIO CLINICO “V” SEMESTRE TEMA: RPR (REAGINA PLASMATICA RAPIDA) PARTICIPANTES MARTINEZ OLIVARES PERCY HUMBERTO

2. RPR : PRUEBA RA~iDA DE REAGiNA Las reaginas del suero o plasma se pueden detectar por una reaccion de a,9lutinación en presencia de u n ant1geno no treponémico. E l antígeno contiene partículas de carbón q u e c oag l u ti n a n c uan d o l a r e a cc i ó n e s positiva. B AlrtmGDJJO COlrtllffli : Cardiolipina, lecitina, ' colesterol y micropartículas de en una base de alcohol

3. PRU E BA DE CU I DADOS D E Leer el inserto del set. LA R P R ► ► ► ► ► Permita q ue t o d o s los reactivos y muestras estén a temperatura ambiente (de 20 a 30ºC) antes del uso. Elabore su protocolo de ensayo para la ubicación de las muestras y los controles en la tarjeta. Suavemente mezcle l o s r e a c t i v o s a n t e s de su uso, evitando la formación de espuma. Agite vigorosamente el ANTIGENO CARBON por 20-30 segundos antes de usarse para asegurar su homogeneidad. ► L a v a r l a a g u j a s a li n a . No congelar el con agua destilada y no con solución reactivo antígeno una temperatura 2-8 ºC. D □ D El set debe guardarse a No utilizar los reactivos después de la fecha de ducidad indicada.

4. CU ID ADOS D E L A PRUEBA R P R DE D L o s s u e r o s r e a c t i v o s dé b i l e s s e d ebe n e n s a y a r nuevamente por procedimientos cualitativos y cuantitativos antes de notificar los resultados. Debe compararse un lote nuevo de suspensión de antígeno con una reactividad conocida antes de diario. D su uso Examinar diariamente las agujas que se emplean para depositar el antígeno que den gotas uniformes. Deseche los reactivos si se contaminan o que no demuestran la reacción correcta con los controles. D D modifique el procedimiento de la prueba. diluya o modificar los reactivos . limpiar la aguja disp ensadora No No No D D D \ ~ -.1·.ju._tercambiar reactivos de diferentes lotes. o toqu las tarjetas.

5. Reactivos y/ o Antígeno de carbón Materiaies D D D D D D D D D Jeringa descartable Papel Toalla. Guantes. Lentes Protectores Gabacha Mascarilla P r o t o c o l o s de t r a b a j o . Contenedores Bolsa roja y negra D D Controles del set reactivo no reactivo. Sueros controles internos reactivo y no reactivo (No y D disponibles para de este día) Gotero la práctica D D D Aguja Dispensadora Tarjetas de reacción RPR. para D Pipetas Dispensadoras Descartables de 50ul. Solución Salina al 0.85%. Tubos y Gradillas D

6. Rotador mecánico a 100 +/- 5 D diámetro de ¾ y una cubierta RPM con un de pulgada humidifican te. Cronómetro. Pipetas de 1 µ/, 50 µ/, 1000µ/. D □ 150 µ/, y

7. MUES T RA Suero o Plasma REQUER I DA ► ► ► ► ► ► ► No Liquido Cefalorraquídeo. Requisitos de la muestra libres de: contaminación bacteriana, hemólisis marcada lipemia. No utilizar muestras de plasma almacenadas por más de 48 horas a temperatura ambiente (resultados falsos reactivos).

8. ENSAYO CUA LITATIVO ► Dispense una gota (50 µI) de cada muestra dentro de cada círculo de la tarjeta mantenga la pipeta en posición vertical para asegurar el dispensado preciso. ► ► U s a n d o e l extremo plano d e la pipeta mezcladora, disperse la muestra sobre todo el área dentro del círculo. Coloque la aguja en el gotero. Mezcle bien la suspensión antígeno C a r b ó n . A p r i e t e la b o t e l l a d e l g o t e r o y a s p i r e d e l f r a s c o de a n t í g eno la cantidad de antígeno que será utilizada, Dispense algunas gotas en la cubierta de la aguja. Antes de dispensar el antígeno carbón agite la botella del gotero por unos pocos segundos. Dispense una gota en caída libre en cada uno de los círculos, manteniendo la botella en posición vertical. Colocar la tarjeta en un retador automático Rote a 100+- 5 RPM por ► ► ► 8 minutos ( E N C A M A R A H U ME D A} L ee r i n m e d i a t a m e n t e l o s r e s u l t a d o s m a c r o s c ó p i c am e n t e en e s t a d o hú m edo b a j o u na f uen t e d e luz i n t e n s a .

9. EN S A Y O C U A NTITATIVO ► ► Dispensar u n a g o t a de s o l u c i ó n s a l i n a dentro de l o s círculos n u m e r a d o s d e l 1 a l 5 . No la e s p a r z a . Dispense 50 µI de la muestra dentro del circulo numero 1. Inserte la 0.85% y mezcle c u i da d o s a y pipeta de n tro de la gota de S.S r e p e t i d a m e n t e e s p u m a . de arriba abajo 5 o 6 veces. E v i t e f o r m a c i ó n de ► ► ► ► ► ► T r a n s f e r i r 5 µ I de l a e s t e p r o c e d i m i en t o mezcla del circulo 1 a l c í r cu lo 2 y mezcle. Repita hasta el circulo 5 y descarte de este ultimo 50 µl. Esparza las muestras diluidas sobre el área de cada circulo, iniciando en el circulo numero 5 hasta el numero 1. Antes de dispensar el antígeno carbón agite la botella del gotero por unos pocos segundos. Dispense una gota en caída libre. Colocar la tarjeta en un rotador automático Rote a 100+- 5 RPM por 8 minutos (EN CAMARA HUMEDA ) Leer Inmediatamente, los resultados macroscópicamente en estado húmedo bajo una fuente de luz intensa. Remover y lavar la aguja al final de cada corrida.

10. PRUEBA CUAN TITAVA E N T UBO ► ► ► ► ► de mx + A partir de 0.85%). una dilución de 1: 16 ( 1 O ul 150 ul S.S de solución salina al En cinco círculos colocar una gota 0.85 %. no extender Depositar en el primer circulo 50 ul de muestra 6 veces 1: 16 (evitar la Mezclar aspirando y expeliendo 5 a formación de burbujas) Antes de dispensar el antígeno carbón agite del gotero por unos pocos segundos. Dispense en caída libre. la b o t e l l a un a g o t a ► ► Colocar la tarjeta en un rotador automático Rote a 100+- 5 RPM por 8 minutos (EN CAMARA HUMEDA ) Leer Inmediatamente, los r e s u l t a d o s b a j o u n a m a c r o s c ó p i c a m e n t e e n e s t a d o h ú m e d o f u e n t e d e l u z i n t e n s a . mover y lavar la aguja al final de cada corrida.

11. REPRESEN TACION DE LAS D ILUCIONES SEM I CUANT ITATIVA CIRCULO 1 2 3 4 5 1 :4 1 :8 DILUCION 1 :2 1 :16 1:32 CIRCULO 1 2 3 4 5 DILUCION 1 :32 1:64 1 :128 1:256 1 :512

12. 17 iNY~RPREYAC~ON DE RESULYADOS ► R e a cti v o s : a g l u t i n a c i ó n d e l e v e ( d é b i l - r e a c t i v o ) característica que varía a una intensa (reactivo). Muy débiles resultados reactivos se caracterizan por pequeñas grumos alrededor de la periferia de la zona de ensayo. N o R e a cti v o s : n o p r e s e n t a a g l u t i na c i ó n y m u e s t r a n u n a s p e c t o m a c r o s c ó p i c a m e n t e l i s o y u n i f o r m e . ► . - -- - - -- -