Serología de bacterias, virus y parasitos

1. Serología de Bacterias, virus, parásitos y hongos

2. Serología de Bacterias y Virus

3. ¿Qué es un diagnostico serológico? Análisis que mide el número de anticuerpos que se producen ante la presencia de un virus o bacteria en el suero. Valoración de los anticuerpos ( antiVHA , antiVHB y antiVHC ). Diagnóstico realizado mediante examenes en el laboratorio de las reacciones antígeno-anticuerpo en suero.

4. Objetivos del diagnóstico serológico: Diagnóstico de la enfermedad actual Conocimiento del estado inmunitario de un individuo previo a una vacunación Conocimiento del estado inmunitario de una población Diagnostico de infecciones por microorganismos que no se pueden cultivar Para diagnosticar infecciones en pacientes con tratamiento antibiótico Diagnostico retrospectivo (seroconversión)

5. Un microorganismo patógeno contiene y produce muchos ANTÍGENOS diferentes que el huésped reconocerá como extraños, de modo que la infección con un agente provocará la aparición de varios ANTICUERPOS específicos diferentes. Esta especificidad es la base de la mayoría de las técnicas inmunológicas para detección de Ag o Ac.

6. Si se pretende identificar un Antígeno U n Anticuerpo específico marcado S e utilizará S i se quiere identificar un anticuerpo específico y se marcará el Antigeno que induce su producción. S e utilizará

7. Técnicas de diagnostico serológico

8. Aglutinación Se basan en la unión de antígenos particulados a los anticuerpos . Suele tratarse de pruebas muy sensibles pero con poca especificidad Ejemplos de este tipo de pruebas es la aglutinación con rosa de Bengala empleada en el diagnóstico de la brucelosis . En casos de meningitis, se puede detectar en el LCR la presencia de antígenos de Haemophilus influenzae , Streptococcus pneumoniae , Neisseria meningiditis  y de Streptococcus beta hemolítico grupo B.

9. Fijación del complemento S e basa en la capacidad del complemento para unirse a los complejos antígeno-anticuerpo . l a prueba se desarrolla en dos fases, una primera que es una reacción antígeno anticuerpo en un medio líquido y una segunda consistente en la adición de complemento, una hemolisina dependiente de complemento y eritrocitos . Si se ha producido reacción antígeno-anticuerpo, es decir, si el suero analizado contenía anticuerpos frente al antígeno, el complemento queda fijado y no puede activar la hemólisis de los glóbulos rojos.

10. Inmunofluorescencia P ueden utilizarse para detectar anticuerpos o para detectar la presencia de un patógeno. En ambos casos la reacción finaliza mediante la adición de un anticuerpo conjugado a una sustancia fluorescente, habitualmente fluoresceína . Se usa en la detección de virus respiratorios (influenza, parainfluenza , adenovirus, virus sincicial respiratorio), virus herpes, sarampión y parotiditis, así como en bacterias como Bordetella pertussis , Rickettsia rickettsia y Chlamydia trachomatis .

11. Elisa ( Enzimoinmunoanalisis ) Las pruebas inmunoenzimáticas se basan en una reacción antígeno anticuerpo que tiene lugar sobre un soporte sólido (normalmente una microplaca de plástico) a la que se ha adsorbido un antígeno o un anticuerpo .  La prueba puede desarrollarse en diferentes modalidades pero en todas ellas la reacción final se revela mediante un enzima que modifica un substrato que adquiere color. El color que se produce es proporcional a la cantidad de anticuerpo específico que se fija al antígeno . Se trata de pruebas muy sensibles y específicas . El método se utiliza en la detección de virus sincial respiratorio. Chlamydia trachomatis , Neisseria gonorrhoeae , rotavirus, adenovirus, virus hepatitis, virus varicela-zóster, etcétera.

12. SEROLOGIA DE PARASITOS Y HONGOS

13. Serologia Tecnica utilizada para la deteccion de anticuerpos especificos contra parasitos y hongos, constituyendo el diagnostico serologico Identificar problemas de salud Determinar la distribucion de una enfermedad Determinas la incidencia y la prevalecencia de una enfermedad calendario de vacunacion objetivos

14. Utilidad en parasitologia Establecer diagnostico diferenciales entre diferentes patologias infecciosas: paracitarias , fungicas , bacterianes . Eleccion de la mejor conducta terapeutica Establecer politicas sanitarias de prevencion Estudios epidemiologicos Algunas aplicaciones Paracitosis hemotesiduales : Toxoplasmosis Chagas Toxocariosis Hidatidosis Cistecercosis Amebiasis Leishmaniasis Paludismo

15. Parasitos como antigenos Somaticos o estructurales: superficie citoplasmaticos Metabolicos : productos de la actividad fisiologica , antigenos de secrecion – excresion . Proteinas , glicoproteinas , polisacaridos , lipidos . T ecnicas Floculacion Aglutinacion Presipitacion Fluorecencia Inmunoenzimoanalisis

16. CONDICIONES PRE ANALÍTICAS EN SEROLOGIA Información Solicitud Obtención de muestra 6hrs de ayuno, extracción de sangre venosa, tubos secos sin anticoagulante Transporte: separadas y refrigeradas Conservación: a 4°c,-20°c

17. El Western Blot Es un método para identificar proteínas en una mezcla compleja de proteínas, transfiriendo las proteínas separadas mediante el peso molecular, de un medio gelificado a una membrana de nitrocelulosa de unión de las proteínas para su análisis.

18. Pruebas serológicas : Se usan varias pruebas serológicas para detectar anticuerpos anti- leishmania a) Prueba de inmunofluorescencia indirecta b) Enzimoinmunoensayo c) Prueba de aglutinación directa d) Prueba inmunocromatográfica rápida (en varilla o tira) Serología para Leishmaniosis

19. El método mas sencillo de diagnostico es el frotis y la gota gruesa, tomados preferentemente del estado febril y coloreados con derivados del Romanowsky , siendo la coloración de Giemsa la mas usada. Este método puede emplearse en postas o establecimientos de salud locales que cuenten con microscopio.  se ha recomendado el uso de naranja de acridina, que tiñe el núcleo para detectar mejor a los parásitos . Pruebas serológica para malaria

20. se coloca una gota de sangre en un portaobjetos limpio y con la esquina de otro, se disemina la sangre hasta llegar a un diámetro de más o menos 1 cm. El espesor debe ser tal que permita leer a través de la preparación. GOTA GRUESA Las preparaciones se dejan secar y se colorean con la técnica de Giemsa

21. DIAGNÓSTICO SEROLÓGICO: se aplican las técnicas que detectan anticuerpos específicos contra el parásito ya que tienen la capacidad de evidenciarlos a partir de la tercera semana de ocurrida la infección . con por lo menos dos técnicas de principio diferente, empleamos las técnicas de ELISA e IFI, ratifique el resultado reactivo obtenido en el tamizaje. En conjunto ambas pruebas alcanzan el 95-98% de sensibilidad y especificidad. PRUEBA SELOGICA PARA EL MAL DE CHAGAS

22. La hemaglutinación indirecta emplea glóbulos rojos de carnero, previamente tratados con ácido tánico, como soporte de extractos solubles del parásito (antígeno). Es una prueba altamente sensible y específica. En la Los kits comerciales simplifican la ejecución de la técnica, proporcionando el antígeno absorbido a los glóbulos rojos. HEMAGLUTINACIÓN INDIRECTA (HAI)

23. Las micosis profundas son enfermedades infecciosas causadas por un grupo heterogéneo de hongos, que, desde su hábitat natural, el medio ambiente, penetran accidentalmente en el organismo . La puerta de entrada más frecuente es el aparato respiratorio, especialmente en los casos de Histoplasmosis y Coccidioidomicosis en los cuales el hongo puede permanecer, originando lesiones pulmonares o puede diseminarse a través de vasos sanguíneos o linfáticos al tejido cutáneo, visceral y óseo PRUEBAS SEROLOGICAS PARA DIAGNOSTICO DE MICOSIS PROFUNDAS

24. Pruebas serológicas para hongos Técnica de doble difusión en gel Se utilizó el equipo comercial fabricado por M. A. Bioproducts de Whittaker Corporation de U.S.A., basado en los principios. De inmunodifusión o doble difusión descrito por Oudin y Ouchterlony . Se utilizaron los antígenos y sueros controles de Histoplasma capsulatum , Coccidioides immitis y Aspergillus spp . del equipo comercial y el antígeno y suero control de Paracoccidioides brasiliensis suministrado por Yarzábal y col Antígenos y sueros controles:

25. Técnica de aglutinación de látex para Criptococcus neoformans Esta es una prueba cualitativa y semi -cuantitativa que permite detectar en suero y L.C.R., la presencia del antígeno capsular polisacárido de Criptococcus neoformans . Esta técnica utiliza partículas de látex impregnadas con Globulinas normales, estas últimas nos permiten detectar las aglutinaciones no específicas que pueden ocurrir debido a la presencia de ciertas Macroglobulinas ( Ej : factor reumatoideo ). Se utilizó el equipo comercial Crip - tococcal Antigen Latex Agglutination System de M. A. Bioproducts , Whittaker U.S.A.

26. HISTOPLASMOSIS Enfermedad de Darling, Fiebre de las cavernas, Fiebre de las minas abandonadas oreticuloendoteliosis ) ----------------- Histoplasma Capsulatum Pruebas serologicas Dentro de los estudios serológicos para histoplasmosis se encuentran: la aglutinación de partículas de látex, precipitación e inmunodifusión ; éstas pruebas resultan positivas en 2 o 5 semanas después de lainfección . La prueba de fijación del complemento en la enfermedad positiva permanece positiva en un título de 1:32 o más; en las pruebas de inmunodifusión dos bandas de precipitación son de valor diagnóstico en ala histoplasmosis activa. Otra prueba diagnóstica es la histoplasmina

27. Histoplasmosis cutánea diseminada asociada a VIH-SIDA

28. Bibliografía http://www.cun.es/la-clinica/servicios-medicos/departamento/microbiologia-clinica/diagnostico-serologico - Clínica Universidad de Navarra. http://www.ins.gob.pe/insvirtual/images/otrpubs/pdf/Libro_Zoonosis_ok21.01[1].pdf -Instituto Nacional de Salud Microbiologia Medica- Jawetz