Turbidimetria y Nefelometria

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1. TURBIDIMETRÍA
&NEFELOMETRÍA

2. CUANDO UNA LUZ
IMPACTAUNAPARTÍCULA
ENSUSPENSIÓN...
ABSORBE
REFLEJA
DISPERSA

3. DISPERSIÓN DE LUZ
POR UNA PARTÍCULA
DEPENDE DE...
*Tamaño
*Índice de Refracción con
relación a su entorno.
*Longitud de Onda

4. CASO 1
Longitud de Onda> Tamaño de Partícula= Luz dispersada simetricamente.
FUENTE DE LUZ
RAYO
ADELANTE =
ATRÁS =
DISPERSIÓN RAYO INCIDENTE

5. CASO 2
Longitud de Onda=Tamaño de Partícula= Luz dispersada hacia adelante > atrás.
FUENTE DE LUZ
RAYO
ADELANTE +

6. CASO 3
MUESTRA
FUENTE DE LUZ
DISPERSIÓN RAYO INCIDENTE
Longitud de Onda<Tamaño de Partícula= Luz dispersada hacia adelante.

7. QUÉ MIDEN?
TURBIDIMETRIA
•MIDELADISMINUCIÓNDELALUZTRANSMITIDAA
TRAVÉSDELASOLUCIÓNPARTICULADA.
•RECOMENDADA PARA↑[MX].
NEFELOMETRIA
•MIDELALUZDISPERSADAADIVERSOSÁNGULOS
PORLASUSPENSIÓNPARTICULADA.
•RECOMENDADA PARA↓[MX].

8. INSTRUMENTACIÓN
TURBIDIMETRIA
Espectrofotómetro,laturbidezselimita
porexactitudysensibilidaddel
aparato.
*CualquierLongituddeOnda.
*340nm--->Inmunopp.↓[Mx].
*500-700--->Pbas.conPartículas.
*800--->Análisis↑[Mx]

9. INSTRUMENTACIÓN
NEFELOMETRIA
Nefelómetro,longituddeondade
excitación=Detección.
10-90°
*ParaRxa-adetecta
presenciadeexcesode
Antígeno.

10. APLICACIONES
*DETERMINACION DE PROTEÍNAS ESPECÍFICAS
Utilizando métodos inmunológicos.
*Detección de Proteínas séricas 1ml/dL.
*Medición de sensibilidades Microbianas a los
antibióticos.
*Formación de coágulos para tiempos de
coagulación.
*Medición de[CÉLULASSANGUÍNEAS].
Tamaño
*Proteínas Solubles = 1 –20 nm
*C. Antígeno-Anticuerpo = 50 –110 nm
*Agregados = 300 –1000 nm
Luzdispersada depende de...
Tamaño,CantidadeÍndicede
RefraccióndeEspeciesdispersante.
(Cambios = mayor DETECTIBILIDAD)

11. POR EJEMPLO
Antígenos o
Anticuerpos
unen
Partículas de
Látex 100-300 nm
forman
Agregados de
Mayor Tamaño
*InmunoanálisisPotenciado.

12. REFERENCIAS
•LIBROMÉTODOSÓPTICOSDEANÁLISIS. POREUGENED. OLSEN. PAG.482-483. REVERTE, 1990
•LIBROQUÍMICAANALÍTICAMODERNA. PORW. F. PICKERING. PAG276-279. REVERTE, 1996.
•LIBROBIOQUÍMICACLÍNICAYPATOLOGÍAMOLECULAR. PORX. FUENTESARDERIU.VOLUMEN1.
PAG274-277.

13. MUCHAS
GRACIAS