3. Morfologi Mikroorganisme-2020 diuniversitas.ppt

3. Morfologi Mikroorganisme-2020 diuniversitas.ppt

1. Morfologi Mikroorganisme: Bakteri
Tujuan melakukan pengamatan morfologi
mikroorganisme
Hasil yang diharapkan
Cara melakukan pengamatan morfologi
mikroorganisme

2. Identifikasi Mikroorganisme
Pengamatan sel mikroorganisme:
Makroskopik
Mikroskopik
Identifikasi dilakukan berdasarkan karakter-karakter tertentu,
misal:
Struktur reproduksi (seksual dan aseksual)
Bentuk sel vegetatif
Sifat fisiologi & biokimia

3. Identifikasi Bakteri
Sifat Morfologi
Makroskopik: Penampakan koloni, pinggiran koloni, warna
Mikroskopik: bentuk sel (batang, bulat, vibrio), sifat gram (positif atau
negatif), pembentukan endospora
Sifat Biokimia
Pemakaian glukosa
Oksidasi – Fermentasi
Uji Oksidase
Uji Katalase
Motilitas (pergerakan)

4. Penampakan Koloni Bakteri

5. Pengamatan Morfologi Sel Bakteri
Bakteri sukar diamati krn
Ukuran kecil
Transparan
Harus menggunakan pewarnaan/pengecatan:
Mewarnai latar belakang
Mewarnai sel
Pewarnaan/Pengecatan menggunakan Biological Dye

6. Biological Dye
Senyawa aromatik yg memiliki gugus warna & bermuatan
(positif/negatif)
Warna diberikan oleh gugus kromofor
Contoh:
Methylen Blue
Congo Red
Basic Fuchsin
Crystal Violet

7. Jenis-jenis Pengecatan Bakteri
Pengecatan Negatif:
Yg diwarnai latar belakang
Cat yang digunakan: nigrosin/tinta cina
Sel tidak diberi perlakuan terlebih dahulu
Pengecatan Sederhana (Simple Stain):
Sel diwarnai menggunakan satu macam cat:
Crystal violet, metilen blue, safranin
Sel diberi perlakuan terlebih dahulu(preparat olesan/smear)

8. Jenis-jenis Pengecatan Bakteri [2]
Pengecatan Differensial:
Membedakan bakteri ke dalam kelompok
Mewarnai sel dengan lebih dari satu macam cat:
Hucker’s Crystal Violet (Cat Utama)
Lugol’s iodine (Mordan)
Alkohol Aseton (Pencuci/Decolorizer)
Safranin (cat lawan/counterstain)

9. Tahap-tahap Pengecatan Negatif
1.Bersihkan gelas objek dengan alkohol 70%
2.Teteskan 1-2 tetes Nigrosin/Tinta Cina pada gelas objek
3.Letakkan 1 ose biakan bakteri dalam tetesan
4.Dengan gelas objek yg lain, tarik tetesan sehingga
membentuk lapisan tipis pada gelas objek
5.Amati pada perbesaran 970-1000x dengan oli imersi

10. Skema Pengecatan Negatif

11. Tahap-tahap Pembuatan Preparat Olesan/Smear
1.Bersihkan gelas objek menggunakan alkohol 70%
2.Beri 1-2 ose akuades steril di atas gelas objek
3.Tambahkan 1 ose bakteri dalam akuades
4.Ratakan suspensi bakteri dalam akuades ( 1cm)
5.Keringanginkan preparat
6.Fiksasi preparat dengan cara melewatkan di atas api 2-3 kali

12. Tahap-tahap Pengecatan Gram [1]
1. Tetesi preparat dengan Hucker’s Crystal Violet
selama 1 menit
2. Cuci dengan air mengalir
3. Tetesi dengan Lugol’s Iodine selama 1 menit

13. Tahap-tahap Pengecatan Gram [2]
4. Cuci dengan air mengalir,
beri decolorizer selama 10-20
detik
5. Tetesi dengan Safranin
selama 1 menit
6. Cuci dengan air mengalir
7. Keringkan &
amati pd
perbesaran 970x

14. Skema Pengecatan Gram