Amilasa y-lipasa (1)

amilasa-lipasa

1. UNIVERSIDAD SAN PEDRO FACULTAD DE MEDICINA ESCUELA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA CURSO : ANALISIS CLINICO II DOCENTE : CABELLO CHAVEZ PABLO TEMA : AMILASA Y LIPASA   INTEGRANTES: ESPADA GONZALES YULISSA PALMA CIRIACO KARIM PEREZ MAGUIÑA ELSA SAL Y ROSAS MENDOZA MARGARITA    

2. INTRODUCCIÓN Los enzimas son proteínas que actúan como catalizadores, es decir, como aceleradores de reacciones químicas. Los enzimas producen cambios químicos sobre otras sustancias sin variar ellas mismas. Todas las transformaciones que suceden en las células se deben al incontable número de enzimas que hay en cada organismo. Son imprescindibles para la vida, ya que sin ellos, los cambios serían demasiado lentos.

3. AMILASA Las denominadas amilasas son aquellas enzimas con función de romper los enlaces glucosídicos entre monosacáridos dejándolos de forma individual para ser asimilados. Hay tres tipos de amilasas dependiendo de su lugar de origen, estas son la amilasa salival, amilasa pancreática y amilasa intestinal (del duodeno ).

4. La  amilasa tiene la función de digerir el glucógeno y el almidón para formar azúcares simples, se produce principalmente en las glándulas salivares (sobre todo en las glándulas parótidas) y en el páncreas. Tiene un pH de 7. Fue la primera enzima en ser identificada y en pocas palabras, en biología es una enzima presente en la saliva, que hidroliza el almidón de todo alimento.

5. CLASIFICACIÓN α-Amilasa (Nombre alternativos: 1,4-α-D- glucano - glucanohidrolasa ; glucogenasa ) Las amilasas son enzimas dependientes de cloruro, completamente a funcionales en ausencia de iones de cloruro. Actúan a lo largo de cualquier punto de la cadena de los carbohidratos, descomponiéndolos en dextrina desde la amilo pectina. Dado que puede actuar en cualquier punto de la cadena es más rápida que la β-amilasa . En los animales es una enzima digestiva mayor y su pH óptimo está entre 6.7 y 7.2

6.   β-Amilasa   (Nombres alternativos: 1,4-α-D- glucano - maltohidrolasa ; amilasa sacarogénica ) Otra forma de amilasa, la β-amilasa es también sintetizada por bacterias, hongos y plantas. Actúa desde el extremo no reductor de la cadena, catalizando la hidrólisis del segundo enlace α-1,4, rompiendo dos unidades de glucosa (maltosa) a la vez. Durante el proceso de maduración de la fruta la β-amilasa rompe el almidón en azúcar dando lugar al sabor dulce de la fruta. La amilasa presente en el grano de cereal es la responsable de la producción de malta. Muchos microorganismos también producen amilasa para degradar el almidón extracelular. Los tejidos animales no contienen β-amilasa, aunque puede estar presente en microorganismos saprófitos del tracto gastrointestinal. Tiene un pH óptimo de 12.

7. γ-Amilasa   (Nombres alternativos: Glucano 1,4-α- glucosidasa ; aminoglucosidasa; Exo-1,4-α- glucosidasa ; glucoamilasa; α- glucosidasa lisosómica; 1,4-α-D- glucano glucohidrolasa) Además de romper el último enlace α(1-4) glicosídico en el extremo no reductor de la cadena de amilasa y amilopectina, liberando glucosa, la γ-amilasa puede romper los enlaces glicosídicos α(1-6). A diferencia de las otras amilasas esta forma es más eficaz en medios ácidos y su pH óptimo es de 3. También colabora en el momento de la excitación.

8. LIPASA La   lipasa  es una enzima que se usa en el organismo para disgregar las grasas de los alimentos de manera que se puedan absorber. Su función principal es catalizar la hidrólisis de triacilglicerol a glicerol y ácidos grasos libres. Las lipasas se encuentran en gran variedad de seres vivos. La función principal de esta lipasa gástrica es ayudar a la absorción de grasas.

9. AMILASA MUESTRAS CLINICAS Suero , plasma heparinizado u orina. La α-amilasa es estable en la muestra durante una semana a temperatura ambiente ( 20-25°C) y varios meses cuando la muestra se guarda bien tapada y refrigerada a 2-8C. MATERIALES 5 tubos de ensayo de 13 X100mm. 1 Micropipeta de 1.0 mL . Puntas para micropipeta . gradilla Pipeta de 2ml cronometro Equipo Fotómetro termostable a 37ºC con filtro de 405 nm . COMPOSICIÓN DEL REACTIVO MES tampón pH 6.0, 100 mmol /L 2-Cl-4-Nitrofenil- α- D- maltotriosido (CNPG3) 2.25 mmol /L Cloruro de sodio 350 mmol /L Acetato de calcio 6 mmol /L Tiocianato de potasio 900 mmol /L Azida de Sodio 0.095%

10. LECTURAS ABSORBANCIAS 1era lectura a los 30 segundos 0,768 2da lectura al 1 minuto 1,061 3era lectura a los 2 minutos 1,306 4ta lectura a los 3 minutos 1,534 CALCULOS Diferencia de absorbancias 1,061-0.768 0.298 1.306-1,061 0,243 1,306-1,534 0,228 Promedio de absorbancia 0,2546 Valor de la AMILASA 0,246 * 3954 1006,68 U/L y para orina * 7908 PROCEDIMIENTO TECNICA Longitud de onda . . . . . . . . . 405 nm Temperatura . . . . . . . . . . . ..37°C Reactivo 1.0 mL Muestra 20 µL Orina 10 µL

11. LIPASA E stable 72 horas a Temperatura ambiente Refrigerada 7días Congelada 2meses Material necesario 5 tubos de ensayo de 13 X100mm. 1 Micropipeta de 1.0 mL . 1 Micropipeta de 10µL . Gradilla Equipo: Fotómetro termostable a 37ºC con filtro de 580 nm . Cronómetro CONTENIDO DEL EQUIPO Reactivo 1 Tampón TRIS pH: 8.4, 40 mmol /L Colipasa 40 000 U/L Desoxicolato 1.8 mmol /L Estabilizante Reactivo 2 Tartrato pH: 4.0, 1.6 mmol /L Sustrato 0.24 mmol /L Cloruro de calcio 0.1 mmol /L Detergente Estándar Lipasa PROCEDIMIENTO TECNICA Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . 580 nm Temperatura : . . . . . . . . . . . . . . . 37ºC Blanco

12. LIPASA PROMEDIO BLANCO 0.007 PROMEDIO PATRON 0.0355 PROMEDIO MUESTRA 0.323 CALCULOS Muestra – blanco *58 Patron – blanco 0.323-0.007 * 58 0.0355-0.007 11.09 * 58 643.22 U/L LECTURA ABSORBANCIA 1era lectura 0,289 2da lectura 0,295 3era lectura 0,303 BLANCO LECTURA ABSORBANCIA 1era 0,373 2da 0,404 3era 0,444 LECTURA ABSORBANCIA 1era 0,805 2da 1,133 3era 1,451 PATRON MUESTRA

13. Valores normales de amilasa en sangre:  D e 23 a 85 unidades por litro (U/L). En algunos laboratorios el rango normal oscila entre 40 a 140 U/L . Valores normales de lipasa en sangre:  D e 0 a 160 unidades por litro (U/L ). Valores normales de amilasa en orina:  El rango normal de amilasa en orina comprende de  2.6 a 21.2 UI/h  (unidades internacionales por hora). Sin embargo, como ocurre con todos los análisis, estos valores normales pueden variar de un laboratorio a otro . Valores normales de lipasa en orina:  M enor a 5 unidades por litro (U/L). Lo habitual en este caso es la realización de una  recolección de orina de 24 horas , ya que es la mejor forma de medir los valores de lipasa en la orina. VALORES NORMALES

14. Asparaginasa Ácido acetilsalicílico ( aspirin ) Pastillas anticonceptivas Medicamentos colinérgicos Ácido etacrínico Metildopa Opiáceos (codeína, meperidina , morfina) Diuréticos tiazídicos LOS MEDICAMENTOS QUE PUEDEN AUMENTAR LAS MEDICIONES DE AMILASA INCLUYEN:

15. Interpretación clínica LOS NIVELES AUMENTADOS DE AMILASA EN LA SANGRE PUEDEN INDICAR - Cáncer de páncreas, ovarios, pulmón. -Colecistitis. -Cólico de vesícula biliar. -Embarazo ectópico con rotura de trompas. -Obstrucción intestinal. -Pancreatitis aguda. -Problemas de obstrucción de conductos biliares o pancreáticos. -Ulcera de estómago perforada

16. - En la parotiditis -La litiasis salival con obstrucción determina también la hiperamilasemia -En el curso de diversas infecciones tifoidea, tifus exantemico , paludismo, neumonía, sarampión, meningitis meningococica , se observan a veces, aumentos moderados, posiblemente en relación con una afección toxica de páncreas. -En la insuficiencia renal pueden registrarse aumentos moderados de la amilasemia - En la insuficiencia cardiaca con uremia extra renal y trastornos electrolíticos. -En trastornos del sistema reticulo endotelial - En pacientes con acidosis metabólico

17. - Cáncer de páncreas. -Lesión pancreática. -Enfermedades renales. -Toxemia en el embarazo. -Hepatopatías graves -En el mongolismo de modo inconsciente -En la tiroxicosis severa -en grandes quemaduras -En algunos casos de diabetes pancreática con esclerosis de la glándula y en todas las destrucciones masivas del páncreas. LOS NIVELES DISMINUIDOS DE AMILASA EN LA SANGRE PUEDEN INDICAR

18. -alteraciones pancreáticas: -Pancreatitis aguda y carcinoma  pancreático -Colecistitis -Ictericias parenquimatosas -Cirrosis hepatica - Ulcus duodenal - Nefropatia grave -Intestino estrangulado o impactado -Peritonitis VALORES AUMENTADOS DE LIPASA NOS INDICAN

19. - Durante el embarazo como variación fisiológica, especialmente en los últimos meses, con pronta recuperación después del parto -En el curso de la tuberculosis y otras enfermedades infecciosas - Frecuentemente en la diabetes sacarina VALORES DISMINUIDOS DE LIPASA NOS INDICAN