Práctica 4 F1 - Cultivos y Antibiograma.pptx

Práctica 4 de microbiología

1. CARACTERÍSTICAS DEL DESARROLLO EN CULTIVOS W. AUREA CACERES ROJAS Patólogo Clínico

2. CARACTERÍSTICAS MACROSCÓPICAS DE LOS CULTIVOS Son también importantes en la identificación bacteriana Va depender del estado físico del medio de cultivo MEDIO LÍQUIDO: Desarrollo superficial, Turbidez y Opacidad después de agitar. Sedimento: Cantidad y consistencia MEDIO SEMISÓLIDO: Evalua motilidad MEDIO SÓLIDO: Tamaño, Forma, Elevación, Borde, Textura, Olor, Color. En agar inclinado: característica de la estría

3. COLONIA EN MEDIO DE CULTIVO SÓLIDO Una colonia es una agrupación de bacterias formada a partir de la reproducción de una Unidad Formadora de Colonia (UFC) sobre un medio sólido, generalmente es visible a simple vista. Las características coloniales, son usadas como base para clasificar a los microorganismos En medios líquidos o semisólidos no hay formación de colonias

4. INOCULACIÓN EN MEDIO SEMISÓLIDO

5. EVALUACIÓN DE MOVILIDAD Móvil Móvil Inmóvil

6. MEDIO SÓLIDO/TUBO INCLINADO Estr í a ondulada Estr í a recta

7. CARACTERÍSTICAS DE LA ESTRÍA Filiforme Ondulada (Equinulada) Perlada Rizoide Arborescente Difusa

8. INOCULACIÓN DE MEDIO SÓLIDO

9. MORFOLOGÍA COLONIAL

10. TEXTURA MUCOIDE/VISCOSA SECA/DURA CREMOSA/SUAVE MEMBRANOSA

11. CULTIVOS MIXTOS: Múltiples colonias

12. ANTIBIOGRAMA

13. ANTIBIOGRAMA Método In Vitro, que se realiza para determinar la susceptibilidad (sensibilidad o resistencia) de una bacteria a una variedad de agentes antimicrobianos. El primer objetivo de esta prueba es medir la sensibilidad a los antibióticos de una cepa bacteriana responsable del cuadro infeccioso  OBJETIVO TERAPEUTICO El segundo objetivo, es hacer seguimiento a los mecanismos de resistencia bacteriana, al detectar aumento de las resistencias, puede tomarse medidas correctoras  OBJETIVO EPIDEMIOLOGICO

14. MÉTODOS

15. Método de Difusión en Disco: KIRBY BAUER El más utilizado en laboratorios convencionales Se enfrenta la bacteria en estudio, con discos impregnados con antibióticos en una concentración conocida

16. MATERIALES Torunda Culvo con bacterias aisladas Discos Antibióticos Medio de cultivo Mueller Hinton Plano de colocación Tubo con suero fisiológico estéril

17. 1. Preparación del inoculo

18. 1.1. Con un asa de siembra estéril , pon una colonia bacteriana en el agar de la placa de Petri . Advertencia! La muestra se realiza en asepsia alrededor del mechero Bunsen.

19. 1.2. Hacer una suspensión con esta colonia bacteriana en una tubo estéril con suero fisiológico (5mL). Se usa Escala de Turbidez de MacFarland (0,5) En el suero , frota el asa de inoculación en las paredes del tubo para dispersar todas las bacterias . ADVERTENCIA! La muestra se realiza en asepsia alrededor del mechero Bunsen. 1.3. Repite 4 veces , para tener introducidas 3-5 colonias bacterianas en el tubo .

20. 2. Inoculación del medio Mueller Hinton ANTIBIOGRAMA

21. E n el tubo de inoculación “ I ” , inserta una torunda estéril . ADVERTENCIA! La muestra se realiza en asepsia alrededor del mechero Bunsen. Humedece la torunda y escurre el exceso de líquido en la pared del tubo .

22. Inocúlalo en el medio de Mueller Hinton por extensión de la torunda en su superficie . Consigue estrías estrechas . Reproduce la operación dos veces rotando 60° la placa cada vez para asegurarnos una buena distribución del inóculo en la superficie del medio 60° 60° = Rayas en 3 pases

23. 3. Colocación de los discos antibióticos .

24. Posiciona el agar Mueller Hinton previamente sembrado en el plano de depósito previsto . Con unas pinzas estériles , situa los discos antibioticos en la superficie de agar Cuando rellenas con discos, aplica una pequeña presión para segurar el mantenimiento del disco, pero no demasiado para evitar el riesgo de perforación del agar.

25. 4. Incubación de medio Incubar la placa en posición invertida , de 18 a 24 horas a 37°C

26. 5. Analiza tus resultados

27. Tras la incubación , mide el diámetro de las zonas de inhibición del crecimiento alrededor de los discos de antibióticos

28. INTERPRETACIÓN Sensible : cuando un aislado bacteriano es inhibido in vitro por una concentración de un antimicrobiano que se asocia a una alta probabilidad con el éxito terapéutico. Intermedio : cuando un aislado bacteriano es inhibido in vitro por una concentración de un antimicrobiano que se asocia a un efecto terapéutico incierto. Resistente : cuando un aislado bacteriano es inhibido in vitro por una concentración de un antimicrobiano que se asocia a una alta probabilidad con el fracaso terapéutico

29. PUNTOS DE CORTE EUCAST ( COMITÉ ESPECIFICO DE EUROPA ) CLSI ( COMITÉ ESPECIFICO DE LOS ESTADOS UNIDOS ) Los puntos de corte, bien en valores de halos de inhibición o de CMI, se utilizan para separar estas categorías de sensibilidad. Farmacodinamia, farmacocinética, ( Pk )/Pd , han contribuido de manera decisiva en la consideración de las categorías clínicas utilizadas en la interpretación del antibiograma.

30. Se usa una tabla de lectura , ya estandarizada , según la bacteria a estudiar

31. ANTIBIOGRAMA AUTOMATIZADO

32. ANTIBIOGRAMA AUTOMATIZADO

33. ANTIBIOGRAMA AUTOMATIZADO

34. LECTURA INTERPRETADA Para la adecuada interpretación del antibiograma no basta con la categorización de sensible, intermedio o resistente, para ello se hace indispensable la lectura interpretada que busca a través de los resultados obtenidos una aproximación al mecanismo de resistencia, logrando un adecuado manejo de los antibióticos y una mejor vigilancia y control de la resistencia bacteriana. 3 pilares fundamentales de la lectura interpretada: Definir en fenotipo de resistencia a partir del estudio de sensibilidad Deducción del mecanismo de resistencia Determinación de modificaciones en el fenotipo de resistencia

35. CONCLUSIONES La profusión de opciones farmacológicas, el gravísimo incremento en la resistencia bacteriana y los avances en métodos de diagnóstico microbiológico obligan al médico a adquirir el conocimiento en esas áreas y estar al día con los avances y cambios correspondientes. De igual manera es fundamental que se adquieran y desarrollen las destrezas necesarias para una correcta lectura interpretada del antibiograma que con toda seguridad redundará en una mejor práctica clínica. El conocimiento de los pasos básicos para una correcta interpretación del antibiograma debe ser un objetivo para cada profesional de la salud a fin implementar un adecuado tratamiento ante un determinado proceso infeccioso.

36. Cultivos en Microbiología https://youtu.be/30htD86TWzE Antibiograma https://youtu.be/PVQL9eAKK_g Como interpretar un cultivo https://youtu.be/aoMJv68kwUM LINK DE ACCESO PARA VIDEO